miR-155在高糖诱导足细胞损伤的表达及其与足细胞损伤相关蛋白表达的相关性

目的探讨高糖(HG)诱导足细胞损伤中miR-155的表达变化及miR-155与足细胞损伤相关蛋白表达的关系。方法体外培养人肾小球足细胞(AB8/13),用30 mmol/L的D-葡萄糖溶液刺激AB8/1348 h作为HG组,同时以终浓度为5 mmol/L的D-葡萄糖溶液处理细胞48 h作为正常对照(NC)组。用CCK8法检测细胞增殖活性。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA和miR-155的表达。Western blot法检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin蛋白的表达。鬼笔环肽染色观察细胞骨架变化。细胞免疫荧光检测蛋白nephrin、synaptopodin。结果HG可抑制足细胞增殖,降低细胞存活率(P<0.01)。HG作用的Ab8/13中的miR-155表达水平升高,nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA与蛋白表达水平降低(P<0.05)。HG会导致足细胞骨架紊乱。结论HG作用的人足细胞中miR-155表达升高,miR-155表达与HG诱导的足细胞损伤有关,可作为足细胞损伤诊断和治疗的靶点。

miR-155表达变化对TGF-β1损伤足细胞蛋白podocin、CD2AP、synaptopodin的影响

目的:研究miR-155 mimics/inihibitor转染足细胞后微小RNA-155(miR-155)的表达变化及其对TGF-β1损伤足细胞的影响。方法:体外培养小鼠足细胞,细胞免疫荧光染色鉴定足细胞分化成熟;用TGF-β1处理足细胞构建足细胞损伤模型,RT-PCR和Western blot分别检测miR-155和CD2AP的表达;免疫荧光显微镜观察转染成功指示剂Cy3,RT-PCR检测miR-155 mimics/miR-155 inihibitor转染(0 h、24 h、48 h、72 h)后miR-155的表达;选取转染时间48~72 h,RT-PCR检测Normal、TGF-β1、TGF-β1+mimics、TGF-β1+mimics NC、TGF-β1+inhibitor、TGF-β1+inhibitor NC组细胞miR-155及podocin、CD2AP、synaptopodin的mRNA表达,Western blot检测3种蛋白的表达,免疫荧光观察各组CD2AP的荧光分布和表达。结果:CD2AP呈足细胞分化成熟的特征分布;TGF-β1干预后miR-155表达上升,CD2AP蛋白表达下降(P<0.05);miR-155 mimics或miR-155 inihibitor转染48 h、72 h后,miR-155表达明显增加或减少(P<0.05);miR-155 mimics可上调TGF-β1诱导的miR-155表达(P<0.05),且可促进TGF-β1诱导的足细胞podocin、CD2AP、synaptopodin的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),而转染miR-155 inihibitor对足细胞蛋白的作用与miR-155 mimics相反。免疫荧光结果显示CD2AP蛋白的表达与Western blot、RT-PCR结果一致。结论:miR-155可靶向足细胞蛋白podocin、CD2AP和synaptopodin的表达,miR-155过表达可促进足细胞损伤,miR-155表达下调则可改善足细胞的损伤,因此,miR-155可作为足细胞损伤新的药物靶标。

小茴香不同溶剂提取物止血作用的初步实验研究

目的探究小茴香不同溶剂提取物对小鼠的止血作用。方法将小鼠随机分为11组(对照组、云南白药组,乙醇提取物低、中、高剂量组,乙酸乙酯提取物低、中、高剂量组,正丁醇提取物低、中、高剂量组),每组7只。给药组以小茴香提取物低剂量(2.5 g·kg^(-1))、中剂量(3.25 g·kg^(-1))、高剂量(5.0 g·kg^(-1))灌胃,应用毛细管法、剪尾法测定小鼠的凝血时间(CT)、止血时间(BT)。结果乙醇提取物中、高剂量组与乙酸乙酯提取物中、高剂量组的CT和BT明显短于对照组(P<0.05),与云南白药组比较差异无统计学意义(P>0.05);乙醇提取物高剂量组CT和BT明显短于乙醇提取物中剂量组,乙酸乙酯中剂量组CT和BT明显短于乙酸乙酯高剂量组(P<0.05)。正丁醇低、中、高剂量组CT和BT与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论小茴香乙醇、乙酸乙酯提取物中、高剂量组有一定的止血作用。

医学院校实验教学与医学生能力培养的研究

实验教学是培养大学生,尤其是医学生创新能力的基本方法和手段。在医学教学中不能单纯的通过阅读、讲解来学习知识,应通过教材与实验的结合来培养医学生的创新能力。

LncRNA GAS5在足细胞损伤中的作用研究

足细胞损伤是导致肾小球疾病蛋白尿持续发生和慢性肾脏疾病进展的关键危险因素。近年来,LncRNA GAS5在影响细胞存活或死亡中的功能已引起越来越多的关注,LncRNA GAS5参与了足细胞的损伤,学者们一直在不断探讨其参与足细胞损伤的作用机制。在此,本文概述LncRNA GAS5的结构和生物学功能及其参与足细胞损伤的作用机制,以更加全面有效地认识足细胞损伤发生发展的分子机制,从而为足细胞损伤与修复提供不可或缺的理论依据。

大学生创新创业训练计划项目对欠发达地区高校大学生素质提升的探究——以右江民族医学院为例

当前,我国经济发展已经进入新常态,大众创新、万众创业已经成为经济社会发展的新引擎。本文以右江民族医学院为例,学校通过整合社会办学资源,深入探索大学生创新创业的教育方法,致力于提升大学生创新创业的素质,鼓励与支持大学生创新创业,引导与培养创新创业人才。

建立重症狼疮性肾炎模型并探索其与足细胞蛋白nephrin、P-cadherin的相关性

目的建立重症MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)动物模型,并对模型成功与否进行验证,进一步探索狼疮性肾炎与足细胞蛋白nephrin、P-cadherin的相关性。方法将实验动物分为三组:空白组、模型组和脂多糖组。空白组为雌性C57小鼠8只,模型组及脂多糖组为雌性MRL/lpr小鼠各8只,其中脂多糖组腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),空白组及模型组每周注射等量生理盐水。20周后检测小鼠尿蛋白,处死动物,收集各组小鼠肾组织。苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察小鼠肾脏组织。RT-qPCR和Western blot检测肾组织中nephrin、P-cadherin的mRNA及蛋白表达。结果与空白组相比,模型组小鼠尿蛋白升高,肾脏病理损伤严重;与模型组相比,LPS组小鼠尿蛋白升高,肾脏损伤进一步加重;此外肾组织中nephrin、P-cadherin表达水平在三组间逐步下降(P<0.01)。结论用LPS腹腔注射的MRL/lpr小鼠可诱导加重狼疮,且狼疮性肾炎的严重程度与nephrin及P-cadherin相关。

慢病毒载体介导过表达和敲低miR-155的AB 8/13细胞株的建立

目的 利用慢病毒载体构建稳定过表达miR-155的AB 8/13细胞株(AB 8/13-LV-has-miR-155)和稳定敲低miR-155的AB 8/13细胞株(AB 8/13-LV-has-miR-155p inhibiton),为研究miR-155在足细胞焦亡和肾脏疾病中的作用奠定基础。方法 体外培养AB 8/13细胞,使用不同浓度嘌呤霉素刺激AB 8/13细胞48 h,在光学显微镜下观察AB 8/13细胞的死亡情况;使用LV-has-miR-155阴性对照病毒、LV-has-miR-155-5p inhibiton阴性对照病毒分别感染AB 8/13细胞,在荧光显微镜下观察AB 8/13细胞的状态和感染效率;在嘌呤霉素筛选出稳定细胞株后,通过实时荧光定量PCR法检测稳定细胞株的miR-155表达量。结果 在3.5μg/mL及以上浓度的嘌呤霉素作用于AB 8/13细胞48 h后,所有细胞全部死亡。LV-has-miR-155慢病毒感染AB 8/13细胞的感染效率达到80%的最佳条件为在含HiTransG P的完全培养基中进行感染,MOI为10;LV-has-miR-155-5p inhibiton慢病毒感染AB 8/13细胞的感染效率达到80%的最佳条件为在含HiTransG A的完全培养基中进行感染,MOI为100。qRT-PCR结果显示AB 8/13-LV-has-miR-155细胞株的miR-155表达量明显升高,AB 8/13-LV-has-miR-155p inhibiton细胞株的miR-155表达量降低。结论 成功构建AB 8/13-LV-has-miR-155稳定细胞株和AB 8/13-LV-has-miR-155p inhibiton稳定细胞株,为进一步探究miR-155在人足细胞焦亡中的作用机制奠定基础。

狼疮性肾炎相关基因的共表达网络构建与分析

目的基于基因表达综合数据库(GEO)挖掘与狼疮性肾炎(LN)相关的潜在基因。方法从GEO中搜集LN相关的样本,获得GSE32591、GSE81622、GSE99967共3个数据集。利用GEO2R平台对这3个数据集进行分析,筛选出共同差异基因,并利用在线分析工具DAVID完成GO富集分析和KEGG通路富集分析。将筛选出的共同差异基因导入STRING在线数据库,构建共同差异基因的蛋白-蛋白相互作用网络,利用Cytoscape软件进行模块分析并识别枢纽基因。结果筛选得到110个共同差异基因。GO富集分析发现这些基因主要参与了防御反应、免疫反应、对病毒的反应、对细菌的反应、对伤害的反应、炎症反应等生物学过程。KEGG通路富集分析主要包括了系统性红斑狼疮、抗原处理和呈递、补体与凝血级联、RIG-I样受体等信号通路。从最显著基因模块中识别出10个枢纽基因:RSAD2、OAS1、MX1、ISG15、DDX58、IFIH1、IFI44、IFI44L、IFIT1、IFIT3。结论生物信息学分析显示RSAD2、OAS1、MX1、ISG15、DDX58、IFIH1、IFI44、IFI44L、IFIT1、IFIT3可能是与LN相关的枢纽基因,为LN的机制研究提供了一种全新的思路。

大学生创新创业训练计划项目的实施有力提升大学生的多种能力

"大学生创新创业训练计划"是教育部"高等学校本科教学质量与教学改革工程"建设项目之一,促进高校人才培养观念的转变。近年来,各高校陆续实施"大创计划"项目,有力的提升了大学生的创新能力、创业能力、创业实践等能力,促进大学生的全面发展以适应时代进步的要求。

大学生创新创业训练计划项目的实施促进教育教学改革

高等院校实施大创计划的目的是进一步推动教育教学改革。通过探讨大创计划在教育教学改革方面的地位以及大学生创新创业训练计划项目对学生的影响,来论证大创计划的实施是促进教育教学改革的有效方法。

“互联网+”背景下大学生创新创业能力培养的研究

随着互联网的普及,"互联网+"已经成为知识社会创新2. 0下的互联网发展的新兴产业。在当代大学生就业压力日益增大的情况下,分析"互联网+"对大学生创新创业的影响,利用其所提供的巨大网络平台培养大学生的创新创业能力,从而提高大学毕业生的就业水平,使互联网更好地服务社会。