奶牛附红细胞体的分类鉴定及诊断方法的建立

为了从分子水平上确定奶牛附红细胞体(E.wenyoni)的分类学地位及建立奶牛附红细胞体感染诊断方法。本研究通过利用原核生物16S rRNA基因通用引物,对分离得到的奶牛附红细胞体(广西株,E.wenyoni-GX)进行16S rRNA基因的克隆及测序,并建立系统发育进化树;同时根据测序结果设计诊断引物,建立奶牛附红细胞体感染的PCR诊断方法。结果扩增出长约1.5kbp的奶牛附红细胞体的16S rRNA基因片段;特异性试验和敏感性试验表明,所建立的PCR方法与常见支原体、细菌及原虫无交叉反应,能检测奶牛附红细胞体最低DNA量为0.145fg。通过试验结果分析,建议将奶牛附红细胞体这类血营养菌划归入支原体科、支原体属;同时,所建立的PCR诊断方法是特异、敏感、快速的,可应用于临床检测。

奶牛附红细胞体感染PCR诊断方法的建立

为建立特异、敏感、快速的奶牛附红细胞体感染诊断方法,该研究根据本实验室已测得的奶牛附红细胞体16 S r RNA基因序列,设计1对种特异性引物,建立了奶牛附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该诊断方法与猪肺炎支原体、鸡毒支原体、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、葡萄球菌、鸡艾美耳球虫、牛双芽巴贝斯虫无交叉反应,能检测的奶牛附红细胞体最低DNA量为0 .15 4 fg,同时能检测出在4℃存放长达3个月的血样。通过临床血样检测,证明该方法可用于本病的早期诊断。

澳洲荷斯坦奶牛MOET技术研究

为了快速扩繁良种澳洲荷斯坦奶牛的核心群,对澳洲荷斯坦奶牛MOET技术进行研究。结果表明,在不同月份超数排卵处理澳洲荷斯坦奶牛获得的总胚胎数和可用胚胎数,均无显著性差异(P>0.05);超数排卵处理不同生理阶段的澳洲荷斯坦奶牛,获得的总胚胎数差异不显著(P>0.05),但经产母牛获得的可用胚胎数明显多于青年母牛(P<0.05);而胚龄与受体母牛发情时间的同期性研究发现,桑椹胚和早期囊胚移植到发情后第7 d的受体母牛、囊胚移植到发情后第8 d的受体母牛、扩展囊胚移植到发情后第9 d的受体母牛,均可获得较高的胚胎移植受胎率和产犊率。

乳牛产后血浆瘦素动态与亚临床酮病的相关分析

对某奶牛场16头乳牛产前10d至产后56d血样的瘦素、酮体、葡萄糖、脂肪水平及其动态特征和相关性进行了检测。结果表明，血浆瘦素、血酮、血脂含量在不同乳牛和不同时间点之间均有显著差异。酮体在产后14～49d出现高峰，瘦素和血脂从产后第0d到产后第56d内逐渐升高。瘦素水平与血脂水平呈极显著正相关，血酮与血糖呈极显著负相关。亚临床酮病组乳牛的瘦素和血脂水平分别极显著或显著低于血酮正常组，其瘦素、血酮和血糖在试验期内的波动频率明显减少，跨度变长，瘦素在试验期内仅出现一个两端接近0、波峰不超过1．5ng／mL的波。证实，产后乳牛瘦素、血酮、血糖含量的低频率波动变化和产后8周内血浆瘦素跨时持久的单峰动态变化与乳牛亚临床酮病的发生有关。

二重PCR快速检测牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的研究

根据伊氏锥虫ITS序列(FJ416612)和GenBank报道的牛巴贝斯虫棒状结合蛋白1序列(FJ588013),设计合成2对特异性诊断引物,建立了牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的二重PCR诊断方法。结果表明,建立的二重PCR诊断方法可扩增出牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的特异性条带,大小分别为213bp和360bp,最低检出量分别为4.00pg和0.38pg。但对牛双芽巴贝斯虫、分歧巴贝斯虫、环形泰勒虫、附红细胞体、巴氏杆菌不敏感。用该二重PCR方法对95份水牛样品和134份奶牛样品进行检测,结果发现,水牛伊氏锥虫的感染率为13.7%(13/95)、牛巴贝斯虫的感染率为7.4%(7/95),无混合感染;奶牛伊氏锥虫的感染率为3.7%(5/134)、牛巴贝斯虫的感染率为0(0/134)。说明该二重PCR方法具有敏感、快速、特异的特点,适用于牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的流行病学调查。

奶牛附红细胞体16SrRNA基因的克隆测序及系统发育进化树的建立

为了从分子水平上证实奶牛附红细胞体的存在及研究其分类学地位,利用原核生物16S rRNA基因通用引物对分离纯化的疑似奶牛附红细胞体进行16S rRNA基因的PCR扩增及克隆测序。结果扩增出长约1.5 kb的目的片段,测序结果表明:目的片段长度为1 439 bp,其核苷酸序列与国外已发表的牛温氏附红细胞体(E.wenyoni)的16SrRNA基因片段同源性高达97.1%,暂称为中国广西株(E.wenyoniCGX)。系统发育进化树显示:E.wenyoni和其他血营养菌在系统进化关系上组成了一个大的进化分支,与支原体科、支原体属的病原最接近(75%),而与立克次体科的病原较远(55%)。分析结果支持了Nei mark等和Messick等提出的将这类血营养菌划归支原体科、支原体属的建议。

内源指示剂法结合套算法比较甘蔗副产物的养分表观消化率

本试验旨在通过内源指示剂法结合套算法比较甘蔗副产物的养分表观消化率。选取约1周岁、体重350 kg左右的西门塔尔公牛36头,随机分为6组,每组6个重复,每个重复1头。试验1:测定甘蔗尾叶青贮的养分表观消化率,分为试验Ⅰ期和试验Ⅱ期,试验Ⅰ期组1饲喂象草为粗饲料的全混合日粮(TMR),组2饲喂30%(干物质基础)的甘蔗尾叶青贮替换象草的TMR;试验Ⅱ期组1饲喂饲喂30%(干物质基础)的甘蔗尾叶青贮替换象草的TMR,组2饲喂象草为粗饲料的TMR;每期持续14 d,包括9 d的预试期和5 d的试验期,整个试验共计28 d。碱化蔗渣(试验2)和膨化蔗渣(试验3)试验设计同甘蔗尾叶青贮。结果表明:甘蔗尾叶青贮、碱化蔗渣和膨化蔗渣的干物质表观消化率分别为83.18%、59.74%和62.22%,有机物表观消化率分别为74.74%、58.96%和61.56%,总能表观消化率分别为70.98%、59.61%和62.72%,粗蛋白质表观消化率分别为66.93%、12.16%和15.69%,中性洗涤纤维表观消化率分别为47.47%、32.65%和38.28%,酸性洗涤纤维表观消化率分别为33.77%、25.70%和22.04%,可消化粗蛋白质含量分别为5.21%、0.21%和0.33%,消化能分别为12.78、10.14和10.76 MJ/kg。甘蔗尾叶青贮的干物质、有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和总能表观消化率显著高于碱化蔗渣和膨化蔗渣(P<0.05),膨化蔗渣的粗蛋白质和中性洗涤纤维表观消化率显著高于碱化蔗渣(P<0.05),膨化蔗渣的酸性洗涤纤维消化率表观显著低于碱化蔗渣(P<0.05)。综合上述结果,3种甘蔗副产物中以甘蔗尾叶青贮饲用价值最高,膨化蔗渣优于碱化蔗渣。

蔗渣揉搓或膨化处理作肉牛粗饲料的可行性研究

[目的]考察蔗渣经揉搓处理和膨化处理制作肉牛粗饲料的可行性。[方法]选择20头夏南牛(公牛)作为试验牛,随机分为2组,(试验Ⅰ组、Ⅱ组)分别以揉搓蔗渣+甘蔗梢叶青贮料,膨化蔗渣+甘蔗梢叶青贮料作为粗饲料,并参照肉牛营养需要和饲养标准,搭配其它饲料调配成日粮,进行90天饲喂效果试验。[结果]试验Ⅰ组日增重0.56kg,肉料比0.044;试验Ⅱ组日增重1.08kg,肉料比0.057。试验Ⅰ组日增重和肉料比均比试验Ⅱ组低,差异显著(P<0.05);另从抽检的肉牛血清生理生化指标看,两试验组肉牛肝、肾功能都没有出现异常,但试验Ⅰ组的肉牛在糖、蛋白以及脂肪的代谢有明显的降低。[结论]结果表明,蔗渣经揉搓处理没有提高其消化率,饲喂效果差,作肉牛粗饲料不可行;而蔗渣经膨化处理能提高其消化率和适口性,可直接作肉牛粗饲料,饲喂效果较好。

基于内源指示剂法的牛含甘蔗副产物饲粮消化能预测模型的建立

本试验旨在建立牛含甘蔗副产物饲粮消化能(DE)的预测模型。选取约1岁的西门塔尔公牛36头,体重(350±10)kg,通过内源指示剂法测定牛对含甘蔗副产物饲粮的养分表观消化率,计算可消化养分。采用SPSS 19.0软件对可消化养分与DE进行相关性分析、主成分分析及回归分析,并建立DE的预测方程。结果表明:DE与可消化有机物(DOM)、可消化中性洗涤纤维(DNDF)和可消化酸性洗涤纤维(DADF)呈极显著正相关(P<0.01);DOM与DNDF和DADF呈极显著正相关(P<0.01);可消化干物质(DDM)与可消化粗蛋白质(DCP)呈极显著负相关(P<0.01)。由主成分分析结果可知,第1主成分中DNDF特征向量系数最大,其关系式为DE=0.220DDM+0.488DOM-0.327DCP+0.564DNDF+0.537DADF;第2主成分中DDM特征向量系数最大,其关系式为DE=-0.626DDM+0.431DOM+0.561DCP+0.307DNDF-0.116DADF。基于含甘蔗副产物饲粮可消化养分建立的DE预测模型DE=0.320+18.088DOM(R~2=0.967,n=72,P<0.001)和DE=0.389-0.727DCP+18.082DOM(R~2=0.967,n=72,P<0.001)的预测值与实测值的误差较小。综合可知,DOM是影响含甘蔗副产物饲粮DE预测的主要因子,DE=0.320+18.088DOM和DE=0.389-0.727DCP+18.082DOM可用于预测牛含甘蔗副产物饲粮的DE。

不同因素对蔗渣碱化效果的影响

碱化是蔗渣粗饲料化的主要处理方式,能大幅提高其利用率。本实验采用单因素实验研究不同碱化方式、除碱方式、蔗渣水分、碱浓度、碱化时间和碱化温度等因素对蔗渣碱化效果的影响。结果表明：浸泡碱化和挤压除碱是较优的碱化方式和除碱方式;碱浓度在10%以内,浓度越高,纤维破坏程度越大,降解产物越多;蔗渣水分在40%~70%时均能达到较好的碱化效果;碱化时间40 min、碱化温度50℃时,能达到最佳的碱化效果。

通用型脊柱内固定系统联合后路椎体间植骨融合术治疗腰椎滑脱症

目的观察通用型脊柱内固定系统（GSS）联合后路椎体间植骨融合术（PLIF）治疗腰椎滑脱症的疗效。方法对36例腰椎滑脱症患者施行GSS联合PLIF的临床资料进行回顾性分析。结果随访6～28个月，临床优良率92％，术后5～15个月摄片示34例获得骨性融合，融合率94％，无固定螺钉松动及再滑脱现象。结论应用GSS联合PLIF治疗腰椎滑脱症是一种操作简单、复位满意、固定力强、植骨融合率高的治疗方法。

奶牛肢蹄病的综合防治

奶牛肢蹄病是奶牛四肢及蹄部疾病的总称,是奶牛场的三大疾病之一。通过对广西南宁某奶牛场282头跛行牛发病情况的调查、分析,探讨了引起奶牛肢蹄病的发病原因及诊断方法,并提出了防治措施。

浅谈中国乳业市场竞争的焦点

随着市场经济的发展,中国乳业市场竞争日益激烈化。对我国乳品行业由起初的产品质量、销售价格、销售渠道、促销手段等的竞争,转向顾客、成本、便利、沟通等方式的竞争,即以顾客为中心、以市场为导向的现代市场模式作了综述。

玻璃酸钠注射联合中药熏洗治疗创伤性膝关节炎48例

目的观察玻璃酸钠注射联合中药熏洗治疗创伤性膝关节炎的疗效。方法对48例创伤性膝关节炎患者施行玻璃酸钠注射联合中药熏洗治疗。结果随访3月以上,48例患者中优26例,良15例,可2例,差5例,总有效率为89.6%。结论采用玻璃酸钠关节腔内注射联合中药局部熏洗治疗膝关节创伤性关节炎是一种操作简单、创伤较小、疗效可靠的治疗方法。

奶牛生产降低饲料成本的途径

为了提高奶牛的产奶量以及降低饲料成本,通过降低饲粮中磷的添加量,降低日粮中的粗蛋白质,奶牛日粮中农副产品的应用以及合理利用饲料添加剂等途径,可以提高奶农的利润,从而使畜牧业得以发展。

壮药外洗配合理筋手法治疗肩周炎的临床疗效观察

目的:观察壮药外洗配合理筋手法在肩周炎的临床应用疗效。方法:将48例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组24例,采用壮药外洗方局部热熏、外洗肩关节周围,配合肩部理筋手法治疗;对照组24例,采用单纯西药周围痛点封闭治疗。结果:治疗组总有效率为91.7%,对照组总有效率为75.0%。治疗组临床疗效优于对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论:壮药方局部熏洗配合理筋手法治疗肩周炎安全有效,是治疗肩周炎关节僵硬的有效方法之一。

南宁某牛场奶牛乳房炎主要致病菌的分离鉴定与药敏试验

南宁某奶牛场乳房炎治疗用药已经出现低效或无效,为了解其主要致病菌的耐药性,随机采集乳样228份进行体细胞数检测,筛选出75份进行细菌分离鉴定及药敏试验,其中检出167株可疑菌株,并通过生化鉴定等确定出金黄色葡萄球菌28株(占16.8%)、无乳链球菌10株、停乳链球菌4株、乳房链球菌2株(占9.6%)、大肠杆菌35株(占21.0%)。结果表明,大肠杆菌分离株对链霉素等已100%耐药,金黄色葡萄球菌对氨苄西林等已100%耐药,链球菌对阿米卡星、红霉素等已100%耐药。其中三类菌对庆大霉素、头孢唑啉、头孢曲松和氧氟沙星都具有较高敏感性。

不稳定骨盆骨折的手术内固定治疗

目的探讨手术内固定治疗不稳定骨盆骨折的治疗方法及临床疗效。方法对16例不稳定骨盆骨折患者,在积极处理多发伤及并发症,身体条件准备充分的情况下,积极采取手术切开复位内固定治疗,均进行X线片检查及定期随访;术后以Matta标准进行X线评价,以Majeed疗效评价标准进行临床疗效评估。结果所有病例获随访10～24个月,按Matta标准解剖复位9例,满意复位6例,不满意复位1例,骨性愈合在术后约6个月获得;末次随访按Majeed标准评定疗效,优5例,良8例,中2例,差1例,优良率81%。结论在积极处理严重合并伤前提下,积极行手术内固定治疗不稳定骨盆骨折的临床疗效好,手术时机的选择有助于更好地复位及减少并发症的出现。