以PAC和BAC克隆为探针筛选cDNA文库

目的 建立噬菌体P1衍生的人工染色体 (PAC)和细菌人工染色体 (BAC)筛选人正常肝cDNA文库的方法 ,并期望分离到与肝癌相关的新基因。方法 用位于 17p13.3肝癌杂合性缺失区内的PAC5 79和BAC15 2 9克隆为探针 ,以噬菌斑杂交筛选法筛选人正常肝cDNA文库 ,并对分离出的cDNA阳性克隆进行部分测序和计算机序列比较及Southern杂交分析 ,进一步确定可能与肝癌相关的新基因。结果 以PAC5 79为探针 ,筛选出78个阳性克隆 ,经初步分析 ,其中 18个为可能的肝癌相关新基因。以BAC15 2 9为探针 ,筛选出 8个阳性克隆 ,经初步分析 ,其中 5个为可能的肝癌相关新基因。结论 以PAC和BAC克隆为探针筛选cDNA文库是一种有效的表达序列分离法 。

ELISA对幽门螺杆菌感染血清IgG、IgA、IgM抗体检测的诊断价值

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对无选择性作内镜检查的90例患者血清,分别作抗HPlgG、lgA、lgM特异性抗体的检测,同时与胃粘膜活检组织块的镜检、培养、快速尿素酶试验的结果进行比较。ELISA检测结果显示血清lgG、lgA、lgM抗体的阳性率分别为71.1％(64/90)、56.6％(51/90)、56.6％(51/90),lgG检出率均高于镜检法65.6％(59/90),尿素酶试验55.6％(50/90)、培养法36.7％(33/90)、但lgA、lgM检出率略低于镜检法、而与尿素酶试验相近,高于培养法。三类抗体的灵敏度、特异度分别为81.4％、54.8％(lgG);57.5％、45.2％(lgA);50.8％、32.3％(lgM),提示对特异性lgG抗体水平的检测具有较高的诊断价值。

利用集落形成实验和成瘤实验初步研究新基因的成瘤作用

目的 探讨新基因尤其是肝癌相关新基因的功能。方法 利用集落形成实验和成瘤实验初步分析HC90和HC3898基因的功能。结果 ①HC90基因的转染能增加SMMC 772 1肝癌细胞形成的集落数量 ;②注射转染了HC90基因的SMMC 772 1细胞形成的肿瘤平均瘤重大于注射SMMC 772 1细胞的自身对照组 ;③HC3898全长cDNA转染SMMC 772 1细胞能显著抑制集落的形成 ;④注射转染HC3898基因的SMMC 772 1细胞组平均瘤重小于注射SMMC 772 1细胞的自身对照组的瘤重 ,抑瘤率为 5 0 % ;⑤HC3898实验组瘤块切片检查可见凋亡细胞及凋亡小体 ,瘤块的组织DNA经 1.5 %琼脂糖电泳分析 ,可发现典型的凋亡“阶梯状DNA条带”。结论 HC90可能是与肝癌恶性表型相关的新基因 ,转染SMMC 772 1肝癌细胞后能促进肝癌细胞的生长。HC3898基因可能诱导凋亡并抑制肝癌细胞的生长。集落形成实验和成瘤实验是对基因功能进行初步分析的有效方法 。

HC3898基因的初步功能研究

目的 初步研究HC3898基因的功能。方法 通过细胞集落形成实验、裸鼠成瘤实验和计算机分析对HC3898基因的功能进行初步研究。结果HC3898在蛋白质水平与酵母、果蝇、线虫中一些与细胞生长分化相关的蛋白质有很高的同源性。HC3898全长cDNA克隆转染SMMC-7721细胞能显著抑制集落的形成。转染HC3898基因的SMMC-7721细胞在裸鼠中的抑瘤率为50%,统计学差异显著。常规病理切片显示实验组瘤块中坏死灶内可见较多凋亡细胞及凋亡小体,在未坏死区可见散在凋亡细胞及凋亡小体。TUNEL染色证明有较多凋亡细胞。抽提实验组瘤块的组织DNA,经1.5%琼脂糖电泳分析,可发现典型的凋亡“阶梯状DNA条带”。结论 HC3898可能通过诱导细胞凋亡而抑制SMMC-7721细胞的生长,提示它是与细胞生长分化相关的基因。

“急淋”白血病细胞与高内皮小静脉及骨髓基质细胞粘附行为的变化

采用改进的小鼠肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）冰冻切片粘附结合实验法和ＭＴＴ法，观察白血病患者尤其是Ｂ细胞性急性淋巴细胞性白血病（Ｂ—ＡＬＬ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外粘附小鼠ＭＬＮ高内皮小静脉（ＨＥＶ）的活性变化及患者骨髓班单个核细胞（ＢＭＭＣ）体外粘附患者骨髓基质细胞（ＳＣ）的活性变化．结果：１．Ｂ—ＡＬＬ，患者ＰＢＭＣ粘附ＨＥＶ的阳性率和强阳性率均低于正常组；２．经抗淋巴细胞功能相关抗原一１（ＬＦＡ—１）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）封闭后，Ｂ—ＡＬＬ患者ＰＢＭＣ对ＨＥＶ的粘附阳性率低于正常对照ＰＢＭＣ经同样处理组及自身ＰＢＭＣ末处理组。抗ＬＦＡ一１ＭｃＡａｂ封闭也能使正常对照ＰＢＭＣ粘附阳性率和强阳性率下降；３．各型ＡＬＬ患者ＢＭＭＣ与患者骨成ＳＣ的粘附率低于正常对照，各型患者组问没有显著差异。

核辐射流行病学研究概况

辐射受照人群的流行病学调查资料，几十年来已积累了相当多的数据。辐射致癌研究重点在低水平辐射对人群的危险。本文综述了近几年辐射致癌流行病学研究成果，对辐射致癌危险和数学模型的发展作了介绍。