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绿色荧光蛋白在植物细胞生物学中的应用 被引量:4
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作者 鞠传丽 王东 +2 位作者 孔冬冬 胡勇 何奕昆 《生命的化学》 CAS CSCD 2001年第6期528-530,共3页
关键词 绿色荧光蛋白 GFP 融合蛋白 植物细胞 生物学研究
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原核生物细胞分裂的调控机制 被引量:1
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作者 鞠传丽 孔冬冬 +2 位作者 王东 胡勇 何奕昆 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2002年第4期17-21,共5页
原核细胞的分裂机制一直是人们研究的热点 ,经过多年来的不懈研究 ,人们发现FtsZ蛋白在细胞分裂过程中发挥着重要作用 ,并且是最早出现在分裂位点的蛋白 ,而且直接参与启始了细胞分裂环的形成 ;此外 ,对ftsQAZ基因簇的深入研究也大大加... 原核细胞的分裂机制一直是人们研究的热点 ,经过多年来的不懈研究 ,人们发现FtsZ蛋白在细胞分裂过程中发挥着重要作用 ,并且是最早出现在分裂位点的蛋白 ,而且直接参与启始了细胞分裂环的形成 ;此外 ,对ftsQAZ基因簇的深入研究也大大加深了人们对原核细胞分裂的认识。就目前原核生物细胞分裂的调控机制作一综述。 展开更多
关键词 原核生物 细胞分裂 调控机制 FtsZ蛋白 ftsQAZ基因簇 细胞周期 染色体复制
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衣藻质体分裂相关基因CrFtsZ2的克隆及其进化分析 被引量:5
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作者 胡勇 王东 +2 位作者 孔冬冬 鞠传丽 何奕昆 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期127-132,共6页
It is generally accepted that chloroplast was originated from a photosynthetic cyanobacterium by endosymbiosis. Recent findings indicated that a FtsZ like protein, which was the homologue of the essential prokaryotic ... It is generally accepted that chloroplast was originated from a photosynthetic cyanobacterium by endosymbiosis. Recent findings indicated that a FtsZ like protein, which was the homologue of the essential prokaryotic cell division protein, involved in the division of chloroplasts in plants. Using degenerate oligodeoxyribonucleotide primers based on conserved regions of the prokaryotic cell division protein FtsZ, a 570?bp cDNA fragment, named CrFtsZ 2, was isolated from Chlamydomonas reinhardtii by RT PCR. It was used to search the Chlamydomonas reinhardtii EST Database, and several contig EST sequences were found. The complete CrFtsZ 2 cDNA sequence was assembled by software and was amplified by RT PCR. With a 1?305?bp ORF(opening reading frame), the full length 1?815?bp CrFts Z cDNA had a 19?bp 5′UTR and a 490?bp 3′UTR. The CrFtsZ 2, which showed significant homology with other FtsZs , was a typical FtsZ gene, and encoded a precursor of 434 amino acid residues with a putative transit peptide in its N terminal. Phylogenetic tree of 23 FtsZs homologies reconstructed based on 300 conserved amino acid regions of the FtsZs suggested that CrFtsZ2 shared an ancestor probably with the FtsZ in cyanobacteria. 展开更多
关键词 衣藻质体分裂相关基因 CrFtsZ2 克隆 进化
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叶绿体分裂相关基因NtFtsZ2-1在大肠杆菌中的表达与定位 被引量:6
4
作者 孔冬冬 王东 +3 位作者 胡勇 鞠传丽 何奕昆 孙敬三 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期368-372,共5页
FtsZ蛋白在细菌的分裂中担任着重要作用,能够在分裂位点形成一个环状结构而控制细菌的分裂过程。胞内FtsZ蛋白浓度的明显降低或异常升高均可阻断正常的细胞分裂过程进而导致丝状菌体的产生。我们为了研究烟草FtsZ蛋白与大肠杆菌FtsZ蛋... FtsZ蛋白在细菌的分裂中担任着重要作用,能够在分裂位点形成一个环状结构而控制细菌的分裂过程。胞内FtsZ蛋白浓度的明显降低或异常升高均可阻断正常的细胞分裂过程进而导致丝状菌体的产生。我们为了研究烟草FtsZ蛋白与大肠杆菌FtsZ蛋白的异同,构建了烟草全长ftsZ2-1与绿色荧光蛋白EGFP的融合表达质粒并转化大肠杆菌JM109。融合表达质粒的过量表达导致宿主菌形成了丝状菌体。通过荧光显微镜观察发现NtFtsZ2-1-EGFP融合蛋白沿着宿主菌体的纵轴方向有规律地聚集成荧光点或荧光带,说明烟草FtsZ2-1蛋白能够识别宿主菌内分裂位点的定位信号并参与其细胞分裂复合物的组装。 展开更多
关键词 叶绿体 分裂相关基因 NtFtsZ2-1 大肠杆菌 表达 定位
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烟草质体分裂相关基因NtFtsZ1和NtFtsZ2对叶绿体分裂和形态的影响(英文) 被引量:4
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作者 王东 孔冬冬 +3 位作者 鞠传丽 胡勇 何奕昆 孙敬三 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第7期838-844,共7页
质体作为植物细胞中一类重要的细胞器 ,控制其分裂的分子机制一直都不清楚。最近的研究表明 ,植物细胞中与原核细胞分裂基因ftsZ类似的同源基因控制着质体的分裂过程。通过正反义转化分析了两个烟草的ftsZ基因 (NtFtsZ1和NtFtsZ2 )在转... 质体作为植物细胞中一类重要的细胞器 ,控制其分裂的分子机制一直都不清楚。最近的研究表明 ,植物细胞中与原核细胞分裂基因ftsZ类似的同源基因控制着质体的分裂过程。通过正反义转化分析了两个烟草的ftsZ基因 (NtFtsZ1和NtFtsZ2 )在转基因烟草中的功能。二者的反义表达并未对转化烟草细胞中叶绿体的分裂和形态产生明显影响 ,但二者过表达转化植株中叶绿体的数目和形态都发生了明显的变化 ,在某些转化植株的叶肉细胞中甚至只有 1~ 2个巨大的叶绿体存在。对不同转化植株的电镜观察和叶绿素含量分析认为 ,NtFtsZs基因可能对叶绿体的正常发育和功能没有影响 ,叶绿体形态的变化是对其数目减少的一种补偿。正反义转化植株中叶绿体的不同表型暗示高等植物中同一家族的ftsZ基因可能在控制质体分裂方面具有相同的功能。同时 ,过表达植株中叶绿体形态的变化被认为是高等植物FtsZ质体骨架功能的体现。 展开更多
关键词 烟草 质体分裂相关基因 NtFtsZ1 NtFtsZ2 叶绿体分裂 形态 质体形态 质体骨架
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烟草质体分裂相关基因NtFtsZ cDNAs的克隆及功能分析 被引量:2
6
作者 王东 孔冬冬 +3 位作者 胡勇 鞠传丽 何奕昆 孙敬三 《自然科学进展》 北大核心 2002年第10期1042-1047,共6页
通过RT-PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)方法从烟草中克隆了两个质体分裂相关基因NtFtsZ1-1和NtFtsZ1-2的cDNA,推导的氨基酸序列分析表明,两者均具有FtsZ蛋白的典型特征和GTP结合位点;N端氨基酸序列分析也表明,NtFtsZ1-1和NtFtsZ1-2都具有... 通过RT-PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)方法从烟草中克隆了两个质体分裂相关基因NtFtsZ1-1和NtFtsZ1-2的cDNA,推导的氨基酸序列分析表明,两者均具有FtsZ蛋白的典型特征和GTP结合位点;N端氨基酸序列分析也表明,NtFtsZ1-1和NtFtsZ1-2都具有质体导肽特征,发现了在高等植物中至少存在两个具有质体导肽的FtsZ;基于氨基酸序列的分子谱系分析也支持这一结果,核酸杂交表明两者在植物的不同发育时期具有相似的表达诺,将这两个基因转入E.coli中表达,它们能影响宿主菌的正常分裂,初步验证了其功能,这些研究提示在高等植物中FtsZ可能具有更多样化的功能。 展开更多
关键词 质体分裂相关基因 NtFtsZ CDNAS 烟草 FtsZ基因 质体导肽 原核表达 基因克隆
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烟草质体分裂蛋白NtFtsZs在大肠杆菌中的定位分析(英文) 被引量:1
7
作者 王东 孔冬冬 +3 位作者 鞠传丽 胡勇 何奕昆 孙敬三 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第8期931-935,共5页
分别构建了两个烟草 (NicotianatabacumL .)质体分裂基因NtFtsZ1和NtFtsZ2与编码绿色荧光蛋白的gfpS65A、V68L、S72A基因相融合的原核表达载体 ,并导入大肠杆菌 (Escherichiacoli)JM10 9菌株中进行表达。全长NtFtsZs∶GFP融合蛋白在菌... 分别构建了两个烟草 (NicotianatabacumL .)质体分裂基因NtFtsZ1和NtFtsZ2与编码绿色荧光蛋白的gfpS65A、V68L、S72A基因相融合的原核表达载体 ,并导入大肠杆菌 (Escherichiacoli)JM10 9菌株中进行表达。全长NtFtsZs∶GFP融合蛋白在菌体中有规律地定位 ,暗示NtFtsZs能识别大肠杆菌潜在的分裂位点 ,并能与大肠杆菌的内源FtsZ发生聚合作用 ;融合蛋白的诱导表达抑制了宿主菌的分裂 ,形成了明显的丝状菌体 ,证明真核生物的ftsZ基因与大肠杆菌的ftsZ基因有相似的作用。同时构建了NtFtsZs不同缺失的原核表达载体 ,对这两个基因所编码蛋白不同结构域的功能做了初步分析。实验结果表明 ,烟草FtsZ蛋白的C端结构域与其在大肠杆菌细胞中的正确定位有关 ;而N端结构域与NtFtsZs∶GFP融合蛋白的聚合有关。 展开更多
关键词 烟草 质体分裂蛋白NtFtsZs 大肠杆菌 定位分析 质体分裂基因 绿色荧光蛋白 缺失表达 原核定位
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烟草NtFtsZ2-1基因参与叶绿体分裂和扩大的调节(英文)
8
作者 刘维仲 孔冬冬 +5 位作者 王东 鞠传丽 胡勇 刘祥林 孙敬三 何奕昆 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期267-276,共10页
叶绿体虽然是植物细胞内一种极其重要的细胞器,但其分裂的分子机制尚不很清楚。已经证明FtsZ 蛋白作为真核细胞分裂装置的一个关键成分,参与叶绿体的分裂过程。烟草的 FtsZ 基因属于 2 个不同的家族,在对 NtFtsZ1 家族成员研究的基础上... 叶绿体虽然是植物细胞内一种极其重要的细胞器,但其分裂的分子机制尚不很清楚。已经证明FtsZ 蛋白作为真核细胞分裂装置的一个关键成分,参与叶绿体的分裂过程。烟草的 FtsZ 基因属于 2 个不同的家族,在对 NtFtsZ1 家族成员研究的基础上,用正义和反义表达技术研究了 NtFtsZ2 家族成员NtFtsZ2-1 基因在转基因烟草中的功能。显微分析结果表明NtFtsZ2-1基因的表达水平异常增强或减弱都会严重干扰叶绿体的正常分裂过程,导致叶绿体在形态和数目上的异常(体积明显增大,数目显著减少),而单个叶肉细胞中叶绿体的总表面积在正反义转基因烟草和野生型烟草之间保持了相对稳定,没有发生明显的变化。同时还证明NtFtsZ2-1基因表达的变化对叶绿素含量和叶绿体的光合作用能力没有直接的影响。据此我们认为NtFtsZ2-1基因参与叶绿体的分裂和体积的扩大,其表达水平的波动会改变植物中叶绿体的数目和大小,而且在叶绿体的数目与体积之间可能存在一种补偿机制,保证叶绿体能最大限度地吸收光能,从而使光合作用得以正常进行。 展开更多
关键词 叶绿体分裂 叶绿体大小 烟草:NtFtsZ2-1 超微结构 光合作用能力
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烟草叶绿体分裂基因NtFtsZ2-1的克隆与功能分析
9
作者 孔冬冬 鞠传丽 +4 位作者 王东 胡勇 朱至清 何奕昆 孙敬三 《自然科学进展》 北大核心 2003年第3期253-258,共6页
FtsZ蛋白在叶绿体的分裂过程中担负着重要作用,高等植物中FtsZ蛋白的陆续发现和功能分析加深了人们对叶绿体分裂机制的认识。植物中的ftsZ基因可分为两个明显不同的家族,在对烟草ftsZ1家族的研究基础上,对烟草ftsZ2家族成员的NtFtsZ2-1... FtsZ蛋白在叶绿体的分裂过程中担负着重要作用,高等植物中FtsZ蛋白的陆续发现和功能分析加深了人们对叶绿体分裂机制的认识。植物中的ftsZ基因可分为两个明显不同的家族,在对烟草ftsZ1家族的研究基础上,对烟草ftsZ2家族成员的NtFtsZ2-1基因做了进一步的功能分析。研究结果表明,NtFtsZ2-1在叶绿体的分裂过程中发挥着重要作用,该基因的过量与减弱表达均对叶绿体的形态和数目产生了明显的影响。 展开更多
关键词 烟草 叶绿体分裂 NtFtsZ2-1基因 基因克隆 分裂机制 分裂过程 功能分析
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烟草叶绿体分裂基因NtFtsZ1-2的启动子序列(英文)
10
作者 孔冬冬 王东 +3 位作者 胡勇 鞠传丽 何奕昆 孙敬三 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第5期408-408,共1页
关键词 烟草 叶绿体分裂基因 NtFtsZ1-2 启动子序列
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ftsZ基因与质体的分裂 被引量:1
11
作者 孔冬冬 王东 +4 位作者 胡勇 鞠传丽 王英典 何奕昆 孙敬三 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期755-760,共6页
质体是植物细胞中一类重要的细胞器,其正常分裂过程与植物细胞的分化和发育密切相关.人们对于质体分裂的早期研究主要集中于质体分裂过程的形态学观察和对某些突变体材料的遗传学分析,而对于控制质体分裂的分子基础尚无明晰的认识.近年... 质体是植物细胞中一类重要的细胞器,其正常分裂过程与植物细胞的分化和发育密切相关.人们对于质体分裂的早期研究主要集中于质体分裂过程的形态学观察和对某些突变体材料的遗传学分析,而对于控制质体分裂的分子基础尚无明晰的认识.近年来,随着原核细胞分裂基因类似物在植物中的发现以及对质体进化祖先原核生物细胞分裂机制的解析,极大地促进了人们对质体分裂机制的认识,通过对分裂相关基因的功能研究,人们认为作为内共生产物的质体可能与其原核祖先具有相似的分裂机制,特别是对在分裂过程中发挥关键作用的ftsZ基因功能的深入研究为人们从分子水平上认识质体分裂的机制奠定了坚实的基础.本文对质体分裂的研究历史进行了简单的回顾,并对近来质体分裂分子机制的研究进展做一简要评述. 展开更多
关键词 ftsZ基因 植物细胞 细胞器 质体分裂 分裂机制 细胞形态学 遗传学
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