从“髓充骨”理论初探干细胞归巢改善绝经后骨质疏松症骨代谢紊乱的机制

绝经后骨质疏松症是全身性骨代谢紊乱性疾病,属中医学“骨痿”范畴,病在骨,本在肾。“髓充骨”源于《黄帝内经》,肾藏精、精生髓、髓充骨;女子增龄衰老,肾虚髓亏,骨髓生化乏源,骨失所养,则为骨痿。骨髓间充质干细胞属中医学“精”“髓”范畴,是骨髓中的重要细胞群之一,具有多向分化潜能,能分化为成骨细胞,参与调节骨形成-骨吸收耦联,在绝经后骨质疏松症病理过程发挥重要的调节作用。基于中医“髓充骨”理论,探讨肾、精、髓、骨在骨痿过程中的作用,并阐释精、髓现代内涵及骨髓间充质干细胞在绝经后骨质疏松症骨代谢紊乱中的角色,为临床治疗绝经后骨质疏松症提供新的防治策略。

基于生物节律与骨代谢关系的研究探讨绝经后骨质疏松症的防治策略

绝经后骨质疏松症是一种以骨吸收和骨形成耦联失衡为基本发病机制的代谢性疾病。骨代谢受到生物节律的严格调控,包括激素分泌的节律性、骨细胞代谢的节律性及生物钟基因的协调表达等。对骨代谢相关生物节律调控机制的深入研究,能够阐明节律性骨重建的生理基础和绝经后骨质疏松症的部分发病机制,进而为探讨绝经后骨质疏松症的防治策略提供新思路。本文概述了生物节律与骨代谢的关系,对生物节律系统与骨代谢关系分子机制的研究进展进行了综述,并基于生物节律与骨代谢的关系探讨了绝经后骨质疏松症的防治策略。

基于网络药理学探析生血补髓汤预测骨质疏松症的分子作用机制

目的 基于网络药理学方法探析生血补髓汤预测骨质疏松症的分子作用机制。方法 通过TCMSP和TCMID数据库检索生血补髓汤的活性成分和对应靶点;通过GEO DataSets数据库获取骨质疏松症GSE84500和GSE35958疾病芯片并合并数据;将生血补髓汤对应靶点与疾病差异基因取交集,获得生血补髓汤防治骨质疏松症预测靶点;利用Cytoscape 3.8.1软件构建“中药-疾病”可视化调控网络。交集基因导入STRING 11.0平台获得PPI网络,利用CytoNCA进行PPI拓扑分析。利用R语言对交集基因进行GO和KEGG富集分析。利用Dycharts平台绘制KEGG通路分类占比饼图。利用Cytoscape 3.8.1软件构建“成分-靶点-通路”可视化调控网络。结果 筛选得到生血补髓汤活性成分87个,包括槲皮素、木犀草素、山奈酚等;交集基因97个,PPI拓扑分析核心基因17个,包括血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素-6(IL-6)、转录因子AP-1(JUN)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)等。GO富集分析共得到条目1 645条;KEGG富集分析得到通路115条,主要涉及脂质与动脉粥样硬化、IL-17信号通路等经典信号通路。“成分-靶点-通路”可视化调控网络中通路Degree排序分别是脂质与动脉粥样硬化、人巨细胞病毒感染、乙型肝炎、PI3K/Akt信号通路等。结论 生血补髓汤通过多成分、多靶点、多通路产生药效治疗骨质疏松症,可能是通过抑制或减轻氧化应激反应、调控免疫系统及抑制成脂分化发挥治疗作用。

基于“筋出槽,骨错缝”理论探讨慢性筋骨病筋骨失和的防治策略

生理状态下,筋骨各归其位,“筋束骨,骨张筋”维系着筋骨系统正常的力学特性并处于稳态。病理状态下,“筋出槽,骨错缝”,筋骨失衡,即慢性筋骨病筋骨失和的核心病机。在慢性筋骨病的防治中,通过中医特色疗法及西医学的研究策略,令“筋归槽,骨归位”,使骨合筋舒,从而达到“骨正筋柔”的中和状态,是防治的根本目标。因此,文章基于中医骨伤特色理论“筋出槽,骨错缝”,以生物力学为切入点,结合现代医学经筋和肌筋膜理论,探索慢性筋骨病筋骨失和的发病机制及防治策略,旨在贯彻筋骨整体观,为慢性筋骨病筋骨失和的生物力学相关病理机制及防治策略提供新思路。

基于“肾气-天癸”节律性变化探讨绝经后骨质疏松症的内在发生机制

绝经后骨质疏松症是因绝经后雌激素水平降低导致的全身代谢性骨病,属中医学“骨枯”“骨痿”等范畴。肾气-天癸的变化节律与人体骨矿含量随年龄增长的变化规律极为相似。本文基于肾气-天癸的节律性变化,从肾气-天癸变化具有节律性、肾气-天癸节律性变化决定女子骨骼盛壮与痿弱及肾气-天癸通过冲任-胞宫节律性调控女子骨骼状态3个方面,探讨了绝经后骨质疏松症的内在发生机制,为该病的临床诊疗提供新的思路。

基于网络药理学与分子对接技术探讨二陈汤调节绝经后骨质疏松症脂骨代谢紊乱的药效机制

目的基于网络药理学与分子对接技术,利用绝经后骨质疏松症及肥胖症的共同靶点基因探究二陈汤调节绝经后骨质疏松症脂骨代谢紊乱的潜在分子机制。方法通过GeneCards、DRUGBANK、PharmGkb、OMIM和TTD数据库分别获取绝经后骨质疏松症与肥胖症的相关靶点并进行整合,在TCMSP数据库检索二陈汤药物的有效成分及作用靶点,并根据ADME指数进行筛选,将所得疾病靶点与二陈汤药物靶点取交集,并利用STRING数据库构建PPI蛋白互作网络,在此基础上使用Cytoscape 3.8.1软件及CytoNCA安装包进行拓扑分析获得核心靶点,然后利用Metascape平台进行GO、KEGG富集分析;最后使用Cytoscape 3.8.1构建二陈汤复方调控网络,得到二陈汤作用的核心成分并利用PubChem、PDB数据库与ChemOffice、PyMOL、Auto Dock软件对核心成分与核心靶点进行分子对接验证。结果获得二陈汤作用于绝经后骨质疏松症和肥胖症的共同作用靶点48个,其中ERS1、PTGS2、PPARG为主要作用靶点,二陈汤主要活性成分为槲皮素、山奈酚、柚皮素以及刺芒柄花素,分子对接验证亦显示二陈汤核心成分与主要作用靶点均具有良好的结合活性。GO和KEGG富集分析结果显示二陈汤作用的生物进程主要是细胞对脂质的反应、活性氧代谢过程、类固醇代谢过程、对雌二醇的反应,信号通路主要为AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、雌激素信号通路。结论二陈汤可通过多成分、多靶点、多通路调节绝经后骨质疏松症脂骨代谢紊乱,减少并发肥胖症的可能性,延缓绝经后骨质疏松症发展进程,改善其临床症状,其机制可能是抑制骨髓间充质干细胞成脂分化,减少脂质累积对骨骼产生的不利影响,进而改善骨代谢。

透骨消痛胶囊调节Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路抑制骨关节炎炎症反应的机制研究

目的:探讨透骨消痛胶囊调节Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路抑制骨关节炎炎症反应的作用机制。方法:取4周龄SD雄性大鼠的双侧膝关节软骨,经Ⅱ型胶原酶消化法获得大鼠软骨细胞,并采用Ⅱ型胶原免疫组化法对所得细胞进行鉴定;取第2代软骨细胞分为空白组、模型组(10 ng/mL LPS干预8 h)、抑制剂组(10 ng/mL U0126先干预30 min后再加入10 ng/mL LPS干预8 h)、透骨消痛胶囊组(10 ng/mL LPS+300μg/mL透骨消痛胶囊一同干预8 h)。采用Western blot检测软骨细胞中Ras、Raf、p-ERK1/2、MEK1/2、MMP-3和MMP-13蛋白表达,qPCR检测软骨细胞中MEK1/2、ERK1/2、MMP-3和MMP-13基因表达及miR-27b、miR-34a和miR-146a表达。结果:①软骨细胞经Ⅱ型胶原免疫组化处理后,阳性组细胞胞浆被染为棕黄色,阴性组不显色,表明所提取细胞为软骨细胞。②与空白组相比,模型组中Ras、Raf、MEK1/2、MMP-3和MMP-13蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达量也升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,抑制剂组与透骨消痛胶囊组Ras、Raf、MEK1/2、p-ERK1/2、MMP-3、MMP-13蛋白表达均下降(P<0.01,P<0.05);透骨消痛胶囊组与模型组相比,MEK1/2蛋白表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。③与空白组相比,模型组中MEK1/2、ERK1/2、MMP-3、MMP-13基因表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,透骨消痛胶囊组与抑制剂组上述基因表达均下降(P<0.01,P<0.05)。④模型组miR-27b的表达低于空白组(P<0.01),抑制剂组、透骨消痛胶囊组miR-27b的表达高于模型组(P<0.01);模型组miR-34a、miR-146a的表达均高于空白组(P<0.01,P<0.05),而抑制剂组、透骨消痛胶囊组均低于模型组(P<0.01,P<0.05)。结论:透骨消痛胶囊通过调控Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路中关键因子及miR-27b、miR-34a和miR-146a的表达,调节软骨细胞炎症反应,从而抑制骨关节炎炎症,保护关节软骨。

从肾藏精主骨探析绝经后骨质疏松症骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化失衡的机制

绝经后骨质疏松症(PMOP)以进展性全身骨量丢失、骨强度下降、骨微结构破坏为病理特征,属中医“痿证”范畴。PMOP病在骨,其本在肾,以肾虚骨痿为中医病理特点,以增龄衰老为病因。骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨-成脂分化失衡可导致骨代谢紊乱,与中医肾-骨功能系统密切相关。因此,文章以成骨-成脂分化失衡为切入点,从BMSCs向成骨细胞和脂肪细胞分化角度探析PMOP骨代谢紊乱的机制,旨在丰富中医肾虚骨痿病因病机理论,为从肾论治PMOP提供理论依据。