雪上一枝蒿化学成分及其生物活性的研究进展

雪上一枝蒿为云南、四川等地民间常用药材,被用于治疗风湿疼痛、跌打损伤等症,主要成分为生物碱。其毒性剧烈,但在镇痛方面有显著疗效,具有重要的药用价值。主要从雪上一枝蒿的化学成分、炮制减毒、抗肿瘤、抗炎及抗菌作用等方面对其进行综述,以期为雪上一枝蒿的深入研究及其应用提供一定的理论基础和研究方向。

原核表达家蝇抗菌肽Phormicin A,B蛋白对大肠杆菌标准株的影响

抗菌肽是近年来新型的抗菌剂药物候选者。以家蝇防御素家族Phormicin A、B抗菌肽为研究对象,探究了其对大肠杆菌的作用效果。采用原核表达法获得二者蛋白,将其作用于大肠杆菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为20和7.5 mmol/L,并绘制了二者作用于大肠杆菌标准株的时间生长曲线。结果显示:家蝇Phormicin A、B原核表达蛋白对于大肠杆菌标准株的生长具有一定的抑制作用,此研究为应用于抗临床大肠杆菌感染药物的研发提供了一定的参考。

非农林院校生物技术专业“生物防治技术”课程教学内容的改革实践

简述了针对贵州医科大学生物技术专业学生“生物防治技术”课程内容进行教学改革的一些实践措施和教学效果。通过调整理论学时,增设实验课时,进行生物防治前沿研究文献汇报,到生防天敌昆虫养殖基地参观等措施,对“生物防治技术”课程的教学内容进行了大幅度调整,最后通过问卷调查的方式,对本次教改进行效果评价,发现改革极大地增加了学生的学习兴趣和热情。通过比较该课程教改前后学生的学习效果、学习兴趣等方面的变化,总结了今后应该努力的方向。为做好非农林专业生物技术专业本科生“生物防治技术”课程的教学工作积累了经验,提供了一些思考。

原核表达家蝇Phormicin蛋白对金黄色葡萄球菌的抑菌活性分析

家蝇Phormicin是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽,属于防御素家族。本研究采用原核表达法纯化并获得家蝇Phormicin A、Phormicin B蛋白,将其作用于金黄色葡萄球菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为0.625 mmol/L和0.469 mmol/L。进一步绘制了二者对金黄色葡萄球菌的时间杀菌曲线,并利用牛津杯法进一步验证了二者的抗菌效果。结果显示,二者对金黄色葡萄球菌都具有一定的抑菌效果。本研究为进一步探索Phormicin在家蝇天然免疫和防御中的机制提供理论参考。

家蝇Phormicin蛋白表达及对白色念珠菌的抑菌活性分析

防御素是一类具有广普抗菌活性的阳离子抗菌肽,而家蝇(Musca domestica)的Phormicin属于防御素超家族。白色念珠菌(Candida albicans)是临床上常见的引起人体感染的条件致病真菌。随着免疫缺陷病、糖尿病等疾病发生率的增加,在病人体内植入设备的白色念珠菌残留及附带感染日益成为临床感染的常见类型。本研究制备了家蝇Phormicin A、Phormicin B的原核表达蛋白,将其作用于白色念珠菌。微量液体稀释法测定了其最小抑菌浓度为2.5mmol/L和1.875mmol/L。进一步绘制了其对白色念珠菌的时间杀菌曲线。结果显示,二者对白色念珠菌都具有一定的抑菌效果。本研究为进一步探索Phormicin参与家蝇天然免疫和揭示家蝇抗真菌防御中的机制提供理论参考,为开发多肽类抗真菌药物提供线索。

家蝇Phormicin A多克隆抗体的制备及效价检测

家蝇Phormicin作为防御素家族的成员,是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽。本研究采用原核表达法表达并纯化获得了家蝇Phormicin A蛋白。将家蝇Phormicin A原核表达蛋白与完全佐剂和不完全佐剂乳化混匀,先后免疫新西兰白兔获得其多克隆抗体。通过原核表达蛋白中和吸附实验,以及Western blot实验验证了抗体的特异性。进一步用金黄色葡萄球菌刺激家蝇三龄幼虫样品,进行内源性验证并测定抗体的效价。结果显示,该多克隆抗体既可以识别家蝇Phormicin A原核表达蛋白,也可以识别金黄色葡萄球菌刺激家蝇三龄幼虫产生的内源性Phormicin A蛋白。本研究为进一步探索Phormicin在家蝇天然免疫和防御中的机制等后续工作打下基础。

家蝇抗菌肽基因MAF-1的表达模式及响应微生物刺激分析

Musca domestica antifungal peptide-1(MAF-1)是家蝇体(Musca domestica)内组成型表达的一种独特且具有良好抑菌效果的抗真菌肽。本研究利用实时荧光定量PCR技术分析MAF-1在家蝇不同发育时期、不同组织器官及家蝇3龄幼虫经微生物(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌)刺激后的表达特征。结果显示,MAF-1在家蝇各个发育时期的相对表达量依次为:2龄幼虫>1龄幼虫>3龄幼虫>雄蝇成虫>卵>雌蝇成虫>蛹;MAF-1在家蝇3龄幼虫各组织器官的相对表达量依次为:脂肪体>唾液腺>气管>肠道>体壁。通过超微量显微注射法向家蝇3龄幼虫体内注入病原微生物,其中金黄色葡萄球菌刺激后MAF-1的表达量呈下降趋势;大肠杆菌刺激后MAF-1的表达量先降低后升高再降低;白色念珠菌刺激后MAF-1的表达量先升高然后逐渐下降。本研究从RNA水平上说明了MAF-1的表达随着家蝇幼虫的生长发育阶段变化,对不同微生物刺激的响应具有不同的特征。同时MAF-1还是家蝇抵抗病原微生物感染的重要天然免疫分子,这为进一步研究其参与家蝇天然免疫防御过程提供了基础。