聚苯胺修饰金电极传感器的制备及在废水4-硝基苯酚检测中的应用

4-硝基苯酚(4-NP)为典型具有“三致”效应的环境优先控制污染物。建立废水中4-NP快速、灵敏的检测方法,对提高监测时效具有重要意义。在酸性水溶液中,以过二硫酸铵作引发剂,采用化学氧化法制备聚苯胺(PANI),对4-NP表现出良好的电催化性能。用扫描电镜对电极的表面形貌进行了表征,4-NP在该电极表面的反应为受扩散控制的两电子转移过程,修饰电极的有效面积是裸电极的1.72倍。采用计时电流法、计时电量法分别计算了催化速率常数k_(cat)=1.50×10^(4)L/(mol·s)和4-NP的扩散系数D=5.12×10^(-4)cm^(2)/s。最优条件下,在7.50×10^(-7)~2.31×10^(-3)mol/L浓度范围内,△I与4-NP浓度的对数(lgc)呈良好的线性关系,检出限为0.4μmol/L(S/N=3)。该电化学传感器重复性好、稳定性高、有一定的抗干扰性。对实际水样中4-NP的含量进行了测定,其加标回收率在89.08%~102.30%的范围之间。

地下连续墙施工技术在地铁工程中的应用

地下连续墙是一种较为先进的深基坑支护形式,是地铁围护结构常用的一种方式,这种围护结构施工时对于周围建筑物地基扰动小。文章以深圳市地铁16号线安良站为实例,根据安良站地质水文状况,制定地下连续墙专项施工方案,对其施工工艺及重难点处理措施进行介绍,可为类似项目提供参考。

个人养老金制度受益归宿之探

我国于2022年11月推出个人养老金制度。为了探究个人养老金的具体受益归宿,本文利用模拟分析方法,在现有税收政策、金融政策的前提下,对不同收入阶层、不同年龄群体受益情况进行测算;并在借鉴多国个人养老金经验基础上,明确我国个人养老金应进一步完善税收优惠制度,促使养老金与资本市场共生,适时调整缴费上限,放宽账户管理,以及厘清各方主体责任。

柯萨奇病毒A组10型时空进化分析

目的了解柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)总体的分子流行病学及时空进化规律。方法对美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)中2020年4月10日前提交的所有完整VP1序列进行分析。采用最大似然法(maximum likelihood,ML)构建系统进化树,采用贝叶斯因子法(Bayes factor,BF)分析平均碱基替换速率、最早共同祖先和起源进化,采用贝叶斯天际线图(Bayesian skyline plot,BSP)方法分析群体动态历史,采用EasyCodeML 1.2软件对不同序列集进行选择压力分析。结果1950—2018年CV-A10分为A~F共6个基因型,其中C基因型分为C1~C3基因亚型。CV-A10于1865[95%的最大密度置信区间(95%highest probability density interval,95%HPD interval):1818.82—1908.34]年起源于美国,约在1990年传播至中国大陆,2010—2018年在世界范围广泛传播。在2009年和2014年,CV-A10出现两次显著的种群扩张,且2018年后有效种群大小为98.79,显著高于以前。CV-A10每年的平均碱基替换速率为4.66×10^(-3)(95%HPD interval:3.97×10^(-3)~5.35×10^(-3))。2008年后,我国大陆的优势株为C3基因亚型毒株,该亚型毒株的起源可追溯到2006.19(95%HPD interval:2005.32—2006.99)年。筛选到6个位于VP1区的正选择压力位点,分别为140E、141E、220T、239E、282A和284T。结论本研究中CV-A10分为A~F型,C基因型分为C1~C3基因亚型。CV-A10起源于1865年的美国,曾出现两次种群扩张。筛选到的220T、239E、282A和284T可能与病毒进入及中和表位有关。

柯萨奇病毒A组6型通用抗原检测试剂盒的建立

目的建立柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)疫苗抗原定量检测试剂盒,用于CV-A6疫苗以及含有CV-A6的手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)多价疫苗的研发及质量控制。方法分别采用多个CV-A6毒株与多家企业的CV-A6抗原,通过结合能力和中和能力比较,从6个单克隆抗体(9H1、3D9、10F4、5A6、6D12和10G8)中筛选出具有广谱高结合能力及高中和能力的单克隆抗体,建立ELISA法CV-A6抗原定量检测试剂盒。对试剂盒进行线性、专属性、准确度、精密度、耐用性等验证。将试剂盒分发国内主要CV-A6疫苗研发企业,由各企业分别采用该试剂盒对各自制备的CV-A6疫苗原液以及生产工艺各中间环节制品进行CV-A6抗原含量检测,考核试剂盒适用性。结果以多克隆抗体CV-A6-3I作为包被抗体,最佳浓度为1∶8 000,以5A6单克隆抗体作为酶标抗体,最佳浓度为1∶8 000;包被条件为4℃过夜;封闭液为10%FBS+PBST+5%蔗糖,37℃封闭2 h;抗体稀释液为ED-33,酶标抗体作用条件为37℃1 h;显色条件为37℃10 min。建立的CV-A6抗原检测试剂盒线性范围为11~178 ng/mL,线性良好,定量检出限为11 ng/mL;与同为小RNA病毒科的CV-A16、甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)、CV-A10、EV-A71以及MEM、DMEM和PBS缓冲液等均无交叉反应,专属性良好;检测回收率在83%~114%之间,单个实验员和2个实验员重复检测CV均小于15%,准确度、重复性和中间精密度均良好;抗原或酶标抗体孵育时间上下浮动5 min或反应温度上下浮动2℃,回收率在83%~107%之间,耐用性良好。该试剂盒检测4个企业制备的CV-A6疫苗原液和疫苗制备过程中的中间制品均具有良好的线性和平行性,提示该试剂盒对国内主要CVA6疫苗及中间制品均具有良好的适用性。结论本研究采用具有高效价、广谱中和活性的单克隆抗体和多克隆抗体,建立了双抗体夹心ELISA法CV-A6疫苗抗原定量检测试剂盒。经方法验证和适用性研究,证明该试剂盒各项指标良好,可作为CV-A6疫苗通用试剂盒用于CV-A6抗原含量检测,为CV-A6疫苗和HFMD多价疫苗研发及质量控制提供了可靠的检测手段。

2018—2019年广东省和江苏省手足口病病原分子流行特征分析

目的分析广东省和江苏省2018—2019年手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)病原分子流行特征,为HFMD的防控及疫苗研发提供依据。方法对2018—2019年广东省和江苏省5个临床中心监测的HFMD病例采集咽肛拭子,荧光PCR检测为肠道病毒(enterovirus,EV)阳性的样本,应用EV通用引物和特异性引物扩增5′UTR区和VP1区序列,通过BLAST确定病原种类,并应用VP1序列构建种系进化树,分析毒株分子流行特征。结果广东省和江苏省2018—2019年HFMD病例中96%以上为CV-A16(63.69%~72.43%)和CV-A6(24.81%~32.38%)阳性,其次为CV-A10和EV-A71。本研究检测到的EV流行株分别为EV-A71 C4、CV-A16 B1/B2、CV-A6D3和CV-A10 F3亚型,同样也是近年来我国大陆流行的主要亚型。结论 CV-A16和CV-A6感染在HFMD发病中占较高比例,对婴幼儿人群有较大危害,应研发包含CV-A16和CV-A6在内的HFMD多价疫苗。

肠道病毒71型全病毒灭活疫苗(C4亚型)的交叉中和特性

目的评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)全病毒灭活疫苗(C4亚型)的交叉中和特性。方法采用微量细胞病变法检测我国EV71全病毒灭活疫苗(C4亚型)免疫血清(46份)对B0~B4、C1、C2、C4和C5亚型的中和效价,计算几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)及其增长倍数(fold increase in geometric mean titer,GMFI),并评价B0~B4、C1、C2、C5亚型与C4亚型检测结果的相关性(R^(2))。结果46份免疫血清的各亚型EV71中和抗体阳转率均为100%,GMTs范围为288.9~871.3,GMFIs为72.2~217.8。B0~B4、C1、C2和C5亚型与C4亚型检测结果呈正相关,R^(2)分别为0.6528、0.6184、0.6391、0.7195、0.6891、0.6693、0.7264和0.6974。结论我国EV71全病毒灭活疫苗(C4亚型)对B0~B4、C1、C2和C5亚型EV71具有良好的交叉中和活性。