链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达

【目的】探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况。【方法】多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM)。ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水平;RT-q PCR法检测肾组织环氧合酶-2(COX-2)、膜结合型前列腺素E2合成酶-1(m PGES-1)、各型EP受体(EP1、EP2、EP3、EP4)的m RNA表达水平;Westernblot法检测相应蛋白表达水平。【结果】随着周龄增加,DM组小鼠逐渐出现明显多饮、多尿、体质量下降等糖尿病消耗症状;与NC组小鼠相比,DM组小鼠空腹血糖(FBG)和24 h尿蛋白排泄量均显著增加(P<0.05);肾脏COX-2和EP4表达水平明显上调(P<0.05)、而m PGES-1、EP1、EP2、EP3 m RNA表达无显著变化(P>0.05);同时,DM组小鼠24 h尿PGE2定量显著高于NC组(P<0.05)。【结论】1型糖尿病小鼠肾脏组织中,早期即可检测到COX-2和EP4表达上调,伴24 h尿PGE2定量增加,提示COX-2/PGE2/EP4信号轴激活可能参与了糖尿病肾病的发生发展。

黄芪甲苷激活AMPK改善非酒精性脂肪肝病小鼠肝脏脂质沉积

目的:探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)是否通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)改善高脂高糖饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝脏脂质沉积。方法:高脂高糖饮食构建NAFLD小鼠模型,用AS-Ⅳ进行灌胃干预。蛋白免疫印迹法检测肝脏AMPK的蛋白表达水平。高通量芯片技术筛选肝细胞(L02)中与AS-Ⅳ作用的潜在靶蛋白,并通过分子对接技术模拟AS-Ⅳ与靶蛋白的相互作用模式。结果:与正常饮食组小鼠对比,高脂高糖诱导的NAFLD小鼠肝脏脂质沉积增加,AS-Ⅳ干预后可减轻小鼠肝脏脂质沉积;高脂高糖诱导后,可下调肝脏AMPK的蛋白表达水平,AS-Ⅳ干预后AMPK表达增加;高通量芯片技术结果显示:AS-Ⅳ能与AMPKα1直接结合;进一步分子对接模拟显示:AS-Ⅳ相互作用区域位于AMPKα亚基的自抑制多肽片段位置。结论:AS-Ⅳ可能通过直接激活AMPK改善NAFLD小鼠肝脏脂质沉积。

人甲状腺乳头状癌中前列腺素E2受体及其下游信号分子的表达及意义

目的探讨前列腺素E2受体(EP1,EP2,EP3和EP4)在人甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达情况,并进一步了解EP4下游主要信号分子在人PTC中的表达情况。方法 RT-q PCR法检测15例PTC患者甲状腺癌组织PTC及癌旁正常组织(ANT),和15例结节性甲状腺肿(NG)患者甲状腺组织中的EP1、EP2、EP3和EP4的mRNA表达水平,免疫组化的方法分析EP4及其下游信号分子PKA、Epac和AMPK的蛋白表达水平。结果与ANT及NG组相比,PTC组EP4的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05),其下游因子PKA、Epac和AMPK的蛋白表达水平也明显升高(P<0.05)。结论 EP4及其下游因子PKA、Epac和AMPK在PTC组织中表达增加,可能参与了PTC的发生及发展。

黄芪甲苷Ⅳ对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏脂质代谢的作用

目的探讨黄芪甲苷Ⅳ(AS-Ⅳ)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠肝脏脂质代谢的影响。方法 5周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组、高脂高糖组、高脂高糖+AS-Ⅳ[30 mg/(kg·d)]组、高脂高糖+AS-Ⅳ[60 mg/(kg·d)]组、高脂高糖+AS-Ⅳ[120 mg/(kg·d)]组。高脂高糖饮食构建NAFLD小鼠动物模型,同时用不同浓度的AS-Ⅳ[30、60、120 mg/(kg·d)]进行灌胃。正常饮食组给予等体积1%羧甲基纤维素(1%CMC)灌胃,每周测体质量、随机血糖,干预13周后,处死小鼠,留取并称量肝脏,采用H&E染色以及油红O染色检测小鼠肝脏脂质沉积情况。结果高脂高糖诱导的NAFLD小鼠较正常饮食组小鼠的体质量、肝脏湿重及随机血糖增加(P <0.05);AS-Ⅳ未显著减轻NAFLD小鼠的体质量、肝脏湿重及随机血糖(P> 0.05)。与正常饮食组相比,高脂高糖诱导的NAFLD小鼠肝脏脂滴形成增加(P <0.05);而与高脂高糖组相比,不同浓度的AS-Ⅳ干预后,小鼠肝脏脂滴形成减少,以浓度为60 mg/(kg·d)的AS-Ⅳ组最明显(P <0.01)。结论黄芪甲苷Ⅳ能改善非酒精性脂肪肝小鼠的肝脏脂质沉积。

糖尿病肾脏疾病小鼠肾组织环状RNA差异表达的研究

目的探讨STZ诱导的DKD小鼠环状RNA(circRNA)的差异表达。方法8只小鼠分为正常对照组(Con)、DKD组,每组各4只。采用circRNA芯片检测各组肾组织circRNA表达谱,筛选差异表达circRNA分子,采用实时荧光定量PCR验证差异表达circRNA分子在各组肾组织中的表达变化,采用TargetScan及miRanda软件预测差异表达circRNA可能作用的miRNA靶点。结果DKD组共筛选出177个差异表达circRNA(差异倍数≥1.2且P<0.05),其中62个circRNA上调,115个circRNA下调,表达上调前5的差异circRNA是mmu_circRNA_40538、mmu_circRNA_21098、mmu_circRNA_20027、mmu_circRNA_25333和mmu_circRNA_25074,表达下调前5的差异circRNA是mmu_circRNA_19015、mmu_circRNA_41646、mmu_circRNA_011174、mmu_circRNA_29639及mmu_circRNA_28869。与Con组比较,DKD组FBG、24 h UAlb、mmu_circRNA_25074表达升高(P<0.05或P<0.01),体重、mmu_circRNA_011174及mmu_circRNA_41646表达降低(P<0.05)。结论STZ诱导的DKD小鼠肾组织中circRNA呈差异表达,为验证circRNA在DKD中的作用提供依据。

糖尿病合并尿路感染患者尿液降钙素原水平及其临床意义

目的:探讨糖尿病合并尿路感染患者尿液降钙素原(PCT)水平及其临床意义。方法:选取2017年8月至2018年12月中山大学附属第五医院内分泌与代谢病科收治的糖尿病患者78例,以其中合并真性细菌尿者39例作为观察组,未合并尿路感染39例作为对照组,比较两组患者的临床资料以及相关实验室检查结果,同时留取尿液标本,观察组分别留取使用抗生素治疗前、后的尿液标本。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测尿液PCT浓度。分别比较观察组与对照组以及观察组治疗前后的尿液PCT水平,分析尿液PCT水平对于诊断糖尿病合并尿路感染的临床价值。结果:观察组尿液PCT水平为0.030 (0.025,0.039) ng/m L,明显高于对照组0.017 (0.011,0.021) ng/m L(P<0.05);观察组有症状尿路感染与无症状细菌尿(ABU)的尿液PCT水平比较差异无统计学意义(P>0.05),但其均显著高于对照组(P<0.05);观察组使用抗生素治疗后的尿液PCT水平为0.031 (0.025,0.040) ng/mL,与治疗前相比较差异无统计学意义(P>0.05)。尿液PCT对糖尿病合并尿路感染诊断的敏感度为82.05%,特异度为79.49%,阳性预测值为80.00%,阴性预测值81.58%,ROC曲线下面积为0.81 (95%CI为0.71-0.89, P<0.0001)。结论:尿液PCT水平对糖尿病合并尿路感染有一定的诊断参考价值,但对于抗生素疗效的评估价值还需进一步深入研究。