目的研究PCR技术在疫苗生产过程支原体检测中应用的可行性。方法选择GP03和MGSO作为引物,与《中国药典》三部(2015)规定的3种支原体阳性株(肺炎支原体、口腔支原体和猪鼻支原体)进行16s r RNA序列比对分析和特异性扩增检测,确定引物适...目的研究PCR技术在疫苗生产过程支原体检测中应用的可行性。方法选择GP03和MGSO作为引物,与《中国药典》三部(2015)规定的3种支原体阳性株(肺炎支原体、口腔支原体和猪鼻支原体)进行16s r RNA序列比对分析和特异性扩增检测,确定引物适用性。以支原体阳性株为PCR模板,进行浓度梯度试验和不同代次扩增,确认PCR法的检测限和精密度。以口服轮状病毒活疫苗生产过程中20个细胞培养物为样品,分别采用PCR法、液体培养法和固体培养法检测,对比三种方法的检测结果。结果GP03和MGSO适用于支原体检测。PCR法与液体培养法、固体培养法检测结果一致,同时具备操作简单和检出结果快速的特点。结论PCR技术可作为疫苗生产过程中检测支原体的一种手段。展开更多
文摘目的研究PCR技术在疫苗生产过程支原体检测中应用的可行性。方法选择GP03和MGSO作为引物,与《中国药典》三部(2015)规定的3种支原体阳性株(肺炎支原体、口腔支原体和猪鼻支原体)进行16s r RNA序列比对分析和特异性扩增检测,确定引物适用性。以支原体阳性株为PCR模板,进行浓度梯度试验和不同代次扩增,确认PCR法的检测限和精密度。以口服轮状病毒活疫苗生产过程中20个细胞培养物为样品,分别采用PCR法、液体培养法和固体培养法检测,对比三种方法的检测结果。结果GP03和MGSO适用于支原体检测。PCR法与液体培养法、固体培养法检测结果一致,同时具备操作简单和检出结果快速的特点。结论PCR技术可作为疫苗生产过程中检测支原体的一种手段。