高铜日粮对肉鸡肝脏TrxR2基因mRNA表达和还原活性的影响

本文旨在了解高铜日粮对肉鸡肝脏TrxR2基因mRNA表达和还原活性的影响。200羽1日龄Cobb商品代肉鸡随机分为4组,各组日粮中铜含量分别为:对照组(Ⅰ组)11mg.kg-1、试验Ⅱ组110mg.kg-1、试验Ⅲ组330mg.kg-1和试验Ⅳ组550mg.kg-1。饲养至10、30、50d时每组各取5只鸡用于采集肝脏样品,提取肝脏线粒体用DTNB法测定肝脏TrxR2的还原活性,提取肝脏总RNA用RT-PCR法测定TrxR2mRNA在肝脏中的表达量。结果显示,饲喂铜含量为550mg.kg-1日粮50d时还原活性降低(P<0.05)、TrxR2基因mRNA的表达量降低(P<0.05),饲喂铜含量为330mg.kg-1日粮30d时TrxR2的还原活性升高(P<0.05)、50d时降低(P>0.05),表明饲喂高铜日粮(330～550mg.kg-1)可导致TrxR2mRNA在肝脏中的表达量降低,还原活性先升高后降低。

中药对热应激动物消化系统作用的研究进展

中药对动物消化系统具有保护作用,其不仅能够减少热应激时消化系统疾病的发生,还能提高消化系统的消化功能和吸收功能,从而提高动物的生产性能。作者综述了热应激对动物消化系统的影响,中药对热应激动物消化系统的作用,并进一步探讨了中药缓解动物热应激的作用机制。

肺动脉高压肉鸡肺小动脉中膜5-HT量及其与肺血管重构的关系

静脉注射纤维素粒子复制肉鸡肺动脉高压模型,观察肺小动脉中膜5-羟色胺(5-HT)表达和肺小动脉管壁病理形态学变化,探讨5-HT与肺血管重构的关系。80羽科宝肉鸡分为对照组(n=30)和试验组(n=50)。20日龄时,试验组每羽鸡静脉注射0.3 mL的纤维素悬液;对照组每羽鸡静脉注射等体积生理盐水。记录肺动脉高压综合征(PHS)发病率,并分别于21、28、35、42 d从各组随机抽样,测定右心室/全心室质量比(RV/TV)、红细胞压积(PCV)、血红蛋白(Hb)、肺小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、平均中膜厚度(mMTPA)和肺厚壁末梢血管百分比(TWPV%);采用免疫组化方法标记5-HT,并用病理图像分析软件检测肺小动脉5-HT的量。结果表明:试验组肉鸡PHS发病率显著高于对照组(P<0.05);RV/TV值在35、42 d时显著升高(P<0.05);PCV在28、35 d时显著升高(P<0.05);Hb值在35 d时显著升高(P<0.05);血管mMTPA、WA/TA和TWPV%在35、42 d时均显著升高(P<0.05);肺小动脉5-HT含量升高,在各时间点均差异显著(P<0.05),且5-HT含量与mMTPA、WA/TA和TWPV%呈正相关。上述结果表明:5-HT在肺动脉高压肉鸡肺血管重构发生过程中起着重要的作用。

5-羟色胺转运体抑制剂对肺动脉高压肉鸡肺小动脉中膜5-HT量和平滑肌细胞增殖的影响

【目的】探讨肉鸡肺小动脉中膜5-羟色胺(5-HT)含量与肺小动脉平滑肌细胞增殖的关系,明确5-羟色胺转运体(5-HTT)是否参与了肉鸡肺动脉高压的发生。【方法】20日龄科宝肉鸡分成非诱病组(静脉注射生理盐水,包括空白对照组、氟西汀、西酞普兰组,30只/组)和诱病组(静脉注射纤维素微粒,包括药物空白对照组、氟西汀组、西酞普兰组,50只/组)。自21d起,记录肺动脉高压综合征(PHS)发病率,并分别于21、28、35、42d从各组随机抽样,测定右心室/全心室重量比(RV/TV),采用免疫组织化学技术、增殖细胞核抗原(PCNA)染色和核仁组织区嗜银蛋白(AgNOR)染色方法检测肺小动脉中膜5-HT量及肺小动脉平滑肌细胞增殖情况。【结果】诱病组PHS发病率、RV/TV明显高于非诱病组(P<0.05),肺小动脉中膜5-HT量增加,平滑肌细胞上嗜银颗粒增多,PCNA阳性细胞增多,而两种5-HTT抑制剂(氟西汀和西酞普兰)能明显减少肉鸡PHS发病率和肺小动脉中膜5-HT量,抑制平滑肌细胞增殖,但两种药物之间无明显差异。【结论】在肉鸡肺动脉高压发生过程中,由5-HTT介导的肺小动脉平滑肌细胞内5-HT增多,引起肺小动脉平滑肌细胞过度增殖,导致肉鸡PHS发生,5-HTT可能是防治肉鸡PHS的有意义靶分子。

酶消化法分离培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞

试验旨在探讨胶原酶消化法分离并培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞(pul monary artery smooth muscle cell,PASMC)的方法。将1～7日龄雏鸡的肺动脉中膜剪成小于1 mm2的组织块,0.1%Ⅱ型胶原酶消化分离PASMC并进行原代培养和传代培养。倒置显微镜下观察培养细胞的形态,对培养细胞进行HE染色和光学显微镜观察,并采用抗α-肌动蛋白单克隆抗体(α-Smooth muscle actin)免疫组化染色法检测细胞胞浆内α-肌动蛋白的表达,用以鉴定所培养的细胞。结果表明,倒置显微镜下细胞为长梭形,呈典型的"峰—谷"状,未见明显异型细胞。α-actin胞浆染色阳性细胞数占总细胞数的97%以上。因此,胶原酶消化法可用于分离培养肉鸡PASMC,且有方法简单,成活细胞数多、传代周期短的特点,可用于肉鸡心血管疾病如肺动脉高压和肺血管重构的研究工作。

5-羟色胺转载体抑制剂对肺动脉高压肉鸡肺组织胶原蛋白含量的影响

5-羟色胺(5-HT)介导的肺血管重构是肉鸡肺动脉高压综合征(PHS)形成的重要病理机制,而5-羟色胺转载体抑制剂已被证明能够抑制肉鸡肺血管重构,降低PHS的发病率,但其机理尚不十分清楚。为了从肺组织胶原蛋白沉积的角度探讨5-羟色胺转载体抑制剂抑制肉鸡肺血管重构的机理。本试验采用翅静脉注射纤维素颗粒的模型诱发肉鸡PHS,分别给诱病肉鸡灌服两种5-羟色胺转载体抑制剂,即氟西汀(fluoxetine)和西酞普兰(citalopram)。使用分光光度法测量肉鸡肺组织胶原蛋白含量,采用ELISA方法测量肺组织5-羟色胺浓度,观察各组肉鸡肺组织胶原蛋白含量和5-羟色胺浓度的差异。结果显示,发病组肉鸡肺组织5-羟色胺浓度和胶原蛋白含量高于正常对照组肉鸡,而氟西汀和西酞普兰均能降低PHS肉鸡肺组织胶原蛋白含量和5-羟色胺浓度,表明5-羟色胺转载体抑制剂能降低肺成纤维细胞合成胶原蛋白的能力,进而影响肺血管重构和PHS的发生。

肉鸡肺动脉高压综合征抗病育种研究

为了研究肉鸡肺动脉高压综合征(PHS)的抗病育种情况,试验采用静脉注射纤维素颗粒的方法诱发PHS,比较发病前后非易感组肉鸡和易感组肉鸡右心室与全心室重量比(RV/TV)值,心电图Ⅱ导联S波、R波和RS综合波波幅,红细胞比容(PCV),血红蛋白(HB)和血清蛋白含量。结果表明:静脉注射纤维素颗粒明显提高了肉鸡PHS的发病率。发病后腹水组肉鸡PCV、HB含量和RV/TV值升高,血清蛋白含量降低,心电图Ⅱ导联S波、R波和RS综合波波幅均升高,符合肉鸡PHS的特点;但发病前易感组肉鸡与非易感组肉鸡相比,PCV、HB含量、血清蛋白含量和心电图Ⅱ导联S波、R波和RS综合波波幅均无显著差异。

疑似蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病混合感染对仔猪肾功能血清生化指标影响

为探讨猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病混合感染对仔猪肾功能血清生化指标影响,给该病的临床诊断提供一定的依据。采用全自动生物分析仪检测21份患病仔猪肾功能血清生化指标。结果显示21份血清样品中所测的生化指标均显著高于参考值(P<0.01),其中尿素氮(BUN)高出239.89%;肌酐(Cr)略有偏高,高出109.76%;表明仔猪疑似感染蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病后肾脏受到明显损伤。

氟西汀和5-羟色胺对肉鸡肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

为探讨5-羟色胺转载体(5-HTT)在肉鸡肺动脉高压综合征发病中的机制,采用MTT比色法、流式细胞术及Hoechst33258荧光染色法研究5-羟色胺(5-HT)和5-HTT抑制剂氟西汀对体外培养的肉鸡肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖与凋亡的影响,发现氟西汀能够抑制5-HT促PASMC增殖的作用;氟西汀能明显促进PASMC的凋亡,但氟西汀和5-HT共同作用于细胞,PASMC凋亡率明显少于氟西汀单独处理组。表明5-HTT在调节肉鸡PASMC的增殖和凋亡方面起重要作用,有可能参与肺动脉高压肉鸡肺血管重构的形成。

肉鸡肺动脉高压综合征抗病育种研究进展

近几十年来，国内外肉鸡养殖业发展迅速。随着育种学家不断地进行遗传选育，肉鸡遗传改良成效显著，但选育的目的主要是提高生产性能，而忽视了对疾病抵抗力的选择。随着生产性能的不断提高，肉鸡对各种疾病的抵抗力却在不断下降，特别是一些营养代谢病，

静脉注射纤维素微粒诱发肉鸡腹水综合征模型的建立

通过翅静脉注射CM-32纤维素微粒,观察血清白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、血细胞压积(PCV)、血红蛋白(Hb)、腹水等方面的变化,探讨建立肉鸡腹水综合征(AS)模型的可行性。试验分为2组,试验组在20日龄时注射0.3 mL纤维素悬液,对照组注射等量生理盐水。饲养期间统计临床型AS的发病率,并分别于21、28、35、42日龄从各组随机抽样,测定右心/全心重量比值(RV/TV),检查ALB、TP、PCV、Hb、腹水液等。结果试验组AS发病率(12%)显著高于对照组(3.3%),RV/TV值显著增加。纤维素微粒阻塞在肺血管,引起明显的炎性细胞聚集和肉芽结缔组织增生。试验组血清ALB、TP在42日龄明显低于对照组,PCV在28、35日龄时显著高于对照组(P<0.05),Hb在35日龄时显著高于对照组(P<0.05),其腹水液为典型的漏出液,表明翅静脉注射CM-32纤维素微粒成功诱发了AS。

硫酸铜对体外培养鸡红细胞渗透脆性和溶血度的影响

用不同浓度硫酸铜溶液处理体外培养红细胞,采用改良的红细胞渗透脆性测定方法测定红细胞的渗透脆性;采用H2O2诱导氧化溶血试验测定其溶血度。结果显示:铜显著增加鸡红细胞渗透脆性(MCF)并呈现明显的时间、剂量效应;铜引起红细胞溶血度明显升高,且呈明显的时间、剂量效应。表明试验浓度铜能引起红细胞渗透脆性增加,红细胞溶血度增加,使红细胞损伤加重。

5-羟色胺对肉鸡肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

采用胶原酶消化法培养原代肉鸡肺动脉平滑肌细胞(PASMC),检测不同浓度的5-羟色胺(5-HT)对肉鸡PASMC增殖的影响,并用流式细胞仪检测PASMC周期和凋亡情况。结果发现,10-4～10-7 mol/L的5-HT能剂量依赖性地促进肉鸡PASMC的增殖,可能是5-HT加速细胞从G1期向S期过渡,同时5-HT也可促进PASMC凋亡,因此在总体上5-HT促进PASMC增殖的作用更明显。

铜孵育对鸡肝脏线粒体呼吸功能的影响

以CuSO4.5H2O为铜源,用含Cu2+终浓度为0μmol/L(A组)、5μmol/L(B组)、10μmol/L(C组)、15μmol/L(D组)、20μmol/L(E组)和30μmol/L(F组)的孵育介质对从肉鸡肝脏提取的线粒体进行孵育,每个铜浓度下孵育时间为10,25,40min;采用Clark氧电极法对孵育后的线粒体进行呼吸功能测定:呼吸控制率(RCR)、氧化磷酸化效率(OPR)和磷氧比(P/O)。结果显示,随着铜离子浓度的增加和孵育时间的延长,线粒体RCR,P/O和OPR这3项指标均出现不同程度降低;表明铜引起体外孵育的鸡肝脏线粒体功能损伤,且呈明显的时间、剂量效应。