马尔尼菲青霉酵母相黑色素的显微结构形态观察

目的观察黑素化培养的马尔尼菲青霉(PM)酵母细胞显微结构的特点,探索PM酵母相黑色素在细胞内的分布情况和合成途径。方法将马尔尼菲青霉标准株FRR分别在含和不含1.0mmol/L左旋多巴(L-DOPA)的基础培养液37℃震荡培养15d,通过光学显微镜和电镜比较有或无L-DOPA干预下酵母相孢子形态学的差异。结果添加L-DOPA的菌株进行培养的培养液颜色变成棕黑色,而不含LDOPA的菌株其培养液不变色。光学显微镜和扫描电镜观察两者形态无明显差异。透射电镜下观察,加入L-DOPA培养的酵母细胞壁内侧面有较多串珠状分布的直径约100nm电子致密颗粒;微体囊腔显著扩大,微体囊腔内电子致密物显著增多。无L-DOPA培养的酵母细胞未见上述现象。结论马尔尼菲青霉酵母相黑色素颗粒主要分布在细胞壁内侧,微体可能为黑色素合成的细胞器。

湿疹样癌误诊2例

报告2例曾误诊为湿疹和股癣的湿疹样癌。例1,女,52岁,右乳头及乳晕红斑、脱屑2年余。例2,男,60岁,外生殖器糜烂不愈5年余。2例曾分别误诊为湿疹及股癣,最终以组织病理学检查确诊。2例组织病理HE染色可见典型Paget细胞,免疫组化提示CEA、CK7、P53等阳性。经手术治疗有效。

早期梅毒患者血清甲苯胺红不加热血清试验滴度与神经梅毒发生的相关性分析

目的分析早期梅毒患者血清甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)滴度与神经梅毒发生的相关性。方法选取2016年1月至2020年12月广西医科大学第一附属医院收治的103例早期梅毒患者作为研究对象,根据后期病情发展分为神经梅毒组(n=51)和非神经梅毒组(n=52)。对两组患者进行实验室检测,并开展统计学比较。结果103例早期梅毒患者行梅毒血清学检测,血清TRUST滴度≥1∶32共有36例,其中神经梅毒组30例(58.8%),非神经梅毒组6例(11.5%),两组比较差异具有统计学意义(P=0.000)。对神经梅毒组患者的脑脊液检测结果进行分析,梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)阳性患者50例,TRUST阳性患者33例,蛋白量升高患者27例,白细胞计数升高患者29例,脑脊液蛋白量和白细胞计数均升高患者15例;当确诊神经梅毒患者的脑脊液检测结果为阳性/异常时,其梅毒早期血清学TRUST滴度≥1∶32的占比偏高。结论早期梅毒血清TRUST滴度≥1∶32的患者神经梅毒发生风险高,因此针对这类患者应尽早接受脑脊液检测并积极接受相关治疗,避免病情进一步发展。

巨噬细胞吞噬黑素化与非黑素化马尔尼菲青霉的电镜观察

目的通过透射电镜(TEM)比较巨噬细胞吞噬黑素化与非黑素化马尔尼菲青霉酵母相孢子的区别,初步探讨黑素在马尔尼菲青霉致病机制中所发挥的作用。方法将马尔尼菲青霉酵母相孢子与Ana-1小鼠巨噬细胞系共同培养,分为处理组A、B、C和D组:A组加入干扰素-γ及L-DOPA,B组仅加入干扰素-γ,C组仅加入L-DOPA,D组不加干扰素-γ及L-DOPA,设置基础对照组E为加入L-DOPA培养的巨噬细胞。7d后离心收集各组巨噬细胞和孢子,透射电镜观察并比较其超微形态变化。结果无论是否加入干扰素-γ均可观察到巨噬细胞吞噬马尔尼菲青霉酵母相孢子现象。加入L-DOPA培养的A、C组巨噬细胞内外的酵母细胞壁内侧面均产生了颗粒状电子致密物,一个巨噬细胞吞噬孢子数目为2～6个。未加入L-DOPA培养的B、D组巨噬细胞内外的酵母细胞壁内侧面无颗粒状电子致密物,一个巨噬细胞吞噬孢子数目为10～25个。结论 L-DOPA可以促进马尔尼菲青霉酵母相孢子黑素颗粒的合成,黑素化培养的马尔尼菲青霉酵母相孢子逃避巨噬细胞吞噬的能力增强。

马尔尼菲青霉酵母细胞黑素的分离纯化及理化性质的分析

目的探讨提取、纯化马尔尼菲青霉（PM）酵母细胞的黑素并研究其理化性质。方法在基础液体培养基中加入左旋多巴37℃振荡培养PM酵母细胞，通过溶壁酶、变性剂和浓酸等处理PM酵母细胞以分离提取黑素，用化学分析、紫外光谱、红外光谱以及电子顺磁共振（EPR）波谱研究PM黑素的理化性质。结果PM黑素与合成多巴黑素的理化性质相似，均溶解于碱，不溶于酸，不溶于水和大多数有机溶剂，在pH≤3时产生沉淀，能被氧化剂H2O2漂白。紫外光谱分析显示，在205Nm处有最大吸收峰，随波长的增加其吸收值减小。红外光谱分析表明，PM黑素具有经典的黑素红外吸收特征，即在3μm附近和6μm附近各有一个吸收峰；EPR提示PM黑素含有稳定的自由基。结论PM酵母细胞能利用外源性左旋多巴合成多巴黑素。