蛋白激酶MPK-1通过DAF-16调控FAT-7抑制脂质累积

目的探讨蛋白激酶MPK-1对脂质代谢的影响及可能的作用机制。方法用秀丽线虫(C.elegans)作为模式生物,采用RNA干扰(RNAi)技术定向干扰mpk-1,sbp-1、daf-2基因表达,油红O和苏丹黑染色观察线虫脂质含量的变化,洗脱脂肪进行定量分析确定脂肪含量的增减。采用RNAi技术结合对线虫体内特定位置绿色荧光蛋白表达变化的观察,分析MPK-1影响脂肪累积的可能机制。结果干扰mpk-1基因表达后,线虫体内脂肪含量明显增加。荧光显微镜观察发现:脂质合成酶fat-7∷gfp线虫干扰mpk-1基因表达后,荧光增强;表达调控fat-7的转录因子DAF-16荧光蛋白的线虫品系中干扰mpk-1基因表达,可促进DAF-16向核内转移。结论蛋白激酶MPK-1可能通过DAF-16调控FAT-7的活性,抑制脂肪的合成代谢,减少脂质累积。

秀丽隐杆线虫中与衰老相关的DAF-2/IGF-1信号通路研究进展

衰老是诸多疾病发生的关键因素之一。目前,生物学界关于衰老遗传学的大部分知识和信息都来自于对秀丽隐杆线虫的研究。秀丽隐杆线虫在抗衰老研究中发挥着先锋和主力的作用。DAF-2/IGF-1信号通路是第一个为人类所认识的衰老基因调控机制。该文综述了秀丽隐杆线虫作为模式生物在DAF-2/IGF-1信号通路研究进程中的引领和推动作用,为抗衰老研究提供可借鉴的科研思路和方法。

pro-1基因通过DAF-16调控秀丽隐杆线虫的寿命

目的·用秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)作为模式生物,观察pro-1基因对寿命的影响,并初步探究其影响寿命的机制。方法·在线虫上以RNAi技术定向干扰pro-1基因的表达,随后对pro-1沉默表达后的线虫进行寿命分析,检测其在生长发育、运动、饮食以及生殖能力等方面的变化。进一步用RNAi方法结合线虫体内荧光定位技术以及RT-PCR技术等探究pro-1影响寿命可能的分子机制。结果·与对照组线虫相比,干扰pro-1表达后,沉默组线虫平均寿命延长了14.58%(P=0.002);在TJ356线虫中干扰pro-1表达后,DAF-16明显进入细胞核,且DAF-16下游靶基因如old-1、sod-3、hsp-16.1、mtl-1、ctl-2等的mRNA水平被上调。结论·pro-1基因通过促进DAF-16进入细胞核并上调其下游靶基因的mRNA水平,从而延长秀丽隐杆线虫的寿命。

正五聚蛋白3(PTX3)在动脉粥样硬化炎症反应中的作用研究

探讨正五聚蛋白3(PTX3)在动脉粥样硬化炎症反应中的作用。方法:收集诊断为动脉粥样硬化的标本20例作为实验组,同时选取正常血管样本20例作为对照组,对其进行免疫组织化学染色法进行检测;小鼠单核-巨噬细胞株RAW264.7和从小鼠腹腔中提取巨噬细胞,分别转染PTX3、PTX3-siRNA干预靶点,利用Werstern blot检测过表达、基因沉默PTX3对巨噬细胞炎症因子分泌的影响。通过RT-PCR法检测炎症细胞因子IL-6、IL-8以及TNF-α的表达水平;通过PTX3 siRNA转染巨噬细胞后,利用Werstern blot对PTX3的沉默效果进行检测;通过PTX3 siRNA对巨噬细胞进行转染后,再通过LPS对其进行干预,时间为24小时,然后利用RT-PCR对其炎症因子IL-6、IL-8以及TNF-α的表达水平进行检测。结果:相比较对照组,实验组中PTX3表达水平明显提高;转染PTX3 siRNA之后能够明显的降低PTX3蛋白的表达;对细胞利用LPS进行干预之后,巨噬细胞的IL-6、IL-8以及TNF-α的表达明显增加并且与其浓度呈正相关(P<0.05);LPS同PTX3 siRNA对巨噬细胞的干预相比较对照组,其炎症因子IL-6、IL-8以及TNF-α表达明显降低(P<0.05)。结论:对于动脉粥样硬化患者,其PTX3表达水平明显升高;LPS能够促进炎症因子IL-6、IL-8以及TNF-α的表达,但是PTX3的靶向沈默能够抑制LPS的刺激。PTX3在动脉粥样硬化炎症反应中占有重要作用,可能在其发生机制中具有重要作用。

抑癌基因VHL在H_2O_2诱导的肿瘤细胞氧化应激中的作用

目的观察抑癌基因VHL对H2O2诱导的肿瘤细胞氧化应激的影响,并初步探究其分子机制。方法采用RNAi沉默秀丽线虫vhl-1和肿瘤细胞的同源基因VHL的表达,以不同浓度H2O2处理,经形态学分析秀丽线虫的死亡情况;用AnnexinⅤ和PI标记细胞,经流式细胞仪分析细胞死亡情况;采用Western blotting检测氧化应激的通路蛋白c-Jun氨基末端激酶(JNK)的磷酸化水平,分析VHL影响细胞氧化应激的分子机制。结果与对照组比较,vhl-1表达沉默的秀丽线虫对H2O2的敏感性显著增加,死亡率显著增高,该效应依赖于H2O2的浓度梯度和处理时间。沉默VHL表达肿瘤细胞的死亡率与野生型肿瘤细胞比较无明显差别,但经250μmol/L和500μmol/L的H2O2处理后,沉默VHL表达肿瘤细胞的死亡率显著增高,且伴随JNK磷酸化水平的升高。结论沉默VHL表达可增加细胞对H2O2诱导的氧化应激的敏感性,且VHL对细胞在H2O2诱导的氧化应激中的保护效应存在种属的保守性。

钢板堆垛过程自动化控制实践

本文详细叙述了韶钢热轧宽中厚板厂钢板堆垛过程自动化控制技术方案及实施步骤,主要是充分利用二级物流控制跟踪系统简化堆垛机一级控制步序,实现堆垛机的动作步序更加合理、快捷,在保证产品质量的同时提高产量,减轻人工劳动强度,取得了较好的经济和社会效益。

关于中厚板轧机HAGC常见故障排除方法的优化

介绍韶钢热轧宽板厂四辊可逆式轧机的HAGC系统,并对HAGC系统常见故障的分析判断处理方法进行改进,大大减少了AGC故障的判断处理时间,从而减少对生产的影响.

降低接地网接地电阻应经济合理

接地网是变电所安全运行的重要保障,降低接地网接地电阻的方法有多种。本文结合笔者的接地工程实践,阐述了现在接地工程中存在的一些问题,并针对此问题进行分析研究,从技术经济的角度分析了这些降阻措施的应用,达到以最小的投资获得最大降阻效果的目的。

创建本质安全型矿井供电系统的探索

随着煤炭行业向集约高效、本质安全型矿井建设方向的发展,供电已经成为继采煤、掘进、机电、运输、通风、调度六大支撑性专业系统外的又一个支撑系统,占据越来越重要的位置。创建本质安全型矿井首先要创建本质安全型供电系统,创建本质安全型供电系统为创建本质安全型矿井提供基础保证。文章就近年来漳村煤矿创建本质安全型供电系统的实践进行了一些探索分析。