癫痫模型大鼠海马内fos基因表达及电子显微镜观察

[目的 ]观察癫痫模型大鼠海马的c fos基因表达 ,并探讨癫痫的发病机制 .[方法 ]采用fos蛋白免疫细胞化学方法和电子显微镜 ,观察注射戊四氮后 30min ,1,3,6h时的海马内fos蛋白阳性细胞的分布情况 .[结果 ]腹腔注射戊四氮后 30min时 ,海马内开始出现fos蛋白阳性细胞 ,1～ 2h时达到高峰 ,3h时开始逐渐减少 ,6h时基本消失 .[结论 ]海马在癫痫发作时反应强烈 ,同时有可复性的脑组织损伤 ,提示海马可能是癫痫发作的主要启动部位 .

fos基因在癫痫模型大鼠延髓内脏带的表达

[目的 ]观察c fos基因在癫痫模型大鼠延髓内脏带 (MVZ)的表达 ,并比较癫痫发作后不同时间时fos阳性细胞数目 .[方法 ]采用fos蛋白免疫细胞化学法和电子显微镜观察注射戊四氮后第 30min ,1,3,6h时的大鼠MVZ中fos基因的表达 .[结果 ]腹腔注射戊四氮 30min后MVZ中开始出现fos阳性细胞 ,第 1～ 2h时达高峰 ,第 3h后开始逐渐降低 ,第 6h时基本消失 .[结论 ]MVZ内神经元在癫痫发作时有强烈反应 ,而此反应是可复性的 .

藏药结血蒿生药鉴定与质量标准研究

目的对结血蒿进行生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。方法运用药材性状、显微特征、薄层色谱、高效液相色谱对该药材进行鉴定。结果选择50%甲醇作为提取溶剂,超声时间30 min,溶剂用量为样品量的100倍,系统精密度良好,有良好的重复性,至少在12 h内稳定,加样回收较好,测得药材中绿原酸平均含量为1.372 7 mg/g(n=3),RSD=1.99%。。结论结果可为结血蒿生药鉴定、相关质量标准的提高、资源开发利用提供依据。

《北京市医疗机构制剂规程(2014年版)》第1册中药制剂质量标准有关问题研究

参考2010年版、2015年版《中国药典》,对《北京市医疗机构制剂规程2014年版》第1册制剂规程中的制剂质量标准进行研究,发现其中中药制剂处方、制法、鉴定、检查、功能主治等方面存在问题;对存在的问题进行分析,为后续版本的出版提供参考。认为该版制剂规程总体上提高了北京市医疗机构制剂质量标准水平,同时也存在不少有待修正的问题。

RP-HPLC测定人工虫草和天然虫草中麦角甾醇含量

目的：建立反相高效液相色谱法测定人工虫草和天然虫草中麦角甾醇的含量。方法采用Diamonsil C18（2）色谱柱（150 mm＆#215;4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（98∶2）,检测波长280 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min。结果麦角甾醇进样量在0.1977～3.9549μg 范围内与峰面积呈良好线性关系（r＝1.000）,平均加样回收率为99.51%,RSD＝0.56%（n＝9）。结论本方法操作简便、灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适用于人工虫草和天然虫草中麦角甾醇的含量测定。

人工虫草与冬虫夏草HPLC特征图谱研究

目的 以人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草为研究对象,建立高效液相色谱（HPLC）特征图谱.方法 采用超声法提取虫草中的水溶性成分,HPLC 建立虫草的特征图谱.采用Agilent ZORBAX SB-Aq 色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈（A）-0.04 mol/L 磷酸二氢钾溶液（B）,梯度洗脱（0～16 min,0%A;16～38 min,0%→10%A;38～58 min,10%→15%A;58～65 min,15%→0%A）,流速1.0 mL/min,柱温25 ℃,检测波长260 nm,进样体积20 μL.运用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004 A）》,建立人工虫草与天然虫草HPLC 特征图谱,同时指认了7 个核苷类成分,并进行比较研究.结果 本方法精密度、重复性、稳定性良好.以腺苷为参照峰,对11 批冬虫夏草、10 批人工北虫草和12 批发酵虫草菌粉进行指纹图谱分析结果显示,其指纹图谱相似度分别为0.889～0.982、0.781～0.980、0.502～0.970.结论 天然虫草的指纹图谱相似度较高,人工北虫草和发酵虫草菌粉指纹图谱的相似度较低.本方法可作为评价人工虫草和天然虫草质量的参考依据.

小胶质细胞和巨噬细胞极化与多发性硬化症的研究 进展

多发性硬化症(MS)属于中枢神经系统自身免疫性脱髓鞘疾病。小胶质细胞和巨噬细胞是参与MS病理过程的主要细胞,具有促炎性(M1)和抗炎性(M2)两种极化表型。两种表型的动态变化,可调控疾病的发生和发展。调节小胶质细胞/巨噬细胞极化可能改善MS的病情。文章主要就小胶质细胞和巨噬细胞的来源、特性和功能,调控小胶质细胞/巨噬细胞极化改善MS病情的机制及其在MS防治中的可行性进行综述。

SIRT1调节PI3K/AKT/mTOR自噬途径对神经元凋亡的改善作用

目的脊髓损伤(SCI)后有效防止神经元的进一步凋亡,是改善神经损伤修复的关键,而去乙酰化酶SIRT1在神经系统疾病中发挥着重要保护作用。文中旨在探索SIRT1在脊髓损伤修复中的表达与相关性,并探讨其对神经元损伤修复的调节机制。方法将40只大鼠随机分为Sham组(仅打开椎板,然后缝合)、SCI 1_(w)组、SCI 2_(w)组、SCI 4_(w)组(分别在1w、2w、4w处死大鼠,取出脊髓组织),每组10只。利用qPCR、Western blot检测各组脊髓组织中SIRT1表达量,ELISA检测8-OHdG的表达;通过小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞和H_(2)O_(2)制作体外神经元氧化损伤模型,并给予SIRT1激动剂(SRT1720),利用CCK8实验确定H_(2)O_(2)和SRT1720浓度后将细胞分为对照组、2μmol/L SRT1720组、100μmol/L H_(2)O_(2)组、2μmol/L SRT1720+100μmol/L H_(2)O_(2)组。利用TUNEL实验检测细胞凋亡水平,Western blot和免疫荧光染色检测SIRT1、自噬相关通路蛋白的表达。结果SCI 1_(w)组、SCI 2_(w)组、SCI 4_(w)组脊髓中SIRT1的表达较Sham组显著降低,且随病程延长而逐渐降低(P<0.01)。SCI 1_(w)组、SCI 2_(w)组、SCI 4_(w)组脊髓中的8-OHdG含量显著高于Sham组,随损伤时间延长而增加,与SIRT1蛋白表达呈负相关(r=-0.67,P<0.05)。体外细胞培养的TUNEL结果显示,2μmol/L SRT1720+100μmol/L H_(2)O_(2)组及对照组细胞凋亡水平明显低于100μmol/L H_(2)O_(2)组(P<0.01)。Western blot检测结果显示,2μmol/L SRT1720组和2μmol/L SRT1720+100μmol/L H_(2)O_(2)组PI3K、AKT、mTOR、Caspase-3蛋白表达明显低于对照组和100μmol/L H_(2)O_(2)组(P<0.05),而2μmol/L SRT1720组和2μmol/L SRT1720+100μmol/L H_(2)O_(2)组SIRT1、LC3B表达水平显著高于对照组和100μmol/L H_(2)O_(2)组(P<0.01)。结论SIRT1的表达与脊髓损伤病理过程密切相关,且SIRT1通过调节PI3K/AKT/mTOR自噬信号途径,降低神经元凋亡来促进神经元损伤修复。

刺五加注射液产生热原的实验研究

刺五加注射液生产中发现。虽然按照生产工艺操作进行,在原料相同状态下,生产的注射剂,用家兔法检查热原结果不同,偶出热阳性,从升温情况看与一般热原有所区别。

人工虫草与冬虫夏草成分的比较研究

目的比较人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草中,核苷及碱基类成分、甘露醇及麦角甾醇的含量,为开发利用虫草的药用价值提供理论依据。方法采用RP-HPLC法测定虫草中核苷及碱基类成分,采用HPLC-ELSD法分析虫草中甘露醇的含量,采用RP-HPLC法分析虫草中麦角甾醇的含量。结果 11批冬虫夏草中核苷及碱基类成分(尿嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素)的平均含量分别为0.008 0、0.738 8、0.251 1、0.200 6、0.003 7、0.229 4、0.005 0 mg/g。10批人工北虫草中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.012 3、0.110 0、0.081 2、0.648 0、0.001 6、0.071 5、0.699 9 mg/g,12批发酵虫草菌粉中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.017 0、1.057 1、0.127 9、0.944 8、0.009 7、1.232 8、0.029 0 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中甘露醇的平均含量分别为88.66、44.23、17.40 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中麦角甾醇的平均含量分别为1.723 8、5.123 3、5.321 9 mg/g。结论人工北虫草、发酵虫草菌粉含有与冬虫夏草相似的主要活性成分,但人工虫草与冬虫夏草中各种活性成分的含量存在差异。

只有医生知道的血管健康书

也许你还不知道．过敏、免疫系统疾病、脑出血、脑梗塞、脑中风、老年痴呆症、动脉硬化、心肌梗死、心脏停搏、高血压、高血脂、糖尿病、痛风、肥胖等这些疾病都与血液循环有着密切的关系。血管里堆积的垃圾、毒素、脂肪等物质堵住了血管，使血管壁变厚变硬，于是导致了这些疾病的形成。

北虫草中核苷类成分的含量测定与质量评价

目的建立北虫草中尿苷、腺嘌呤、腺苷、虫草素4种核苷类成分的含量测定方法，确定其含量测定指标成分及其限量标准。方法Agilent TC—C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），甲醇-水为流动相梯度洗脱，柱温30℃，流速1．0mL／min；检测波长260nm，进样量20μL。结果线性关系良好，精密度高，重现性好，回收率均在95．39％-103.3％；不同产地的北虫草中各核苷类成分含量变异较大。结论该方法简便、灵敏、准确、重现性好，适用于北虫草中核苷类成分的含量测定；建议以腺苷和虫草素作为北虫草中核苷类成分的含量测定指标成分，其含量限量分别为不低于O．07％、O．27％。

吸收度比值法测定复方醋酸钠注射液中醋酸钠的含量

以盐酸与醋酸钠中和反应,溴酚兰为指示剂,分光光度法双波长(λ_1590nm、λ_2435nm)测定吸收度,计算出γ_(比)值,测定醋酸钠的含量。本法快速、准确、易掌握。

实验性自身反应性脑脊髓炎中β-连环蛋白对IL-17的影响

目的探讨β-catenin(β-连环蛋白)在实验性自身反应性脑脊髓炎(EAE)模型中对IL-17的影响,揭示β-catenin在多发性硬化症中的作用机制。方法将32只C57BL/6小鼠分为EAE对照组(n=16)和EAE+β-catenin激动剂组(n=16);从免疫第0天起,激动剂组以60 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量腹腔注射LiCl,共处理了30 d,观察EAE发病过程,比较临床评分、平均发病时间、临床最高分。用ELISA检测法观察脊髓中炎症相关细胞因子(IL-17、IL-6);用实时定量PCR(Real-Time PCR)法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脊髓中的β-catenin以及调节因子(TCF4、RORγt)的mRNA表达。结果与EAE组相比,EAE+β-catenin激动剂组发病时间延后(P<0.05)、平均临床评分降低(P<0.05)、最高临床评分降低(P<0.05)。EAE+β-catenin激动剂组IL-17、IL-6含量比EAE组明显降低(P<0.05);EAE+β-catenin激动剂组脊髓中RORγt表达比EAE组明显降低(P<0.05),TCF4表达增加(P<0.05)。结论在EAE发病过程中,β-catenin激动剂可通过上调TCF4调节RORγt和IL-17和IL-6,延缓EAE的发病过程。

克老素在脊髓损伤中的表达及相关性分析

目的:观察大鼠脊髓损伤模型中克老素的表达变化,分析克老素的表达与神经损伤之间的相关性。方法:利用钳夹法制备大鼠脊髓损伤模型(SCI),并随机分为正常对照组(Sham)、损伤1周、2周、4周组。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫荧光染色和蛋白印迹方法检测各实验组脊髓组织中克老素mRNA及蛋白的表达,利用ELISA法检测组织8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,并分析其相关性。结果:克老素在脊髓组织中表达,且损伤组脊髓组织中克老素mRNA及蛋白表达水平明显低于假手术组,且随病程延长而降低。ELISA检测结果显示,损伤组脊髓组织中8-OHdG含量明显高于假手术组,且随病程延长而增加,与克老素蛋白表达呈负相关关系。结论:克老素的表达变化与大鼠脊髓损伤之间呈负相关,提示克老素可能参与脊髓损伤后神经细胞退变的病理过程。

SIRT1信号通路在中枢神经系统损伤中对神经元的调节作用

中枢神经系统(CNS)损伤,尤其是各种原因引起的神经元损伤和丢失是导致运动和认知障碍的根本原因。由于神经元难以再生,如何减轻神经元的损伤和凋亡成为CNS损伤后修复的难点。沉默信息调节因子1(SIRT1)是一种广泛表达于多种组织的脱乙酰化酶,能够通过多种信号通路调节炎症浸润、氧化应激、自噬,从而减轻神经元的凋亡,与阿尔茨海默病、创伤性脑损伤等CNS损伤疾病关系密切。因此,探究SIRT1在CNS损伤过程中对神经元的调节作用及相关信号通路可为研究CNS损伤修复提供理论参考。

兰索拉唑治疗消化性溃疡的临床研究进展

消化性溃疡主要指发生于胃和十二指肠的慢性溃疡,临床症状如中上腹痛和反酸,呈周期性和节律性发作。质子泵抑制剂兰索拉唑作用于H^(+)-K^(+)-ATP酶系统,透过壁细胞膜转化为次磺酸和次磺酰衍生物,能调整患者的胃内酸碱值,抑制幽门螺杆菌的活性,具有较高的药物安全性,可以作为临床上治疗消化性溃疡的首选药物。因此文章拟对兰索拉唑的作用机制,对消化性溃疡的治疗作用,联合其他药物治疗消化性溃疡的最新研究进展进行综述,以期为临床用药提供参考。

人工虫草和冬虫夏草中甘露醇含量的HPLC-ELSD法测定

目的建立HPLC-ELSD法测定人工虫草和冬虫夏草中甘露醇的含量。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器,氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~5min,90%A;5~25 min,90%→80%A;25~40 min,80%→70%A),柱温30℃,流速1.0 ml·min^(-1),漂移管温度为80℃,载气(空气)压力为3.5 Bar。结果甘露醇在0.07~0.43 mg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9996,n=5),回收率为102.2%(RSD为0.90%,n=6)。结论该方法操作简便、灵敏、准确,具有良好的重现性和稳定性,适用于人工虫草和天然虫草中甘露醇的含量测定。

红景天苷对过氧化氢诱导SHSY-5Y细胞氧化应激损伤的影响

目的探究红景天苷通过沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin 1,Sirt1)抑制过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y氧化应激损伤的机制。方法将对数生长期的人神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y随机分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组。空白组给予生理盐水处理,模型组给予100μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理,低、中、高剂量实验组先分别用1,10,100μmol·L^(-1)红景天苷处理后,再用100μmol·L^(-1)过氧化氢处理。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,以流式细胞术检测细胞凋亡率,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,以实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、免疫荧光技术及蛋白质印迹(Western blot)法检测Sirt1 mRNA和蛋白的表达水平。结果空白组、模型组和低、中、高剂量实验组的细胞活力分别为(100.00±5.99)%,(22.89±4.17)%,(30.75±6.01)%,(60.69±9.37)%,(80.81±4.38)%;凋亡率分别为(6.77±0.72)%,(68.53±11.07)%,(57.01±6.33)%,(46.41±8.54)%,(20.12±3.60)%;NOS水平分别为(0.41±0.08),(4.99±0.32),(4.24±0.24),(2.95±0.19),(2.33±0.25)ng·mL^(-1);SOD水平分别为(24.15±1.92),(10.65±0.78),(13.62±1.52),(17.01±1.63),(21.38±0.54)U·mg^(-1);MDA水平分别为(6.31±0.89),(15.40±1.03),(11.77±0.90),(9.95±1.01),(7.51±1.13)ng·mL^(-1);8-OHdG水平分别为(3.67±0.30),(10.99±1.04),(9.72±1.35),(6.89±0.33),(4.62±0.66)μmol·mg^(-1);模型组和空白组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);低、中、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论红景天苷对过氧化氢诱导SHSY-5Y细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与Sirt1蛋白激活相关。