某院PIVAS智能环境实时监控系统的建立与应用

目的保障静脉用药调配中心(PIVAS)输液调配质量及患者的用药安全。方法医院依托PIVAS洁净室安全生产监测及预警平台,与某公司联合开发了可实现洁净室净化空调系统与操作台智能控制,以及浮游菌及尘埃粒子、压差及温湿度、净化机组状态等的动态监测及预警功能的智能环境实时监控系统。比较系统运行前(2021年7月至12月)、运行后(2022年1月至6月)的相关指标监测结果。结果与系统运行前比较,系统运行后异常监测结果月均发现次数与压差月均正常天数均显著增多(P<0.05);异常监测次均处理用时与浮游菌检测及报告用时均显著缩短(P<0.05);各监测位置(除百级操作台外)浮游菌及尘埃粒子的实时监测数值均显著下降(P<0.05)。结论该系统实现了PIVAS洁净室环境关键指标的实时收集、动态监测及预警,有效地保证了PIVAS输液的安全生产及全流程信息可追溯,推动了智慧PIVAS体系的建设,进一步保障了患者的用药安全。

基于“五育融合”理念的跨学科项目化活动设计与实施——以“模拟长征,远足佘山”教育实践活动为例

“模拟长征,远足佘山”跨学科项目化实践活动坚持实践育人、活动育人、文化育人的原则,传承革命传统,培养家国情怀;融合多学科知识内容,全方位提升学生学科素养及能力;强健体魄、劳其筋骨、磨炼意志,促进学生身心健康;鼓励学生艺术性表达,提高艺术素养和审美情趣。

Y染色体短串联重复序列微流控芯片复合扩增检测体系研究

目的构建Y染色体短串联重复序列(Y-STR)微流控芯片扩增检测试剂,并进行性能验证,实现Y-STR基因座的快速全集成检测。方法使用Y-STR微流控芯片检测体系,对其灵敏度、成功率和分型准确率、峰平衡性、精准性和准确性、检材适应性、混合物检测能力和抗抑制性进行验证评估。结果DNA标准品9948的模板量≥8 ng,血卡片数≥3片以及口腔拭子刮擦次数≥7次时可获得Y-STR完整分型;165份样本的全集成检测成功率为91.52%,分型准确率为99.74%;不同荧光通道之间的峰高比值为89.81%;10次运行的等位基因分型标准品的片段大小标准差均在0.5 bp以内,20份样本全集成检测的等位基因片段和相应的等位基因标准品之间的片段准确性均在0.5 bp以内;能够对口腔拭子、血卡、唾液卡、烟蒂、血棉签、布片精斑等检材进行准确分型;混合样本中较小贡献者与较大贡献者在1∶3的比例时可获得完整基因分型;在不同浓度的腐殖酸(50~400 mg/L)、靛蓝(20~100 nmol/L)、血红蛋白(100~500μmol/L)等抑制物的干扰下,该体系可获得完整基因分型。结论该体系可应用于国产Quick TargSeq法医DNA现场快速检测系统使用,可在法医学实践中选用。

微流控技术在法医DNA快速检验方面的应用

微流控芯片技术因其微型化、自动化、高通量、集成化、快速等优势使得实验室研究产生革命性的变化,并在生物化学、医学等诸多领域得到广泛应用,但目前还没有基于微流控芯片技术的国产全集成自动化DNA分析仪。该文总结微流控技术在DNA提取、PCR扩增、电泳分离等DNA检验流程方面的研究现状与进展,尤其是在法医DNA快速检验方面的研究进展,同时介绍国内外全集成式DNA分析的研究状况。全集成与功能化是目前微流控技术研究的主流方向。未来,以微流控芯片为主导的全自动、便携式、集成化的DNA分析系统,将使得法医DNA检验从实验室走进案件现场甚至日常生活,实现真正的快速即时检验。

单管直扩38重祖先信息InDels体系的构建及其在微流控芯片系统的应用

本文基于插入-缺失多态性(insertion-deletion polymorphism,InDel)遗传标记,从相关文献和dbSNP库中筛选出38个在东亚、欧洲、非洲人群中具有等位基因频率差异的祖先来源InDel位点,同时整合Amelogenin位点和Y染色体STR(DYS439)位点,以辅助未知样本的性别鉴定,采用PCR-CE技术构建了可以区分三大洲际人群的单管直接扩增复合检测体系,该体系可与微流控芯片系统相结合,1.7 h内完成DNA样本自动化扩增和电泳分型,利用公共数据库1000Genomes中16个人群1 607名个体的分型数据对筛选的38个InDel位点进行初步评估;同时对构建的38-plex InDels体系的灵敏度、准确性、直接扩增能力进行验证评估;检测5种不同人群的779份样本和215份唾液卡、血卡的直接扩增样本,采用聚类分析和主成分分析方法,评价体系的推断准确性.结果表明该38-plex InDels复合检测体系分型准确,灵敏度达157 pg,能够对唾液卡和血卡直接扩增,可以区分三大洲际人群及其混合人群,能够准确推断待测样本的族群来源、估算祖先成分,且通过集成细胞裂解步骤将有望2h实现"样本进-结果出"式快速自动化InDel分型.

低体积PCR扩增用于单细胞分离和检验

目的优化在单细胞分离检验中应用0.2mL试管做低体积扩增载体的最佳反应条件。方法制备理想口腔上皮细胞悬液,用0.2mL试管分别收集捕获到的5、10个细胞,设置蛋白酶K添加、PCR反应金牌酶用量、循环次数3组条件,用Identifiler誖Plus试剂盒进行复合扩增,比较各组的检出率、等位基因丢失率和非特异性扩增情况。结果用0.2mL试管做低体积扩增中,加蛋白酶K裂解、PCR反应金牌酶0.4μL、PCR反应32个循环,这3个条件的检出率较高,等位基因丢失率较低。结论在单细胞分离检验中采用0.2 mL试管进行低体积扩增,可以作为芯片-低体积扩增的有效补充手段。

15重快速STR复合扩增体系的构建

目的建立一套15重快速STR复合扩增体系。方法选择14个常染色体基因座以及1个性别基因座,采用Fast Start Taq DNA聚合酶系统,以DNA标准品9947A为模板,通过筛选扩增条件、选择热启动酶用量、调整引物平衡、优化快速扩增程序、筛选反应缓冲液、选择反应体系以及筛选添加剂等一系列复合扩增实验,比较各条件下等位基因丢失和非特异性扩增情况。结果在以1 ng DNA为模板、0.4μL聚合酶及10×Fast Start高保真反应缓冲液构成10μL快速体系的条件下,32 min即可获得标准DNA全部15个STR基因座的完整分型,无等位基因丢失和非特异性扩增现象,等位基因均衡性良好。同时,5%甘油、0.01%明胶、0.05%明胶和5 mmol/L硫酸铵可作为PCR扩增过程中拟加入的反应添加剂。结论本研究建立的15重快速STR复合扩增体系可以明显缩短反应时间,提高样品检测效率。

环泊酚与丙泊酚用于无痛胃肠镜疗效与安全性的Meta分析

目的系统评估环泊酚与丙泊酚用于无痛胃肠镜镇静的疗效和安全性。方法计算机检索PubMed、Cochrane Library、Embase、中国知网、万方、维普数据库自建库至2022年9月30日发表的关于环泊酚与丙泊酚用于无痛胃肠镜患者的随机对照临床试验,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入5项研究,涉及808例患者。Meta分析结果显示,环泊酚与丙泊酚组在镇静有效率(RR=1.01,95%CI:0.99~1.03,P=0.39)、麻醉诱导时间(WMD=0.38,95%CI:-0.10~0.87,P=0.12)、苏醒时间(WMD=0.88,95%CI:-0.53~2.28,P=0.22)、医师满意率(RR=1.05,95%CI:0.96~1.14,P=0.26)和患者满意率(RR=1.07,95%CI:0.96~1.19,P=0.24)方面差异无统计学意义。环泊酚组麻醉后离院时间(WMD=1.87,95%CI:0.71~3.04,P<0.05)略长于丙泊酚组。在主要不良反应发生率方面,与丙泊酚相比,环泊酚用于无痛胃肠镜具有更低的注射痛(RR=0.09,95%CI:0.05~0.15,P<0.05)、心动过缓(RR=0.10,95%CI:0.06~0.16,P<0.05)、呼吸抑制(RR=0.22,95%CI:0.11~0.42,P<0.05)发生率。结论相比于丙泊酚用于无痛胃肠镜检查,环泊酚镇静有效率、麻醉诱导时间、苏醒时间、医患满意率相当,注射痛、心动过缓、呼吸抑制的发生率更低,可作为无痛胃肠镜镇静较好的药物治疗选择。

微流控芯片电泳及其法医学应用

在光学性能良好的Brofloat玻璃电泳芯片上,利用自行搭建的共聚焦激光诱导荧光检测系统,通过对芯片管道表面修饰、筛分介质、分离电场强度、进样方式、电泳温度、进样时间等条件的优化,对含15个STR基因座的法医DNA样品进行电泳分离测试实验.通过对芯片电泳条件优化获得了本电泳系统的最佳条件,成功实现8 min内完成DNA样品片段的分离,表明该微流控芯片电泳系统在法医DNA快速分析方面具有良好的应用前景.

快速PCR方法在法医DNA检验中的研究进展

目前法医DNA检验应用的短串联重复序列(short tandem repeat,STR)复合扩增系统均依赖于荧光标记的多重PCR方法。常规DNA检验流程包括提取、定量、扩增、分离和检测,而多重PCR扩增常常是整个过程中的限速步骤,完成28~30个循环大约需要3 h。以往常利用商业化的热循环仪和热稳定DNA聚合酶,但需要很长的PCR循环时间才能够确保100~400 bp的目标片段得到有效且均衡的复合扩增。随着各种缩短扩增时间方法的出现,STR复合扩增不再需要3 h,而是可以减少到几十分钟甚至十几分钟。现主要总结了快速PCR、直接PCR、芯片PCR以及其他快速扩增等方法的研究现状与进展,尤其是在法医DNA检验领域,同时对比了几种常见快速PCR扩增方法,可见缩短扩增时间对DNA检验的意义重大。未来,以芯片为主导、快速检验为目的的全自动、便携式、集成化的DNA分析系统,将使得法医DNA检验从实验室走进案件现场,甚至日常生活,实现真正的快速即时检验。

延续护理在胃肠外科肠造口患者中的应用效果探讨

目的:探讨延续性护理对肠造口患者的应用效果。方法:选取于我院胃肠外科进行肠造口患者56例,随机分为观察组与对照组,每组各28例患者,对照组给予常规护理方法,观察组在此基础上增加延续性护理,对比两组患者生活质量和对护理的满意度。结果:在对观察组患者进行延续性护理后,该组患者的生活质量评分明显高于对照组患者,该组对护理的满意率优于对照组,P<0.05,差异显著。结论:延续性护理可以提升肠造口患者的生活质量,改善护患关系,可在临床中推广。

老年人疼痛治疗临床药学服务专家共识

疼痛性疾病在老年人中最为常见,严重影响老年人的健康状况和生活质量[1],是老年人跌倒、情绪变化、日常活动减少、睡眠障碍等不良事件的直接原因[2]。积极治疗和控制疼痛对老年人健康尤为重要。据统计,2020年我国60岁及以上老年人口达2.64亿,年龄≥65岁老年人慢性疼痛发生率约为56%[3]。随着年龄增加,老年人各项生理机能逐渐减退,药物在体内处置过程发生改变,导致可能的治疗不足或治疗过度,给老年人的疼痛评估和药物治疗带来了重大挑战[4]。此外,由于老年人在疼痛认知和治疗上存在误区,包括忍痛文化、担忧药物不良反应、长期自行服用非处方药镇痛等,老年人疼痛相关疾病往往得不到及时治疗,导致生活质量严重下降[5~9]。

HMGB1及其在肺动脉高压中的研究进展

高迁移率族蛋白B1（ HMGB1）是一种在真核细胞中普遍存在的DNA结合蛋白,当释放到细胞外隙时可以触发炎症反应。 HMGB1在免疫活性细胞中主动分泌,在损伤细胞中被动释放。细胞外的HMGB1通过模式识别受体转导细胞信号,比如 Toll样受体（ TLRs ）和晚期糖基化终产物受体（ RAGE）,激活胞内 p38丝裂原活化蛋白激酶（ MAPK）、细胞外信号调节激酶1/2（ ERK1/2）、核因子（ NF）-κB 等下游信号通路,或增加转化生长因子（ TGF ）-β1和血小板源性生长因子（ PDGF ）的分泌,导致促炎因子的释放、树突细胞的成熟及平滑肌细胞的趋化和增殖。已有研究表明细胞外HMGB1在急性和慢性炎症性疾病中起作用,如脓毒症、肿瘤、关节炎等。研究表明炎症与肺动脉高压的发生、发展以及肺血管重构都相关,而阻断HMGB1信号可抑制其病理进程。因此,本文就HMGB1及其在PH中的作用进行综述。

FISH联用激光捕获显微分离技术对混合斑进行分离检验

目的建立荧光原位杂交(FISH)联用激光捕获显微分离技术(LCM)精确分离男女混合斑中精子的检验方法。方法收集健康志愿者精子和女性阴道上皮细胞制备模拟混合斑,经过预处理后用Vysis CEPX SpectrumOrangeTMY SpectrumGreenTM试剂盒进行荧光原位杂交,并用PALM激光捕获显微分离系统分离男、女性细胞,使用Identifiler试剂盒结合低体积扩增技术分别对男女成分进行STR扩增。结果荧光原位杂交后,可清晰分辨混合斑中的男女细胞。捕获20个精子细胞可以得到完整的STR分型,检出率为80%。随着精子数目增多,检出率提高而等位基因丢失率降低。30个精子检出率最高,为95%。结论激光捕获显微分离联用FISH技术可用于混合斑中男女细胞DNA的分离检验。

3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增技术的影响

目的:比较3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增(Lowvolume polymerase chain reaction,LVPCR)技术的影响,为细胞分离检验中细胞核标记物的选择提供依据。方法:显微捕获联合LVPCR中,用苏木素、龙胆紫、亚甲基蓝3种染液对口腔上皮细胞进行标识。参照龙胆紫染色法,比较0.5、1、2、5、8μl苏木素染液及2、5、8、10、15μl亚甲基蓝染液的染色效果,优化染色条件;并比较优化后的细胞核标识效果。显微操作仪捕获3种染液染色后的细胞进行DNA检验,比较检测结果;并捕获染色10、30、60 min口腔上皮细胞,比较染色时间对DNA检测结果的影响。结果:100μl口腔上皮细胞悬液加入2μl苏木素、0.5μl龙胆紫或5μl亚甲基蓝染液,细胞核均着色明显,与胞浆对比清晰。5个细胞的分离检验结果示有效分型率分别为90%、100%、66.7%,成功分型率为20%、100%、11.1%;龙胆紫、苏木素染色时间(≤60 min)对DNA检测结果无明显影响,而亚甲基蓝染色时间延长导致等位基因丢失等现象加重,影响检测结果。结论:3种染液均可清晰标识细胞核;而龙胆紫染液对LVPCR技术抑制最弱,为三者中较优的细胞核标记物。

国库集中支付后的新思考

国库集中支付改革,是国家财政体制的重要组成部分,也是从源头上预防和治理腐败的一项重要举措。近年来,各地财政和国库部门逐步推进了此项改革,并取得了明显成效,但也显现出一些问题和不足。文章就国库集中支付后国库应怎样调整监管理念展开分析,并提出相应的对策与建议。

乌司他丁对休克患者术后肾功能的保护作用

目的 :观察乌司他丁对休克患者术后肾功能的影响。方法 :选择休克行手术治疗者 4 0例 ,治疗组与对照组各 2 0例。治疗组于术前、术中应用乌司他丁各 10万U及术后每隔 8h应用 10万U至术后应用 12次为止。术前、术毕及术后 1,3,5d检测血肌酐 (Scr)、尿素氮 (BUN)及尿中N 乙酰 氨基葡萄糖苷酶 (NAG)和γ 谷氨酰转肽酶 (γ GTP)的变化。结果 :两组NAG、γ GTP及对照组Scr均于术后第 1,3,5天明显升高 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;而治疗组NAG、Scr于术后第 3,5天及γ GTP于术后第 5天显著低于对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;BUN两组内及组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论

简易造口灌洗器的制作与应用

肠造口灌肠是从造口处灌入适当液体,以起到清洁肠道、保持大便通畅、缓解梗阻的一种治疗方式。由于肠造口没有括约肌控制、造口黏膜柔嫩易出血、腹壁下肠道走形方向不定等因素,导致造口灌肠难以操作,给临床护士造成很大困扰。笔者通过临床观察及实践,利用奶嘴及硅胶导尿管制做成简易造口灌洗器,收到满意效果,现报告如下。

住院患者心理压力的主要表现及应对策略

护理学是一门人文学科,它服务的对象是由生理、心理、精神、文化等多层面交织在一起的整体的人。因而护理工作,不仅用精湛的专业技术解决患者生理上的疾病,而且要具备人文关怀的能力,解决患者心理、精神层面的问题。作为医护人员,平时侧重于专业知识、技能的学习和应用,缺乏对患者的人文关怀,对患者的心理变化不重视、不敏感、不作为,常常导致工作中出现医患关系紧张的局面。