食管癌中B7H3的表达及其CAR-T细胞抗肿瘤作用研究

目的构建靶向B7H3的CAR-T细胞,研究其对食管癌KYSE150细胞的抑制作用。方法采用免疫组化SP法检测B7H3蛋白在20例食管癌组织及20例癌旁组织中的表达,同时对患者临床病理资料的相关性进行了分析;利用慢病毒载体制备靶向B7H3-CAR-T细胞,荧光显微镜观察CAR-T细胞转染效率;通过用不同的效靶比共培养检测CAR-T细胞对KYSE150细胞的杀伤能力;利用ELISA试剂盒检测上清液中释放的细胞因子含量。结果食管癌组织B7H3的表达明显高于癌旁组织,且B7H3蛋白的表达与浸润深度、pTNM分期、淋巴结转移及肿瘤直径有显著相关性(P<0.05);与患者性别、年龄、吸烟、饮酒、肿瘤位置及分化程度无关(P>0.05);通过慢病毒侵染得到结构优化的新型CAR-T细胞;当效靶比为10∶1时,B7H3-CAR-T细胞展现出更强的杀伤能力,并发现不同效靶比下的IL-2和IFN-γ分泌水平都显著高于T细胞。结论成功制备出靶向B7H3-CAR-T细胞,能够有效杀伤B7H3阳性的食管癌KYSE150细胞。