基于血清药物化学与加权基因共表达网络分析探究葛兰心宁胶囊治疗冠心病的作用

目的探究葛兰心宁胶囊治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)可能调控的关键靶点基因。方法HPLC法对入血成分进行鉴定,同时借助GSE20680数据集,基于P<0.05标准,筛选出15549个差异表达基因。利用加权基因共表达网络分析,鉴定与疾病相关的模块基因。确定入血成分可能调控的关键靶点基因,进一步取交集,对其靶点进行富集分析,探索关键靶点的功能和参与的通路,并完成其与相关成分的分子对接。通过动物实验验证加权基因共表达网络分析结果。结果鉴定出21种入血成分。GO分析显示,交集基因主要参与凋亡、炎症反应的调控。KEGG分析显示,入血成分治疗CAD主要参与NF-κB信号通路、糖尿病心肌病等相关通路。分子对接实验验证了同时调控关键靶点PTGS2、PLAU 4种入血成分的相互作用。动物实验显示,葛兰心宁胶囊能够降低小鼠主动脉窦的脂质蓄积,缩小斑块面积,减少PTGS2、PLAU表达。结论本研究揭示了葛兰心宁胶囊入血成分及其治疗CAD可能调控的关键靶点基因,为其进一步临床应用提供了重要依据。

灵宝护心丹治疗动脉粥样硬化的转录组学机制研究

目的:研究灵宝护心丹改善动脉粥样硬化的疗效和潜在作用机制。方法:C57BL/6小鼠喂以正常饮食,载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠喂养高脂饮食诱导动脉粥样硬化模型,12周后随机分为模型组、灵宝护心丹低剂量组、灵宝护心丹中剂量组、灵宝护心丹高剂量组和他汀组。给予药物8周后,检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;通过油红O染色、Masson染色、苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉根部的病理变化。通过转录组学测序分析灵宝护心丹减轻动脉粥样硬化的机制。结果:与模型组相比,灵宝护心丹组的斑块及TC、TG、LDL-C水平明显降低,斑块的胶原面积明显增多,炎性细胞浸润减少。转录组学测序结果显示,灵宝护心丹组和模型组相比筛选出733个差异基因,富集到的通路包括脂肪酸生物合成、胶原蛋白形成、炎症信号通路等。结论:灵宝护心丹对动脉粥样硬化有显著改善作用,机制可能涉及脂质代谢和炎症反应的关键通路。

益气活血化痰方联合阿托伐他汀钙对颈动脉粥样硬化患者的临床疗效

目的考察益气活血化痰方联合阿托伐他汀钙对颈动脉粥样硬化患者的临床疗效。方法103例患者随机分为对照组(51例)和观察组(52例),对照组给予阿托伐他汀钙,观察组在对照组基础上加用益气活血化痰方,疗程24周。检测临床疗效、Crouse评分、中医证候评分、血脂指标(TG、TC、HDL、LDL)、炎症因子(SAA、IL-1β、IL-6)、MHR、安全性指标变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组Crouse评分、中医证候评分、TG、TC、LDL、炎症因子、MHR降低(P<0.05),其中中医证候评分、TC、SAA、IL-6低于对照组(P<0.05)。2组未发现明显不良反应。结论益气活血化痰方联合阿托伐他汀钙可安全有效地调节颈动脉粥样硬化患者机体脂质代谢紊乱,减轻炎症反应,降低炎症风险,从而达到缓解甚至逆转病情的作用。

基于PERK-eIF2α-CHOP通路调控巨噬细胞胆固醇稳态及冠心康含药血清干预机制研究

目的观察具有益气化痰活血作用的冠心康对人单核/巨噬细胞株THP-1细胞PERK-eIF2α信号通路及相关活化转录因子(ATF)和C/EBP同源转录因子(CHOP)的影响,探究冠心康对胆固醇在巨噬细胞内质网中的代谢稳态调节及作为“脂毒”流出后异常沉积的相关作用。方法采用100 ng·mL^(-1)PMA及80μg·mL^(-1)氧化低密度脂蛋白诱导THP-1细胞株,构建巨噬细胞模型,并随机分为模型组、冠心康组、辛伐他汀组、正常组。分别采用10%小牛血清及含药血清干预模型细胞72 h后收集细胞。HE染色观察巨噬细胞病理形态变化,同时进行胆固醇及脂滴含量测定。分别采用Real-time PCR及Western blot法检测各组细胞PERK、eIF2α、ATF、CHOP mRNA及蛋白的表达。结果HE染色观察到模型组细胞内呈现较多红色脂滴,经胆固醇含量测定,明显高于正常组,脂滴含量测定与前者一致(P<0.01)。模型组细胞ATF、CHOP基因表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,冠心康组和辛伐他汀组细胞ATF、CHOP基因表达水平均显著降低(P<0.01)。PERK磷酸化以及CHOP蛋白表达水平在冠心康和辛伐他汀干预组表现为显著下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论冠心康可能通过调控PERK-eIF2α-CHOP通路相关基因及蛋白,减少泡沫细胞形成,从而减轻内质网应激,维持细胞内胆固醇稳态,减少细胞内胆固醇沉积。

肺炎克雷伯菌致多发性肝脓肿并多脏器功能不全1例

肝脓肿是临床常见的感染性疾病,以局限性脓液积聚在肝脏为特征,临床多表现为高热、寒战及上腹部疼痛。各种微生物可由多种途径,如胆道、淋巴、门静脉、肝动脉系统通路侵入肝脏,引起肝脏感染、化脓等病理生理改变。如不能及时有效的治疗,可引起全身中毒性反应,甚至死亡[1]。笔者临床遇见1例肺炎克雷伯菌致多发性肝脓肿并发多脏器功能不全,采用抗生素联用抗感染,联合清热解毒、托毒排痈中药与清瘟败毒饮加减治疗成功。

冠心康通过miRNA干预HepG2细胞胆固醇代谢的研究

目的研究冠心康对不同浓度氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导HepG2细胞后胆固醇水平及胆固醇代谢相关miR-33a、miR-122以及低密度脂蛋白受体(LDLR)的影响。方法制备冠心康和辛伐他汀含药血清,将HepG2细胞随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组和冠心康组,分别用20、40、80、160 mg/L浓度的ox-LDL诱导HepG2细胞24 h后,再用各组含药血清孵育48 h。采用油红O染色法观察HepG2胆固醇代谢模型的细胞形态,实时荧光定量PCR法检测miR-33a、miR-122、LDLR基因表达水平,Western blot法检测LDLR蛋白表达。结果与模型组比较,冠心康可显著减少不同浓度ox-LDL诱导后HepG2细胞中橙色脂滴含量,上调ox-LDL诱导后细胞中LDLR基因和蛋白的表达,并抑制miR-33a和miR-122的表达(P<0.05,P<0.01)。结论冠心康可通过上调LDLR基因和蛋白的表达,抑制miR-33a和miR-122的表达,从而降低细胞中胆固醇含量,缓解胆固醇代谢失衡进程。

灵宝护心丹对动脉粥样硬化小鼠肠道黏膜屏障和肠道菌群的影响

目的探讨灵宝护心丹对动脉粥样硬化模型小鼠的改善效果及其对肠道菌群结构的调节作用,并比较其与他汀类药物对肠道菌群影响的差异性。方法高脂饮食喂养ApoE^(−/−)小鼠12周诱导动脉粥样硬化模型,随机分为模型组及灵宝护心丹低、中、高剂量(4.68、9.36、18.72 mg/kg)组和阿托伐他汀(2.4 mg/kg)组。造模成功后连续给药8周,C57BL/6小鼠喂养普通饲料作为空白组。通过油红O染色和苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠主动脉窦的斑块面积和病理结构改变,检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholestero,LDL-C)水平,采用16S rRNA测序技术检测小鼠粪便微生物群的多样性和丰度,免疫荧光染色和qRT-PCR检测结肠紧密连接蛋白Occludin的表达情况。结果与模型组比较,灵宝护心丹能够有效减少动脉斑块沉积和局部炎症损伤,降低TC、TG、LDL-C水平(P<0.01、0.001),改善肠道微生物的丰富度和多样性,且与他汀类药物治疗后的肠道微生物有显著差异,灵宝护心丹组的差异物种是Parasutterella属、Sutterellaceae科、Burkholderiales目和γ-变形菌纲等,阿托伐他汀组的差异物种是拟杆菌属、拟杆菌科、Butyricimonas属和Marinifilaceae科等。免疫荧光和qRT-PCR结果显示灵宝护心丹显著增加结肠Occludin的表达(P<0.05),提高小鼠肠道黏膜屏障的完整性。结论灵宝护心丹具有改善动脉粥样硬化、调血脂、保护肠黏膜屏障的作用,其机制可能与调节肠道菌群有关。

高血压用药有“时间窗”

很多高血压患者服用降压药物后,血压控制效果欠佳,除了考虑降压方案是否合适之外,未能掌握高血压药物的服药时间也是重要原因之一。