引进美国小麦种质资源抗病性及品质性状鉴定

为了挖掘新的种质资源,本研究对引自美国的442份小麦材料对白粉病和条锈病的抗病性、蛋白含量以及高分子量麦谷蛋白(HMW-GS)亚基组成进行了鉴定分析。抗病性鉴定结果显示,153份材料抗白粉病,27份抗条锈病,6份兼抗两种病害。蛋白质含量达到GB/T 17892-1999《优质小麦强筋小麦》一等(粗蛋白质含量≥15.0%)的样品有143份。高分子量麦谷蛋白检测发现,供试材料共含18种HMW-GS亚基和100种不同亚基组合类型,其中N,7+9,5+10出现次数最多,优质亚基1、2*、7^(oe)、17+18、5+10的材料分别占总材料数的25.6%、5.2%、27.8%、7.7%和25.6%,含7^(oe),5+10亚基的有36份,含2*,5+10亚基的有1份,含2*,7^(oe)亚基的有7份。综合抗病性及品质分析结果显示,PI 17738等11份材料至少抗1种病害,且蛋白含量≥15.0%,湿面筋含量≥35.0%,同时含有稀有优质亚基。以上11份材料可作为我国优质、抗病小麦培育亲本,为我国小麦抗病和品质遗传改良提供优异基因源。

粗穗披碱草1H^(t)S染色体特异荧光原位杂交标记开发

小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL罗伯逊易位系高抗小麦条锈病和叶锈病,是小麦遗传改良的优异基因源。我们前期利用中国春ph1b基因突变体对该易位系进行诱导,获得了一批诱导后代材料,为了从中准确鉴定小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系,需要建立能够覆盖粗穗披碱草1H^(t)S染色体的荧光原位杂交(FISH)标记。本研究利用21个小麦及其近缘种探针、61个基于中国春基因组序列新开发的小麦1BS染色体探针以及40个根据简单三碱基重复序列新开发的探针对小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL易位系进行非变性FISH分析。结果显示,B74、B76和B77等36个探针(33个为新开发的)在1H^(t)S染色体上具有杂交信号,并且杂交信号可分为仅在染色体末端、仅在着丝粒处、同时在着丝粒处和近着丝粒处、覆盖1H^(t)S约3/4染色体臂、覆盖绝大部分1H^(t)S共五种类型。因此,部分探针单独使用或多个探针联合使用,其信号能覆盖1H^(t)S染色体,能够满足小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系鉴定,这可为小麦背景中粗穗披碱草染色质追踪提供新的检测手段。

“三全育人”视域下互联网时代实验诊断学课程思政实践研究

“三全育人”是高等院校全面落实立德树人根本任务的重要举措,课程思政是深化“三全育人”综合改革的重要实践。本文通过修订实验诊断学教学大纲及课程目标、提升教师德育素质、思政案例库建设、创新教学方法及构建课程思政评价体系等方式实现思政育人模式,充分利用互联网在线资源,深度挖掘课程中的思政元素,将课程专业知识点、与融入的思政案例有机融合,达到协同育人效果。

运用复发型胆总管结石患者胆道细菌建立豚鼠胆石症模型

目的:运用复发型胆总管结石患者胆道细菌建立豚鼠胆石症模型,为研究胆道微生物在胆总管结石复发及胆石症形成的作用机制方面提供贴合临床的动物模型支撑。方法:普通级Dunkin Hartley豚鼠35只,雌雄不限,第一阶段实验20只,第二阶段实验15只。两阶段造模方法均采用胆道插管、注射复发型胆总管结石患者胆道菌液的方式。第一阶段实验造模后第9周时,观察动物模型术后存活率、动物模型胆汁性状及胆道系统内结石形成情况;留取动物胆汁样本做细菌培养。第二阶段实验从造模结束第2天起,每日取材2只动物模型观察其胆汁性状及胆道系统内结石形成情况。观察胆结石动物的肝脏、胆囊及胆总管组织的病理学变化;综合评估本实验方法建立胆石症动物模型的可行性。结果:与既往使用胆道插管注射大肠杆菌并结合不完全梗阻的造模方式相比,本实验使用的造模方法,更贴合临床胆总管结石患者结石复发及胆石症形成时的胆道微生物状态,且造模周期短,模型成功率高,操作难度相对较小,动物死亡率低。结论:本实验使用的造模方式可以成功建立豚鼠胆石症模型,能够为研究胆道微生物在ERCP术后胆总管结石复发及胆石症形成中的作用机制提供可靠的动物模型支撑。

小麦miRNA靶基因的体外实验验证

miRNA是一类内源非编码单链小RNA,广泛存在于动植物中,主要通过切割靶基因或者抑制靶基因表达参与细胞分化、生长和发育等多种生物学调控。目前缺少一种快速简便验证miRNA靶基因的方法。本研究基于前期筛选到的小麦特有的miRNA——Tae-miR9666a,合成其前体及前体突变体,并连接到表达载体上,构建含有GFP(绿色荧光蛋白)标记的靶基因过表达载体,共转化烟草,通过观察GFP的荧光亮度判断靶基因的切割情况,以此来验证miRNA与靶基因的相互作用。结果发现,共转miRNA前体的烟草叶片的荧光亮度较低,表明靶基因被miRNA切割,其后的GFP无法正常表达;共转miRNA前体突变体的烟草叶片的荧光亮度与单转靶基因的相当,表明miRNA前体突变体未切割靶基因,导致GFP正常表达。本实验有效证明了miRNA的靶基因切割情况,也表明利用烟草验证miRNA与靶基因相互作用是可行的。

PT和γ-GT/Alb比值对慢性乙型肝炎患者肝纤维化分期的预测价值

目的:评估凝血酶原时间(PT)、γ-谷氨酰转肽酶/白蛋白(γ-GT/Alb)比值对慢性乙型肝炎(CHB)患者肝纤维化分期的预测价值,并与经典无创模型天冬氨酸氨基转移酶/血小板比值指数(APRI)评分、4因子模型(FIB-4)进行对比。方法:收集2020年4月至2021年5月北京中医药大学东方医院收治的108例CHB肝纤维化患者病例资料作回顾性分析,根据肝活检病理结果将患者分为无或轻度肝纤维化组(S0~S1期,68例)、显著肝纤维化组(≥S2期,40例)。收集患者的血清学指标、APRI、FIB-4等数据,运用单因素分析、多因素logitstic回归分析筛选出独立预测指标并建立综合预测模型,同时采用受试者工作特征曲线(ROC)评价综合模型的预测准确性。结果:单因素分析结果显示,两组患者在γ-GT、Alb、γ-GT/Alb、PT、LN、PLT方面比较,差异具有统计学意义(均P<0.05);多因素logitstic回归分析结果显示,PT和γ-GT/Alb是显著肝纤维化的独立预测指标(P<0.05)。依据logistic回归分析结果建立综合预测模型[logit(P)=-4.926+0.048×γ-GT/Alb+0.147×PT],其ROC曲线下面积(AUC)为0.839,截断值为0.469时,敏感度为78.04%,特异度为97.09%。预测肝纤维化的准确性明显优于APRI及FIB-4,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PT和γ-GT/Alb的综合预测模型对预测CHB导致的显著肝纤维化(≥S2)具有优势,其预测准确性均高于APRI、FIB-4两项指标。

制备活性干酵母的工艺研究

活性干酵母因其保存和运输方便、发酵进程激活快、乙醇生成速率高等优点逐渐在工业中被推广。实验室前期筛选出了优秀的酿酒酵母,但缺少活性干酵母制备工艺的研究与优化,该研究在前期研究的基础上,将筛选出的优良酿酒酵母进行活性干酵母制备条件的优化。结果表明,酿酒酵母菌株H1制备活性干酵母的最佳工艺是离心速度4500 r/min、离心时间10 min、添加10%乳糖作为保护剂进行冷冻干燥。将干酵母的菌体用水稀释25倍,在水温45℃、葡萄糖浓度为5%的条件下复水活化30 min,与鲜酵母同时接入发酵培养基中进行发酵试验,发酵结束后,干酵母和鲜酵母试验组原料(还原糖)剩余量分别为0.93,0.82 g/dL,产物(乙醇)生成量分别为9.60,9.72 g/dL,可知干酵母依旧保持良好的发酵性能。该研究以期为小批量简便制备活性干酵母提供理论依据和技术方法。

当归芍药散“异病同治”慢性盆腔炎和多囊卵巢综合征的网络药理学及分子对接研究

目的:基于网络药理学方法及分子对接技术研究当归芍药散治疗慢性盆腔炎(CPID)和多囊卵巢综合征(PCOS)的“异病同治”作用机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台筛选当归芍药散有效活性成分及靶点,利用GeneCards、DrungBank、人类孟德尔遗传综合数据库获取CPID和PCOS相关蛋白,并取药物、疾病交集靶点制作韦恩图。利用Cytoscape 3.9.1软件制作当归芍药散治疗CPID和PCOS的成分-靶点网络图,通过STRING平台构建药物-疾病靶蛋白的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,运用BioGPS在线软件检索并制作“关键靶点-器官组织”网络图,利用DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书通路富集分析。取药物关键活性成分和疾病核心靶点,通过Autodock Vina软件进行分子对接。结果:筛选到当归芍药散药物有效活性成分74个,当归芍药散-CPID-PCOS作用靶点共70个;PPI网络分析发现,白细胞介素(IL)6、肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶B(Akt)1和前列腺素G/H合酶(PTGS)2等可能是当归芍药散治疗CPID和PCOS的关键靶点。共获得523条GO生物过程和132条相关信号通路,其中TNF、IL-17和Toll样蛋白等信号通路与CPID和PCOS的治疗密切相关。β-谷甾醇、豆甾醇和谷甾醇等活性成分与PTGS2、TNF和Akt1等核心靶点对接结果良好。结论:当归芍药散通过多成分、多靶点、多种信号通路来治疗CPID和PCOS,与其抗炎、免疫调节等作用密切相关,可为进一步对疾病进行基础研究提供新思路。

强筋小麦贮藏蛋白的积累动态、种类及相对含量分析

小麦贮藏蛋白是面粉品质的主要评价指标。本研究以不同高分子量麦谷蛋白亚基组合的强筋小麦(济麦44和济麦229)和中筋小麦(济麦22)为试材,分析强筋小麦和中筋小麦及4+12和5+10高分子量麦谷蛋白亚基组合的籽粒醇溶蛋白、麦谷蛋白及谷蛋白大聚合体(GMP)在小麦灌浆期的积累动态和成熟籽粒中的贮藏蛋白种类、相对含量。结果表明,强筋小麦和中筋小麦的麦谷蛋白和醇溶蛋白在整个小麦灌浆期的积累趋势相同,均持续上升,但GMP积累却存在较大差异,强筋小麦的GMP含量持续增加而中筋小麦呈“下降-上升-下降-上升”的趋势。从高分子量麦谷蛋白亚基组成类型上看,5+10亚基组合的醇溶蛋白、麦谷蛋白及GMP在灌浆中后期的含量均高于4+12亚基组合类型。通过TMT(tandem mass tags)蛋白质组学分析发现,3个小麦品种的成熟籽粒共检测到53个贮藏蛋白,共分为三类,包括27个醇溶蛋白、16个Avenin-like蛋白和10个麦谷蛋白。济麦44较济麦22相对含量高的原因是大多数贮藏蛋白的表达量高,而济麦229相对含量高的原因是部分贮藏蛋白超高量表达。本研究结果可为我国小麦品质改良和优质小麦生产提供技术参考。

基于单通道示波器的LabVIEW噪声电流数据处理软件设计

为了研究如何在资源有限的环境下,更快速、直观地处理分析第三轨噪声电流,文章结合多个受电弓下噪声加权电流的合成规则,按照权系数计算、信号导入和信号处理3个步骤,研究基于单通道示波器的第三轨噪声电流信号处理软件。实现了采集信号的频谱计算、噪声计电流计算、噪声计电流移动加权平均值计算、最大值提取等功能,可处理得到噪声计电流瞬时值和移动加权平均值。此外,在数据处理过程中加入了汉宁窗函数,使处理结果更加准确。

血管紧张素转换酶、血管紧张素蛋白与老年非酒精性脂肪性肝病发病的关系

目的:探讨血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素蛋白8(Betatrophin)与老年非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者发病的关系。方法:选取2019年4月至2021年4月来我院就诊的216例老年人为研究样本,经临床诊断、腹部B超检查结果分为NAFLD组(110例)与对照组(肝脏脂肪含量<9.15%的健康者,106例),收集2组人员的ACE、Betatrophin、血脂、血糖、肝功能等生化指标,分析老年NAFLD患者发病的影响因素及ACE、Betatrophin与各生化指标的相关性。结果:与对照组相比较,NAFLD组患者的ACE、Betatrophin、TG、TC、LDL-C、ALT明显升高(P<0.05),而HDL-C明显下降(P<0.05)。回归分析显示,ACE、Betatrophin、TG、ALP是老年患者NAFLD发生的独立危险因素(OR分别为2.305、3.111、6.841、2.214,均P<0.05)。Pearson相关分析显示,ACE分别与TG、FBG、HbA1c、ALP呈正相关(r分别为0.525、0.373、0.312、0.498,均P<0.05);Betatrophin仅与TG呈正相关(r=0.594,P<0.05);ACE与Betatrophin成弱正相关(r=0.293,P=0.048)。结论:ACE、Betatrophin在老年NAFLD患者中均明显升高,二者均是老年NAFLD发病机制的主要因素。

希尔斯山羊草1S^(s)S和3S^(s)S染色体特异dCAPS标记的建立

希尔斯山羊草是小麦的近缘种,具有抗病、抗逆、抗虫等优异性状,是小麦遗传改良的珍贵基因源。当前,我们创制了一批小麦-希尔斯山羊草杂交种质。然而,由于缺乏分子标记,上述种质无法被有效筛选和鉴定。为了建立希尔斯山羊草染色体特异分子标记,本研究通过对希尔斯山羊草基因组重测序,发掘希尔斯山羊草和小麦间单核苷酸多态性(SNP),选择150个多态性位点开发dCAPS标记,结果发现,相比中国春等小麦对照,利用引物AESD23和AESD105经PCR和酶切电泳后分别能在希尔斯山羊草中获得长度不同的多态性条带。利用一套中国春-希尔斯山羊草二体附加系和端体附加系对这些多态性条带进行定位,结果发现,AESD23能在中国春-希尔斯山羊草1S^(s)二体附加系和1S^(s)S端体附加系中扩增出长度为1800 bp的多态性条带,而AESD105能在中国春-希尔斯山羊草3S^(s)二体附加系和3S^(s)S端体附加系中扩增出长度为200 bp和300 bp的多态性条带。对小麦-希尔斯山羊草杂交种质检测发现,AESD23和AESD105均能对小麦-希尔斯山羊草杂交种质进行有效筛选和鉴定。因此,上述3个多态性片段可以作为dCAPS标记用于检测含希尔斯山羊草1S^(s)S或3S^(s)S染色质的材料,为检测和追踪小麦背景中希尔斯山羊草染色质提供了新的检测手段。

玫瑰茄中增甜香气成分分析及含量测定

以玫瑰茄的花萼为原料,通过气相色谱嗅闻技术筛选出11种可能呈现与甜味感知相关的挥发性香气成分,包括己醛、糠醛、苯甲醛、1-辛烯-3-醇、辛醛、芳樟醇、壬醛、α-松油醇、癸醛、香叶基丙酮和橙花叔醇。由感官描述筛选出6种甜味感知相关的香气成分,分别为糠醛、苯甲醛、芳樟醇、癸醛、香叶基丙酮和橙花叔醇,且除癸醛以外的5种香气成分在30 g/L蔗糖溶液中均有显著增甜作用,其中芳樟醇的增甜效果最佳。通过气相色谱-质谱联用技术对玫瑰茄中香气成分进行定性定量分析。结果表明,玫瑰茄样品中香气成分达56种,占峰面积的95.51%,其中醛类17种、碳氢化合物10种、醇类10种、酯类8种、酸类3种、酮类4种和其他化合物4种。糠醛(12.64%)、苯甲醛(1.69%)、芳樟醇(1.75%)、癸醛(4.10%)、香叶基丙酮(1.36%)以及橙花叔醇(1.01%)的相对含量均高于1%。

锥板法检测全血黏度标准化专家共识

目前临床中检测全血黏度应用最广泛的方法是锥板法,近些年锥板法检测全血黏度的质量虽然得到显著提高,但日常工作中临床医师仍常会质疑检验结果,其原因涉及仪器设备、校准物质、人员操作等诸多因素。为使锥板法检测全血黏度规范化,本共识起草组通过对方法学及质量管理的深入研究,并参考国内外相关文献,对锥板法检测全血黏度的检验前、中、后阶段提出标准化建议,并对检验结果的合理解释进行了阐述,以促进锥板法检测全血黏度在临床诊断、疾病预警、慢病管理中的有效应用。

妇科养坤丸与骨髓间充质干细胞移植修复薄型子宫内膜

背景:已有研究发现骨髓抑制后女性患者的子宫内膜中检测到来源骨髓供体的内膜细胞。目的:探讨妇科养坤丸对骨髓间充质干细胞治疗薄型子宫内膜的促进作用。方法:取处于动情期的雌性大鼠30只随机分为正常对照组、模型组、单药组、骨髓间充质干细胞组、联合组,每组6只,除正常对照组外,其余各组大鼠建立薄型子宫内膜模型。正常对照组正常喂食,模型组尾静脉注射生理盐水,骨髓间充质干细胞组造模后6 h和10 d经尾静脉注射异体骨髓间充质干细胞1 mL,单药组造模后连续20 d灌胃妇科养坤丸水溶液5 m L/kg,联合组造模后6 h和10 d尾静脉注射骨髓间充质干细胞1 m L以及连续20 d灌胃妇科养坤丸水溶液10 mL/kg。造模后第21天苏木精-伊红染色观察子宫内膜组织形态变化,测量子宫内膜厚度,免疫印迹法检测子宫内膜角蛋白与波形蛋白的表达。结果与结论:(1)与模型组相比,骨髓间充质干细胞组、单药组和联合组的子宫内膜均有不同程度增厚,其中联合组最接近正常对照组。(2)正常对照组的角蛋白和波形蛋白表达最强,模型组的表达最低,单药组、骨髓间充质干细胞组和联合组依次升高(P<0.05)。(3)结果表明骨髓间充质干细胞移植于薄型子宫内膜大鼠体内可修复子宫内膜组织,妇科养坤丸能够显著促进骨髓间充质干细胞对子宫内膜的修复作用。

小麦-近缘物种染色体系耐盐性鉴定及分子标记筛选

为挖掘小麦-近缘物种耐盐种质,对215份小麦-近缘物种染色体系进行了耐盐性筛选与鉴定。结果表明,小麦-高大山羊草6S^l附加系和小麦-纤毛披碱草1Y^c附加系的萌发期耐盐性显著优于普通小麦中国春(CS),但仅后者的幼苗期耐盐性显著优于CS,说明纤毛披碱草1Y^c染色体上可能含有耐盐基因。为了获得1Y^c染色体特异标记,以小麦-纤毛披碱草1Y^c附加系及CS为材料,筛选染色体第一同源群PLUG引物,结果显示,TNAC1007、TNAC1028和TNAC1034为耐盐小麦-纤毛披碱草1Y^c附加系的特异引物,扩增条带大小分别为500bp、700bp和500bp。利用上述3对引物对一套小麦-纤毛披碱草附加系进行扩增,结果发现,上述3个多态性PLUG片段为纤毛披碱草1Y^c和1S^c染色体共有的分子标记,可用于辅助筛选与鉴定小麦-纤毛披碱草1Y^c或1S^c染色体重组体。

改性奇亚籽粕可溶性膳食纤维对韧性饼干品质的影响

为研究超声改性奇亚籽粕可溶性膳食纤维对韧性饼干消化特性和物理特性的影响,将超声改性奇亚籽粕可溶性膳食纤维(ultrasonic modified soluble dietary fiber,U-SDF)添加至小麦粉中,研究U-SDF的热重曲线及其韧性饼干的持水性、持油性、硬度和脆度等品质特性,采用体外模拟淀粉消化方法预测血糖指数(predicted glycemic index,pGI)。结果表明:超声改性脱脂奇亚籽粕中可溶性膳食纤维(SDF)最优条件为超声温度50℃,超声时间10 min,超声功率80 W,此条件下SDF提取率为24.8%;U-SDF具有更好的耐热性;随着U-SDF添加量的增加,饼干持水性和持油性随之增加,饼干的p GI值、硬度和脆度随之下降,饼干的网络结构变得不连续。结合感官评价结果综合分析,当饼干中U-SDF添加量为3.2%时,饼干的品质最佳。

耐盐小麦种质筛选、鉴定与评价

为筛选、鉴定和评价耐盐小麦种质,本研究以耐盐小麦品种青麦6号、德抗961以及普通小麦品种济麦22、济麦23为材料,进行7个盐浓度梯度筛选,结果表明,2. 0%盐浓度可以作为小麦芽期耐盐性筛选浓度。利用该盐浓度对1 526份小麦品种(系)进行筛选,发现其相对盐害指数从0. 19~1. 00不等,随着盐害指数升高,供试材料数呈抛物线式上升;其中盐害指数低于0. 5、0. 4、0. 3的材料分别有60、19、3份。以青麦6号和德抗961为对照,对盐害指数低于0. 3的济麦21、济麦262以及济麦22、济麦23等品种进行室内苗期耐盐性鉴定和盐碱地条件下的农艺及产量性状测定,结果显示:济麦262的苗期耐盐性优于其它5个小麦品种;低盐(0. 1%)胁迫对济麦22的农艺性状影响较小;盐胁迫对小麦旗叶的影响大于对株高的影响;济麦22、青麦6号和济麦262的产量较高。

小麦-近缘物种染色体系的高分子量麦谷蛋白亚基组成及白粉病抗性

为了挖掘小麦近缘物种的高分子量麦谷蛋白新亚基和抗白粉病基因新类型,以小麦品种中国春和Alcedo(来自德国)为对照,对133份小麦-近缘物种染色体系进行了高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)分析和白粉病抗性调查。HMW-GS分析发现,25份材料与对照小麦的HMW-GS类型不同,其中,含外源染色体HMW-GS的有16份;亲本部分HMW-GS发生沉默的有2份;含外源染色体HMW-GS且亲本的部分HMW-GS发生沉默的有7份。在含外源HMW-GS的材料中,73.9%的HMW-GS来自于小麦近缘物种第1同源染色体,17.4%的HMW-GS来自第2、3和5同源染色体。白粉病抗性调查显示,尾状山羊草E#1、两芒山羊草2Mbi#1、沙融山羊草4Ssh#8、高大山羊草6Sl#3和簇毛麦5V#3S染色体上可能含有抗小麦白粉病新基因,值得进一步向小麦转育。本研究发现的新HMW-GS和潜在抗小麦白粉病新基因为利用这些资源进行小麦抗病育种与品质改良打下了坚实的基础。

挤压法生产大豆面条的工艺研究

以大豆粉为主要原料,研究确立高温挤压工艺生产大豆面条的流程。挤压处理面条的最优工艺参数及配方为:挤压温度150℃、螺杆转速45r/min、物料水分35%、豆粉含量65%。后熟工艺条件为:环境相对湿度80%、温度30℃、后熟时间6h。大豆面条经包装和保鲜处理后,可在常温(25℃)下保存6d,在冷藏(5℃)条件下保存18d。