类装配体的构建方法及应用

背景:近年来,许多研究证实类装配体可弥补类器官无法完全重现细胞与细胞、细胞与基质间的互作关系的缺点,但处于发展初期的类装配体构建方式种类繁多,更无统一标准。目的:综述目前类装配体的构建方法、应用和优缺点,为促进体外细胞模型的发展和完善提供指导。方法:以“assembloids,organoids,tumor microenvironment,organoids AND assemble,organoids AND microenvironment”为英文检索词,以“类装配体、类器官、类组装体、肿瘤微环境、类器官重组、多细胞模型”为中文检索词,检索PubMed、中国知网及万方数据库,在排除无关文章及去重后筛选出94篇文章进行综述。结果与结论:①根据细胞来源的不同,可将类装配体的构建方法分为自体组装、直接组装及混合组装3种;根据细胞培养方式的差异,又可分为悬浮培养法、“基质”培养法、器官芯片培养法和3D生物打印法。②自体组装过程涵盖细胞和组织的发育等早期过程,因此,在器官发育和发育障碍等领域有广阔的前景,而分化成熟细胞的功能相对较完善,由它们直接组装成的类装配体在功能障碍及细胞损伤性疾病的研究中更具潜力;自体组装或在器官移植方面更胜一筹,直接组装将更适用于组织损伤的修复,混合组装综合了前两者的优势,多用于探索微环境中细胞的生理和病理机制以及药物筛选等领域。③虽然不同的类装配体各具优势,但都面临脉管系统不完善的难题;每种类装配体构建方法也存在各自的局限性,如自体组装形成的类装配体中细胞分化程度与体内的差异,直接组装模型的细胞种类固定、无法完全反映复杂的体内微环境等均是亟待解决的难题。④将来随着类装配体培养技术的不断完善,研究者们可以在体外组装出具有更复杂组织结构的仿生类器官,为研究人类组织和器官生理及病理过程提供无限趋近真实的模型。

铜代谢相关基因COX17与头颈部鳞状细胞癌不良预后相关

目的:探讨铜代谢相关基因细胞色素c氧化酶铜伴侣17(COX17)对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)发生发展及预后的影响。方法:运用生物信息学分析COX17在HNSCC与正常组织中的表达差异;通过构建列线图验证COX17在预测HNSCC预后中的作用;采用KEGG和GO分析对COX17相关基因进行功能富集分析以及利用ssGSEA分析COX17表达与HNSCC组织中免疫细胞浸润丰度的关系;采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)验证COX17在HNSCC细胞系与永生化正常上皮细胞系中的表达差异;细胞活力试剂盒(CCK-8)和Transwell实验分别用于检测COX17对细胞增殖、侵袭能力的影响。结果:COX17在HNSCC中表达显著上调(P<0.05)。预后分析表明COX17与HNSCC患者总生存期(OS)密切相关(P<0.05)。免疫浸润相关性分析显示,COX17与多种免疫细胞浸润丰度呈负相关关系(均P<0.001)。敲低COX17可显著抑制HNSCC细胞SCC-9、SAS细胞的增殖及侵袭能力。结论:COX17的表达可影响HNSCC细胞的增殖和侵袭,并与HNSCC组织中免疫细胞浸润存在潜在关联;作为线粒体铜代谢分子标记物,COX17可能是评估HNSCC预后的有效指标和潜在治疗靶点。

负载姜黄素-Ag^(+)的聚多巴胺复合水凝胶减轻大鼠颌下腺辐射损伤及抗菌性能分析

目的:合成负载姜黄素(Cur)-Ag^(+)的聚多巴胺(PDA)复合水凝胶,探究其降低放疗引发的唾液腺细胞放射性损伤的效果,及复合水凝胶中Cur、Ag^(+)的协同抑菌作用。方法:合成负载Cur-Ag^(+)的复合水凝胶,对其进行表征。将不同浓度的Cur及负载不同浓度Cur-Ag^(+)的复合水凝胶与人鼻咽癌细胞系(5-8F细胞)、SD大鼠颌下腺原代细胞共培养,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞活力;将负载不同浓度Cur-Ag^(+)的水凝胶与SD大鼠颌下腺原代细胞共孵育,利用电子直线加速器对其进行不同剂量(0 Gy、5 Gy、10 Gy、15 Gy)的X线照射,72 h后通过CCK-8实验检测各组细胞活力。将PDA胶及负载不同浓度Cur-Ag^(+)的复合水凝胶与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共培养后,检测12 h内细菌生长曲线;48 h后观察琼脂平皿内抑菌情况;将不同浓度Cur、Ag^(+)与两种细菌共培养24 h后检测细菌生物膜生长情况。结果:负载Cur-Ag^(+)的PDA复合水凝胶在实验浓度下具备良好的生物兼容性,孵育72 h后,大鼠颌下腺原代细胞活性均在80%以上,并具备一定程度的肿瘤生长抑制作用;大鼠颌下腺原代细胞接受5 Gy、10 Gy、15 Gy放射剂量照射后,相比未经处理的纯照射组细胞,与复合水凝胶共孵育后的细胞其活性可提高30%;保持培养基中Ag^(+)浓度为0.1μg/mL固定不变,随着Cur浓度升高,生物膜生长抑制作用逐渐增强;生长曲线及平板抑菌结果也展现出明显的协同抗菌效果。结论:负载Cur-Ag^(+)的PDA复合水凝胶,可有效降低放疗引发的唾液腺细胞放射性损伤,同时,复合水凝胶中Cur、Ag^(+)可起到协同抑菌的作用。

基于灰狼算法的轨道交通钢轨缺陷的稀疏全聚焦成像方法

[目的]采用超声相控阵技术可实现轨道交通钢轨缺陷的高精度成像检测,但广泛应用的全矩阵捕获全聚焦成像方法存在计算耗时长、实时性不高的缺点。为缩短成像计算时间,采用稀疏矩阵替代全矩阵进行超声成像,但传统智能优化算法在解决稀疏阵列设计问题时存在收敛慢、易陷入局部最优的问题。为提高收敛性能和全局搜索能力,提出基于灰狼算法的轨道交通钢轨缺陷的稀疏全聚焦成像方法。[方法]对优化算法下的稀疏阵列性能进行了分析;利用超声相控阵仪器在钢轨试样上采集超声信号,通过稀疏矩阵进行全聚焦成像,以分析成像质量和成像时间。[结果及结论]利用优化算法得到的稀疏阵列具有较高的旁瓣抑制力,PSL(峰值旁瓣水平)可达到-12.83 dB;当PSL阈值为-6 dB时,稀疏阵列主瓣宽度与全阵列2.8°的主瓣宽度相当;稀疏率为75%时,钢轨成像性能指标质量接近全阵列,成像时间缩短了56.35%。

小鼠颌下腺类器官辐射损伤模型的建立

目的:本实验拟建立小鼠颌下腺(SMG)的类器官辐射损伤模型,为唾液腺辐射损伤修复相关研究提供模型支持。方法:取4周龄小鼠SMG组织利用胶原酶消化成单细胞悬液,接种于基质胶中培养并传代。利用倒置相差显微镜观察SMG类器官生长形态。组织包埋后通过免疫荧光技术检测细胞角蛋白(CK8)及水通道蛋白(AQP5)表达情况。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清液中唾液淀粉酶(AMS)含量,利用电子直线加速器对小鼠SMG类器官模型进行不同剂量(0 Gy、5 Gy、10 Gy、15 Gy)的X线照射;通过ATP细胞活力试剂盒检测各组细胞活性。结果:小鼠SMG类器官呈类圆形球体生长,随着传代培养可见小叶结构形成。小鼠SMG类器官中CK8、AQP5染色阳性,细胞培养上清液中可检测到AMS表达,证实SMG类器官属腺上皮来源并具有分泌AMS功能。放射性照射使类器官增殖速度减慢,球体周围近似崩解形态。ATP细胞活力检测显示,细胞活力随着照射剂量的增加而下降(P<0.05),照射剂量为10 Gy时,细胞活力约为0 Gy组的50%。结论:小鼠SMG类器官辐射损伤模型构建成功,且10 Gy为唾液腺辐射损伤修复相关研究的最适宜的放射剂量。

喉全切除术后咽瘘影响因素的Meta分析

目的系统评价喉恶性肿瘤喉全切除术后咽瘘发生的危险因素。方法检索MEDLINE、EMBASE数据库和中国生物医学文献数据库、中国学术期刊全文数据库和重庆维普数据库,手工检索所有纳入试验的参考文献,采用RevMan4.2软件对纳入文献的数据进行汇总分析(meta-analysis,Meta分析)。结果共纳入44个临床病例研究,病例总数6917,咽瘘发生例数1004。Meta分析结果显示感染、拔胃管时间、病变部位、术中输血、术前放疗、手术时间、术前气管切开、手术切缘、合并慢性全身性疾病以及T分级与喉全切除术后咽瘘发生有关。结论感染、拔胃管时间过早或过晚、原发肿瘤部位位于声门上和跨声门区、术中输血、术前放疗、手术时间超过4小时、术前气管切开、手术切缘瘤细胞阳性、合并慢性全身性疾病以及局部晚期肿瘤(T3、T4级)是喉全切除术后咽瘘发生的危险因素。

红豆杉种子油的提取和抗肿瘤活性初探

目的:探讨红豆杉种子提取油对鼻咽癌细胞株CNE2的杀伤作用。方法:用索氏法从红豆杉种子中提取出油状物质;CNE2细胞加入不同浓度的红豆杉种子油,分别在第1、2、3天用CCK-8法检测细胞毒性,并通过流式细胞仪检测其凋亡情况。结果:红豆衫种子油的粗提取物获得率为19.45%;显微镜观察发现,加入红豆杉种子油后,瘤细胞逐渐变圆、悬浮,部分细胞碎裂形成凋亡小体,第3天最明显;细胞毒实验显示,红豆杉种子油肿瘤抑制率随着浓度和作用时间的增加而增高,且24～32g/L是最佳浓度,作用第3天抑制率达到最高;流式细胞仪显示,随着红豆杉种子油浓度的提高,肿瘤细胞凋亡率亦增高。结论:红豆杉种子油对鼻咽癌细胞株CNE2有很强的杀伤作用,机制主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡,具有进一步研究价值。

颈淋巴结结核125例的临床特点及其鉴别诊断

目的探讨颈淋巴结结核的临床特点、诊断和鉴别诊断。方法对125例颈淋巴结结核病人的临床资料并进行回顾性分析。结果125例颈部淋巴结结核中,21-30岁的青年36例,占28.8%。肿块累及颈后三角41例,占32.8%,仅16.8%的病例伴有全身中毒症状,31-60岁组出现中毒症状的比率要低于0-30岁、61-80岁两组,差异有统计学意义（P〈0.01）。颈部以外浅表淋巴结肿大的病例出现中毒症状的比率高于无颈部以外浅表淋巴结肿大的病例,差异有统计学意义（P〈0.05）。有胸肺表现者仅占22.4%。结论颈淋巴结结核临床表现虽不典型,但仍有一些自身的特点,通过对这些特点的分析,结合其他辅助检查,有助于该疾病与慢性淋巴结炎、颈部转移癌、淋巴瘤等鉴别。

头颈部放疗诱发肉瘤的临床研究进展

放射治疗是恶性肿瘤主要的治疗方法,约60%的患者,包括头颈部恶性肿瘤患者需要接受根治性放疗或姑息性放疗。然而,粒子辐射目前已被公认具有致癌性,能够导致许多放疗诱发的肉瘤(radiation-induced sarcoma,RIS),包括头颈部放疗诱发肉瘤(radiation-induced sarcoma of head and neck,RISHN)[1]。RISHN是一种头颈部接受放疗后远期的并发症,

双侧甲状腺癌的外科治疗

目的总结双侧甲状腺癌的外科治疗方法及疗效。方法回顾性分析32例双侧甲状腺癌的临床资料。4例为双侧甲状腺微小癌，其中3例行双甲状腺次全切除术，1例行甲状腺全切除术；7例合并一侧微小癌，其中1例行甲状腺全切除外，6例行一侧近全切除＋对侧全切除术；余21例中行一侧全切＋对侧近全甲状腺切除术3例，全甲状腺切除术18例。行一侧颈清扫术14例，同期双侧颈总清扫术11例，其中1例因与颈总动脉粘连而有癌灶残留，术后予核素碘治疗。结果32例中除1例失访外，其余随访6月～9年，3例局部复发，其中2例死亡，另1例再次手术痊愈；1例出现远处转移死亡，1例死于其他疾病。结论双侧甲状腺癌甲状腺切除的范围应视癌灶大小和数量以及侵犯程度而定；如伴颈部淋巴结肿大，应同期行颈清扫术。

颈动脉体瘤的诊断和治疗

目的总结颈动脉体瘤的诊治经验,探讨颈动脉体瘤的诊断、术前准备、手术方法和并发症的防治。方法10例颈动脉体瘤患者,5例首诊时误诊为其他疾病。3例术前行数字减影血管造影检查,9例行B超检查,1例行ECT检查,5例行CT检查,3例行MRI检查,2例行脑血流图检查,仅3例手术前行颈动脉压迫试验。7例采用单纯瘤体切除,1例行瘤体与颈外动脉切除,1例行瘤体与部分颈总动脉、分叉及颈内、外动脉一同切除,未做颈动脉重建,1例瘤体切除同时行部分颈总动脉、分叉及颈内、外动脉切除,并行自体大隐静脉移植术。结果本组术后无死亡、偏瘫和失明病例,1例出现患侧口角歪斜,2例出现霍纳综合征,2例出现声嘶、呛咳,2例出现吞咽困难,3例出现舌歪。9例获随访,时间1～12年,无复发病例。结论临床医师应提高对颈动脉体瘤的认识,注意选择合适的检查方法以免误诊;充分的术前准备、良好的肿瘤暴露和手术技巧、精心的术后护理是治愈该病、预防并发症的关键。

树突状细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用

免疫反应的产生首先是抗原提呈细胞(APC)捕获抗原,经其加工处理后将其抗原信息传递给T、B细胞,从而引发一系列的特异性免疫反应。APC包括树突状细胞(DC)、巨噬细胞、B细胞等,其中DC的功能最强,它最大特点是能够激发处女T细胞增殖。自从1973年Steinman和Cohn在小鼠脾脏中发现DC以来,DC的研究一直受到免疫学界的关注并取得许多重要成果。 1 DC的一般特性及表型目前认为,DC是具有典型树突状形态、膜表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)类分子。

上颌窦神经鞘瘤的诊断和治疗

目的探讨上颌窦神经鞘瘤的临床特点、诊断和治疗。方法回顾性分析1987～2006年收治的4例上颌窦神经鞘瘤病人的临床资料。结果本组上颌窦神经鞘瘤病人男3例,女1例,年龄16～24岁;镜下病理学表现为束状型1例,网状型3例;全部病例均手术切除,术后病理确诊,3例术后随访4～20年未见复发,1例随访3年,未见复发,后失访。结论上颌窦神经鞘瘤多为单发,一般包膜完整,易于完整切除,但由于症状、体征、影像学表现缺乏特异性,应注意与其他上颌窦疾病相鉴别,确诊靠病理学检查。手术完整切除是治疗该病的主要方法。

罗汉果叶黄酮甙的分离与结构鉴定

以罗汉果叶为原料提取黄酮,用溶剂萃取、柱层析、HPLC纯化等方法进行黄酮甙的分离和提纯后,采用TLC、HPLC、IR、NM R、M S等分析方法进行结构鉴定。结果表明,罗汉果叶含有2种黄酮甙,它们分别是:山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖甙和槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖7-O-α-L-鼠李糖甙。

罗汉果黄酮的活血化瘀药理作用研究

为了观察罗汉果黄酮的活血化瘀药理作用,采用水提和树脂吸附方法提取罗汉果黄酮,采用尾静脉注射胶原蛋白和肾上腺素造成小鼠体内血栓,测定药物对小鼠脑血栓的保护率;用腺苷-5-二磷酸钠盐(ADP)诱导大鼠血小板聚集,计算药物对血小板聚集的抑制率;腹腔注射75%蛋黄乳液造成实验性高血脂症,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白含量;采用毛细玻璃管法测定小鼠凝血时间,并进行了的急性毒性试验。结果表明,罗汉果黄酮对血栓形成有一定的保护作用;能抑制ADP诱导大鼠血小板聚集;明显降低高胆固醇血症小鼠的TC和TG含量,提高HDL-C的水平;以及延长小鼠的凝血时间。说明罗汉果黄酮具有一定的抗血栓形成、抗血小板聚集、降血脂、抗凝血等活血化瘀药理作用。急性毒性试验结果表明,罗汉果黄酮对小鼠的最大给药量为60.85g/kg。

HIF-1α在鼻咽癌组织中表达及意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia—inducible factor—lalpha，HIF—1α）表达与鼻咽癌（NPC）临床及预后的相关性。方法：对2000年4月～2002年4月收治的经病理明确诊断、完成根治性放疗、随访3年以上的97例NPC放射治疗前活检标本（经病理证实均为低分化鳞癌），应用免疫组织化学染色二步法检测HIF—1α在NPC组织中的表达情况，并分析HIF—1α的表达与NPC分期、颈部淋巴结转移、生存率、远处转移和复发之间的关系。结果：NPC组织中HIF—1α表达率为56．71％。HIF—1α表达与鼻咽癌的NPC分期、颈淋巴结转移、3年生存率、远处转移及复发倾向有密切关系。结论iHIF—1α表达对判断鼻咽癌病变进展、预测颈部淋巴结转移、复发有指导意义，是评估预后的重要指标。