新农科背景下高新农业实习实践课程思政教学探索

高新农业实习实践课程思政教学改革旨在把国家号召和典型案例与专业知识相结合,挖掘教学内容中的思政元素,探索思政元素和专业知识有机融合的多种教学方法。传播正能量,激发学生的学习兴趣,使学生认识到要成为知农爱农的新型人才就必须努力学习科学技术,为提高农业高新技术,保护生态环境而贡献自己的力量。

思政教育与专业知识相融合的教学探索——以植物营养学为例

植物营养学课程思政教学改革深入挖掘教学内容中的思政元素,探索思政元素和专业知识有机融合的多元化教学方式,将视频、动画、图片和文字说明等多种媒介方法融合为一体,理论和实践相结合,丰富教学内容。在教与学实践中用一些实例对学生进行思政教育,引导学生深入实践增强家国情怀。通过植物营养学课程思政教学设计,秉承立德树人的理念,达到学好专业知识、保护绿水青山、美化生态环境的目标,增强学生的责任感和使命感。

植物营养诊断创新性实验“三部曲”模式探索

提出改良植物营养诊断实验的传统验证性实验类型,增加设计性、研究性实验的必要性。改良传统实验课授课的基本程序“讲解—操作—巡视—总结—批改”。以药用植物营养与施肥技术课程中的人参、西洋参、三七、黄芪和柴胡为例,重点阐述探索植物营养诊断创新性实验“三部曲”模式,即以实验课前备学导航、课堂自主设计与互动探究、课后成功体验等增加学生学习兴趣,巩固实验内容的模式。

连作大豆根分泌物对根腐病病原菌的化感作用

采用砂培、水培和室内培养等试验方法研究了连作大豆根分泌物对根腐病病原菌的化感作用 .结果表明 ,与对照相比 ,连作和轮作大豆根分泌物对半裸镰孢菌、粉红粘帚菌和尖镰孢菌尤其是对半裸镰孢菌的生长有明显的化感促进作用 ,差异达显著或极显著水平 .低浓度时 ,连作大豆根分泌物对半裸镰孢菌和粉红粘帚菌生长的化感促进作用明显大于轮作大豆 ,差异达显著水平 .同一茬口 ,高浓度根分泌物对半裸镰孢菌生长的化感促进作用小于低浓度 ,而且在连作大豆中差异达显著水平 .与对照相比 ,高浓度的邻苯二甲酸和丙二酸 (L5和B5)对半裸镰孢菌、粉红粘帚菌和尖镰孢菌尤其是对半裸镰孢菌的生长有化感抑制作用 ,差异达显著或极显著水平 .而低浓度的邻苯二甲酸和丙二酸对半裸镰孢菌、粉红粘帚菌和尖镰孢菌的生长有化感促进作用 。

用RT-PCR检测病料中犬瘟热病毒的研究

利用RT-PCR技术检测了来自不同地区水貂、狐狸、貉子和老虎病料中是否存在犬瘟热病毒。根据犬瘟热病毒H和N基因核苷酸序列,设计合成2对引物。利用这2对引物分别对14份病料进行了检测。利用H基因引物从7份病料中扩增出761 bp的核酸片段,利用N基因引物也从同样的7份病料中扩增出586 bp的核酸片段。其余病料的检测结果为阴性。2对引物对病料的检测结果一致。

犬瘟热病毒小熊猫株核蛋白和融合蛋白基因克隆及序列分析

根据GenBank中报道的CDV核苷酸序列,设计合成了2对特异性引物,对犬瘟热病毒小熊猫株(CDVLP)核蛋白(N)和融合蛋白(F)两种主要结构蛋白基因进行了克隆、测序及序列分析。结果表明,CDVLP株N蛋白基因全长1571bp,预测编码523个氨基酸;F蛋白基因全长1989bp,预测编码662个氨基酸,F蛋白氨基酸序列中含有5个潜在的N-联糖基化位点。聚类分析提示,CDVLP株是一株与CDV强毒株亲源关系很近的毒株。用DNAstar软件对CDVLP株和Onderstepoort弱毒株N蛋白和F蛋白进行了疏水性及抗原表位预测分析。抗原表位差异提示CDVLP毒株N和F蛋白的免疫原性可能要优于Onderstepoort弱毒株。在分子水平上阐明了CDVLP株的N和F蛋白基因更适合作为构建基因疫苗和重组活载体疫苗的目的基因。

犬瘟热病毒核蛋白基因重组腺病毒的构建、鉴定与表达

核蛋白基因(N)位于犬瘟热病毒基因组的108—1679位置处,是保守性较强的免疫原性蛋白,因此选择N基因作为目的基因,利用酶切、连接等方法构建了含犬瘟热病毒核蛋白基因的穿梭质粒pVAX?E3LPN。以含CAV-2SY株全基因组的pPoly2-CAV-2为载体,构建了重组质粒pCAV-2-CDVLPN,利用脂质体介导法转染MDCK细胞,转染三次后,细胞出现了典型的腺病毒样病变。电镜负染、切片观察,酶切、PCR扩增及测序鉴定的结果表明表达犬瘟热核蛋白基因的重组犬2型腺病毒构建成功,表达的核蛋白分子量为58kDa。

表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒构建与包装

为构建表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒,用MluⅠ和SphⅠ双酶切真核表达载体pVAXLPN,获得CDV N基因表达盒,将CDV N基因表达盒克隆入预先用SspⅠ酶切后的线性化质粒pVAXΔE3中,构建含CDV N基因表达盒的转移质粒pVAXΔE3LPN。用NruⅠ和SalⅠ双酶切转移质粒pVAXΔE3LPN,回收E3区部分缺失的含CDV N基因表达盒的目的片段,定向克隆入同样酶切处理含CAV-2全基因组的质粒载体ppoly2-CAV-2中,构建E3区部分缺失的包含CDV N基因表达盒的重组质粒pCAV-2-CDVLPN。重组质粒pCAV-2-CDVLPN经AscⅠ酶切获得线性化基因组CAV-2-CDVLPN。此基因组与NruⅠ和SalⅠ分别酶切CAV-2 SY基因组获得的片段混合,利用脂质体介导共转染MDCK细胞,重复转染3次后,出现典型CAV-2病变,经电镜观察和酶切鉴定,证明表达犬瘟热核蛋白的重组犬2型腺病毒包装成功。

连作大豆根分泌物对根腐病病原菌及种子萌发的影响

采用砂培、水培和室内培养等方法研究了连作大豆根分泌物对根腐病病原菌及种子萌发的影响。结果表明 :与对照相比 ,连作和轮作大豆根分泌物对粉红粘帚菌和尖镰孢菌尤其是对半裸镰孢菌的生长有明显的促进作用 ,差异达显著或极显著水平。低浓度 (C1和R1处理的浓度 )连作大豆根分泌物对半裸镰孢菌和粉红粘帚菌生长的促进作用明显大于轮作大豆 ,差异达到显著水平。同一茬口 ,最高浓度 (C3和R3处理的浓度 )大豆根分泌物对半裸镰孢菌生长的促进作用小于 2个低浓度 (C1、C2、R1和R2处理的浓度 )的 ,而且在连作大豆中差异达显著水平。与轮作大豆相比 。

邻苯二甲酸和丙二酸对大豆根腐病病原菌的化感作用

采用室内培养和统计分析相结合的方法研究了大豆根分泌物中的邻苯二甲酸和丙二酸对根腐病病原菌的化感作用。结果表明 :与对照相比 ,高浓度的邻苯二甲酸和丙二酸 (L5 和B5)对半裸镰孢菌、粉红粘帚菌和尖镰孢菌 ,尤其是对半裸镰孢菌的生长有化感抑制作用 ,差异达显著或极显著水平。而低浓度的邻苯二甲酸和丙二酸对半裸镰孢菌、粉红粘帚菌和尖镰孢菌的生长有化感促进作用 。

连作对大豆吸收、分配锌的影响

采用盆栽试验方法，研究了连作对大豆吸收、分配和积累锌的影响。结果表明：各生育时期，连作大豆吸收、分配和积累锌的趋势与轮作大豆相同，但吸收和积累锌量低于轮作大豆，尤以盛花期、结荚期大豆叶片中锌含量降低幅度较大。连作影响了植株体内吲哚乙酸氧化酶活力和植株干物质重。轮作大豆植株体内吲哚乙酸氧化酶活力与连作２年相比差异极显著；轮作大豆植株干物质重最大，连作２年最小。

表达犬瘟热病毒融合蛋白基因重组腺病毒的构建与鉴定

利用pVAX1载体的表达元件CMV启动子和poly(A)多聚腺苷酸信号构建了含犬瘟热病毒融合蛋白基因(F)的重组犬腺病毒。首先,利用酶切、连接等实验方法构建了含CDV启动子F蛋白基因表达盒的转移质粒pVAXΔE3LPF。再以含CAV-2SY株全基因组的pPoly2-CAV-2为载体,构建重组质粒pCAV-2-pVAXLPF,利用脂质体介导方法转染MDCK细胞,转染3次后,细胞出现了典型的犬腺病毒感染样病变。电镜负染和切片观察、酶切、PCR扩增及测序鉴定的结果表明,成功构建了含犬瘟热病毒融合蛋白基因的重组犬腺病毒,表达的融合蛋白分子质量为72ku。在MDCK细胞上连续传30代试验表明重组病毒CAV-2-pVAXLPF具有良好的遗传稳定性。

犬瘟热病毒基因疫苗表达载体构建及在真核细胞中的表达

利用pCI载体构建了犬瘟热病毒基因疫苗表达载体质粒pCIF和pCIN,通过脂质体介导法将这两种真核表达质粒分别转染MDCK细胞,用RT-PCR法进行转录水平的检测,并用间接ELISA法检测目的蛋白是否表达。结果表明,真核表达质粒pCIF和pCIN已被成功构建,这两种重组质粒转染MDCK细胞72h后就可检测到目的基因的转录和两种目的蛋白的表达,表达的蛋白均能与抗CDV抗体发生特异性的抗原抗体反应。这为研究预防犬瘟热的基因疫苗奠定了良好的基础。

植物氮·磷和钾营养失调症状诊断设计性实验研究

探索了利用设计性实验进行植物氮、磷和钾营养失调症状诊断的教学模式,改革了该实验传统的教学方法。设计性实验既激发了学生的学习积极性,又提高了科研探索能力。

《植物营养学》双语教学的实践与探索

通过植物营养学双语教学的实践,探索出教材选择、教学模式、教学手段、教学课件和师资力量是开展植物营养学双语教学的关键,分析了存在的问题,并提出了相应的解决措施。

犬瘟热病毒核蛋白基因重组腺病毒的构建、鉴定与表达

核蛋白基因(N)位于犬瘟热病毒基因组的108-1679位置处,是保守性较强的免疫原性蛋白,因此选择N基因作为目的基因,利用酶切、连接等方法构建了含犬瘟热病毒核蛋白基因的穿梭质粒pVAX△E3LPN。以含CAV-2 SY株全基因组的pPoly2-CAV-2为载体,构建了重组质粒pCAV-2-CDVLPN,利用脂质体介导法转染MDCK细胞,转染三次后,细胞出现了典型的腺病毒样病变。电镜负染、切片观察,酶切、PCR扩增及测序鉴定的结果表明表达犬瘟热核蛋白基因的重组犬2型腺病毒构建成功,表达的核蛋白分子量为58kDa。

植物营养学双语教学若干问题探讨

通过几轮植物营养学双语教学的实践,探讨了在教材选择、教学模式、教学手段、教学课件和师资力量等关键教学环节中存在的问题,并提出了相应的解决措施,以期与同行相互磋商,共同推进高校植物营养学双语教学工作的开展。

利用设计性实验提高学生科学探索能力

本文利用设计性实验,改革了植物营养元素失调症状诊断实验传统的教学方法。通过设计性实验教学方法的改革不但加深了学生对实验课内容的掌握,而且提高了学生科学探索能力,为毕业论文实验和今后的科学研究工作打下坚实的基础。

角碱蓬液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因克隆及表达载体的构建

[目的]克隆角碱蓬液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(ScNHX1),并构建其表达载体。[方法]以用400 mmol/L NaCl处理的角碱蓬为材料,利用RT-PCR技术从中克隆ScNHX1,并通过酶切、连接方法将ScNHX1连接至pCAMBIA1302载体中。[结果]试验成功克隆得到ScNHX1,测序得出该基因片段大小为1 617 bp,并成功构建了含该目的基因的表达载体pCAMBIA-ScNHX1。[结论]该研究为耐盐转基因植株的培育奠定了基础。