高温胁迫下橡胶树白粉菌实时荧光定量PCR内参基因的筛选

为了筛选出合适的内参基因,构建高温胁迫下不同生长发育时期橡胶树白粉菌基因表达的RT-qPCR体系。利用实时荧光定量PCR技术对EF1、GAPDH、CH、H3、PBS2、TUB、CU 7个候选内参基因进行表达水平测定,并结合△Ct法、GeNorm、NormFinder和Refindre对其进行表达稳定性分析。分生孢子时期基因表达稳定性为EF1>H3>PBS2>TUB>GAPDH>CH>CU,萌发期为GAPDH>EF1>PBS2>CH>TUB>H3>CU,侵染期为EF1>GAPDH>PBS2>H3>TUB>CU>CH,在菌丝生长期和产孢期,基因的表达稳定顺序分别为EF1>GAPDH>CH>H3>CU>TUB>PBS2和EF1>GAPDH>H3>PBS2>CU>TUB>CH。综上所述,EF1基因可以作为高温胁迫对橡胶树白粉菌基因表达的理想内参基因。本研究结果为高温胁迫下橡胶树白粉菌相关基因的表达研究提供了合适的内参基因。