玻璃化法超低温高效保存‘Gala’苹果组培苗

本试验以苹果‘Gala’苹果为材料,从低温锻炼时间、预培养基蔗糖浓度、预培养时间和玻璃化溶液及处理时间4个方面优化玻璃化超低温保存体系,获得‘Gala’苹果茎尖超低温保存的最佳体系。结果表明,将生长30 d的组培苗在4℃的条件下低温锻炼5周,剥取茎尖,将其置于含0.4 mol/L蔗糖的预培养基中培养5 d,渗透装载液渗透30 min,0℃的条件下用PVS3玻璃化溶液处理60 min,放入液氮中冷冻24 h,取出后置于40℃水浴中1 min快速化冻,卸载液清洗2次,每次10 min,然后在恢复培养基上培养,茎尖的再生率最高达到96.6%且生长稳定性好。本试验成功建立了‘Gala’苹果的玻璃化法超低温保存体系,为苹果种质资源的长期保存提供了一条有效途径。