PKM2促进肿瘤发展的作用机制研究

为了分析丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)在不同肿瘤中的表达情况及其与肿瘤患者临床预后的关系,并探索PKM2对肿瘤细胞增殖和迁移的影响及其作用机制,用TCGA数据库和免疫印迹分析了33种肿瘤中PKM2的表达情况,探索了PKM2与不同肿瘤患者预后的关系。在肺癌细胞系中过表达PKM2,利用CCK8和Transwell方法分析PKM2对肺癌细胞增殖和迁移能力的影响。利用免疫印迹检测不同肿瘤细胞中过表达和敲低PKM2对热休克蛋白90α(Hsp90α)分泌的影响以及上皮-间质转化(epithelial-mesenchgmal transition,EMT)相关蛋白的变化。TCGA数据分析显示,PKM2在包括乳腺癌、肺癌等15种肿瘤中高表达,且9种肿瘤中PKM2的高表达与肿瘤的预后具有显著相关性。在肺癌细胞中过表达PKM2后,肺癌细胞的增殖和迁移能力显著增强。过表达PKM2能够显著增加乳腺癌和肺癌中Hsp90α的分泌。敲低PKM2能够抑制N-钙黏蛋白(N-cadhesion)和波形蛋白(Vimentin)的表达,促进E-钙黏蛋白(E-cadhesion)的表达。研究结果表明,PKM2在多种肿瘤中高表达且与肿瘤预后显著相关,能够通过影响Hsp90α的分泌以及上皮-间质转化相关蛋白的表达从而促进肿瘤的进展。PKM2有望成为潜在的广谱肿瘤标志物和治疗靶点。

FKBP1B在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的明确FK506结合蛋白1B(FK506 binding proteins 1B,FKBP1B)在乳腺癌中的表达情况及其对乳腺癌细胞的增殖和迁移能力的影响及机制。方法利用商业化的乳腺癌组织芯片进行免疫组织化学检测FKBP1B的表达,共包含乳腺癌组织及乳腺癌旁组织的石蜡标本72例,并分为癌旁组织3例,肿瘤组织69例。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中FKBP1B的表达情况。在MCF-7细胞中过表达FKBP1B后,分别用CCK-8和Transwell检测FKBP1B对细胞增殖和迁移能力的影响。并用Western blot法检测FKBP1B对热休克蛋白90α(Hsp90α)的表达和分泌的影响。结果FKBP1B在乳腺癌肿瘤组织中的含量显著高于正常组织,且FKBP1B的表达与TNM分期之间具有显著相关性。RT-PCR和Western blot法表明,FKBP1B在MDA-MB-231中的含量显著高于MCF-7。过表达FKBP1B后,MCF-7的细胞增殖和迁移能力较对照组明显增强。FKBP1B的表达与Hsp90α的分泌呈正相关,过表达FKBP1B能够促进Hsp90α的分泌。结论FKBP1B在乳腺癌中表达增高且与疾病恶性进展相关,过表达FKBP1B能够促进Hsp90α的分泌以及乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,其可作为乳腺癌诊断和治疗的新的潜在分子靶点。