基于光动力疗法的四苯基卟啉脂质体制备及体外抗肿瘤活性评价

目的制备四苯基卟啉脂质体(TPP-Lip)以提高游离四苯基卟啉的水溶性、稳定性和靶向性,同时对该脂质体进行体外抗肿瘤活性评价。方法测定光敏剂四苯基卟啉的单线态氧,采用薄膜分散超声法制备TPP-Lip,并通过细胞摄取和细胞毒性实验考察TPP-Lip光动力疗法对黑色素瘤细胞B_(16)F_(10)和乳腺癌细胞4T1的抗肿瘤活性。结果制备得到形态均匀的球形或类球形脂质体TPP-Lip,其包封率为(88.84±2.64)%,粒径为(115.84±3.89)nm。体外实验考察得到B_(16)F_(10)细胞和4T1细胞最佳光照时间分别为3、6 min,两者的最佳孵育时间均为4 h。设定TPP-Lip浓度梯度为1.25~30μg/mL,在此范围内脂质体对B_(16)F_(10)和4T1细胞有较好的光毒性,IC_(50)值分别为13.73、16.30μg/mL,并对2种细胞的暗毒性均较小。同时,CFPE标记的脂质体在2种细胞中的摄取程度差异不大。结论成功制备出四苯基卟啉脂质体并具有良好的稳定性,TPP-Lip通过光动力疗法发挥体外抗肿瘤作用,为疏水性光敏剂的应用提供参考。

乏氧响应抗癌前药偶氮荧光素的合成及其脂质体的制备

目的合成偶氮荧光素(azo-FL),在乏氧环境下对其研究,同时制备偶氮荧光素脂质体(azo-FL-Lip),并对脂质体进行表征。方法采用抗肿瘤药物氮芥与荧光分子5-氨基荧光素反应合成出azo-FL,通过荧光乏氧响应和细胞乏氧成像以及生物体中各种代表性分子、离子对azo-FL荧光的影响进行研究。采用薄膜分散-超声法制备azo-FL-Lip,以azo-FL-Lip的包封率、粒径等为考察指标,并对其稳定性、溶血性及体外释放度进行研究。结果成功合成出azo-FL,利用连二亚硫酸钠模拟细胞乏氧环境,在一定时间范围内azo-FL的荧光强度随连二亚硫酸钠加入时间的延长而显著增强。考察了生物体中各种代表性离子、分子均不能使azo-FL的荧光恢复。同时azo-FL分子在细胞乏氧环境中表现出强烈的绿色荧光信号,而在常氧条件下其荧光很弱。制备的azo-FL-Lip平均包封率为82.61%,平均粒径为(88.57±0.13)nm,PDI为(0.181±0.004)。结论在乏氧条件下,azo-FL的偶氮基团被还原断裂,荧光分子发射固有荧光,实现了乏氧选择性成像。采用薄膜分散-超声法成功制备azo-FL-Lip,其粒径、电位、稳定性等均符合要求。

紫杉醇/姜黄素双载药脂质体的制备工艺及制剂学性质研究

目的研究紫杉醇/姜黄素双载药脂质体的处方及制备工艺,并考察其相应的制剂学性质。方法采用薄膜分散超生法制备紫杉醇/姜黄素双载药脂质体,以包封率、粒径、多分散系数为考察指标,通过单因素试验及正交试验考察磷脂种类、磷脂浓度、磷脂-胆固醇比、药脂比、水化介质对处方工艺的影响;表征其粒径、Zeta电位、形态和稳定性等。结果制备的紫杉醇/姜黄素双载药脂质体最佳处方工艺为:磷脂浓度40 mg/mL,磷脂-胆固醇比4∶1,药脂比1∶40,水化介质为pH 6.5的PBS缓冲液;双载药脂质体中两种药物的平均包封率为81.85%;透射电镜下脂质体形态良好,平均粒径(107.39±1.68)nm,Zeta电位(–5.95±1.085)mV,1周内粒径和外观稳定性均良好,体外血清稳定性考察在48 h内无明显变化。结论紫杉醇/姜黄素双载药脂质体制备工艺稳定可行,脂质体包封率高,粒径大小均一并具有良好的稳定性。

一测多评法测定牛黄上清系列制剂中7种成分的含量

目的建立牛黄上清系列制剂中7种主要活性成分(栀子苷、芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素)的一测多评方法。方法采用HPLC法,以栀子苷为内参物,分别建立芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素的相对校正因子,并用该校正因子进行芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素含量的计算,实现一测多评;同时采用外标法测定牛黄上清系列制剂中7种成分的含量,通过比较计算值和实测值之间的差异,验证该方法的准确性、重复性和适用性。结果建立的相对校正因子重现性好,牛黄上清系列制剂中7种成分含量的计算值与实测值无显著差异。结论同时测定7种成分的一测多评法用于控制牛黄上清系列制剂的质量是可行的。