棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶Ⅰ在毕赤酵母中的表达及烷基糖苷的催化合成

将来自棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus NO.F-50)的β-葡萄糖苷酶Ⅰ在毕赤酵母中分泌表达.初步研究表明,目的蛋白得到较好表达,以对硝基酚-β-D-葡萄糖苷(4-Nitrophenyl-β-D-glucopyranoside,pNPG)为底物,重组β-葡萄糖苷酶Ⅰ酶促反应的最适温度为65℃,最适pH为5.0,50℃下反应发酵上清液中的酶活力可达33.8 U/mL,蛋白表达量最高可达0.388 mg/mL.该重组酶可通过逆水解或转糖苷反应催化合成烷基糖苷.在有机-水双相反应体系中,初步优化了pH值、含水量、葡萄糖浓度及酶量等条件.结果表明,在优化的反应条件下,丁基、己基、辛基和癸基葡萄糖苷最大产率分别为51.4%,28.8%,6.9%和3.0%.