半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)克隆及其组织分布和时序表达分析

为了分析半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)的分子生物学特征、组织分布特点以及感染海藻希瓦氏菌后的时序表达规律,通过RT-PCR、生物信息学网站、qRT-PCR技术对半滑舌鳎SNAP29基因进行了扩增、生信分析和表达特征研究。结果表明,半滑舌鳎SNAP29基因CDS区长度为789 bp,编码262个氨基酸,理论等电点(pI)为5.39,分子质量为29.71781 ku,有2个典型的SNARE结构域;二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲组成,二级结构和三级结构基本一致;多序列比对结果显示,半滑舌鳎与欧洲鲈鱼SNAP29基因相似性最高;SNAP29基因在健康半滑舌鳎所测的各组织中均有表达,在鳃组织中表达最高,在脑组织中表达量最低;利用海藻希瓦氏菌人工感染半滑舌鳎后,SNAP29基因在肠道组织、心脏组织和脑组织中表达量主要呈现上调趋势,在肝脏、头肾、脾脏组织中主要呈现下调表达,SNAP29基因在健康半滑舌鳎组织中均有表达;海藻希瓦氏菌感染半滑舌鳎的肠道、脑、心脏、肝脏、头肾、脾脏组织中SNAP29基因呈现差异表达。综上,SNAP29可能参与机体免疫应答过程或病理生理过程。

凡纳滨对虾肠道中地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其生物学特性

为筛选对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)具有潜在益生效果的菌株,从体质量为(3.1±0.4)g的健康凡纳滨对虾肠道中筛选出一株具有耐高温(80℃)能力的菌株(命名为RHVJ),采用形态学观察、生理生化鉴定、基因序列比对、病原菌拮抗能力测定、安全性与耐受性分析和生长特性检测等方法对其展开研究。结果表明:菌株RHVJ为革兰氏阳性杆菌,综合其生理生化特征可初步鉴定该菌属于芽孢杆菌属(Bacillus);菌株RHVJ的16S rDNA序列与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的MH305331.1和NR074923.1完全匹配,其gyrB序列与CP038186.1和CP023729.1也达到了100%的一致性;综合菌体形态、生理生化及分子生物学特征,判定菌株RHVJ为地衣芽孢杆菌;地衣芽孢杆菌RHVJ可抑制副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)生长,对凡纳滨对虾无致病性;在胆盐质量浓度为0~1.2 g/L、pH为3~11环境下培养,以及在37~90℃下进行5min或15 min水浴处理后,菌株RHVJ仍可持续增殖,该菌在27℃、pH 7和盐度20条件下生长最佳。研究表明,凡纳滨对虾肠道源地衣芽孢杆菌RHVJ环境适应性良好且安全,具有一定的病原菌拮抗能力,可作为候选菌株开发为益生菌制剂。

水产动物益生菌的筛选及应用

随着水产养殖业的发展和养殖强度的增加,水产动物病害爆发频繁。传统的抗生素药物虽然对治疗疾病有积极效用,但长期使用会产生巨大的负面效应：病原菌产生耐药性,效力下降[1];药物残留干扰水产动物肠道内有益微生物菌群的生长和繁殖,影响水产动物的健康;残留在水体中的抗生素破坏养殖生态环境,水产品质量下降。近年来,我国水产品因药物残留而出口受阻的事件屡见不鲜,给我国水产业造成巨大损失。1974年Parker[2]首创益生菌一词。

神经型一氧化氮合酶在大菱鲆脑组织中的分布及定位

【目的】探明神经型一氧化氮合酶(n NOS)在大菱鲆(Scophthalmus maximus)脑组织中的分布情况,为揭示大菱鲆脑组织中一氧化氮(NO)的生理功能提供形态学资料。【方法】分别采用NADPH-d组织化学染色法和免疫组织化学法对大菱鲆脑组织中的n NOS进行定位研究。【结果】NADPH-d组织化学染色结果显示,大菱鲆大脑皮质中有蓝色的神经元和神经纤维存在。神经元呈梭形、锥形等形状,神经纤维呈串珠状且无序交织;小脑中NOS阳性神经元在分子层分布稀疏,在颗粒层分布密集,浦肯野细胞胞核淡染。经免疫组织化学法染色后,可观察到大脑皮质中n NOS免疫组化反应阳性物质呈深棕色;小脑皮质的分子层、颗粒层及浦肯野细胞层均有n NOS阳性神经元分布,浦肯野细胞呈免疫组织化学阳性反应。【结论】大菱鲆脑组织中的NOS类型主要限于n NOS,且n NOS在神经活动中发挥重要作用,也进一步证实NO在不同物种中具有一些共同的作用,但不同物种或相同物种不同组织中NO分布及含量存在差异。

基于ROI的高校图书馆移动阅读终端的效益评价——以中国民航大学为例

文章以中国民航大学的移动阅读终端——歌德电子书借阅机为研究对象,运用条件价值评估法CVM计算出投资回报率ROI,通过定量与定性分析相结合的方式来探讨高校图书馆移动阅读终端的效益。

中国特色的碳税--从发达国家的碳税政策中寻求一条中国路

许多发达国家已经或即将实施碳税政策，税率各不相同，但却不约而同拟定了许多优惠政策，以减少对能源密集型工业和面临较大国际竞争压力行业的负面影响，力求在减排的同时兼顾国家经济发展和国际竞争力，然而，过多过滥的优惠政策必将影响减排这个征收碳税最主要的目的。本文主要分析了我国碳税的科学税率范围，并提出了税收政策的一点建议，力求找到一条符合我国国情的碳税之路。

浅析我国税务行政裁量权及其控制

本文指出税务行政裁量权在立法层面和实践中存在的问题，提出了控制我国税务行政裁量权的具体措施：完善现存的税收立法规定，完善税收程序立法，推行税务行政责任追究制度。

国外高校图书馆数字学术研究热点及趋势分析

文章利用CiteSpace V软件,对web of science数据库中国外高校图书馆数字学术相关文献进行可视化分析,探讨研究的热点和发展趋势,以期预测该领域未来发展方向,并对国内的研究提供参考和借鉴。

有限脊波变换环绕现象改进算法及其在版权保护中的应用

Finite Ridgelet Transform(FRIT)能高效表示线的奇异特征,在多种领域广泛应用。但是由于它的"环绕"现象,影响了在图像处理中的应用。揭示了"环绕"现象和Finite Radon Transform(FRAT)域系数的关系,根据像素的空间相关性,以及对FRAT系数进行软门限阈值处理,提出一种改进算法,能够去除"环绕"现象。依据最大后验概率(MAP)准则选择大能量的改进有限脊波变换(Modified Finite Ridgelet Transform-MFRIT)系数,版权信息嵌入其中。实验结果表明,该算法具有更好的鲁棒性和透明性。

鲤致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及生物学特性分析

【目的】分离鉴定鲤(Cyprinus carpio)致病性维氏气单胞菌(Aeromonas veronii),为探究暴发病害养殖鲤的死亡原因及为防治水产经济鱼类病害提供参考依据。【方法】从暴发病害鲤的内脏组织中分离病原菌,通过形态观察、生理生化鉴定、16S rDNA和gyrB基因测序分析确定其分类地位,通过人工回归感染试验判断其致病性,通过药物敏感性试验判定其对抗生素的耐药性。【结果】细菌形态学观察和生理生化试验结果表明,从暴发病害鲤的内脏中分离的病原菌LY623为维氏气单胞菌。16S rDNA和gyrB基因测序结果显示,LY623菌株与维氏气单胞菌菌株的相似性最高,且在系统发育进化树中与维氏气单胞菌聚为一支。毒力基因和耐药基因检测结果表明,菌株LY623携带Alt、Act、hlyA、lip和ela 5种毒力基因及tem、ctxM、tetC、qnrA和qnrS 5种耐药基因。药敏试验结果表明,LY623菌株对四环素、诺氟沙星和红霉素等14种抗菌药物具有耐药性,对庆大霉素、氟苯尼考和氯霉素等14种抗菌药物高度敏感。人工回归感染试验结果表明,分离获得的维氏气单胞菌LY623对鲤的半数致死量(LD50)为2.64×10^(3)CFU/g,对斑马鱼(Danio rerio)的LD_(50)为4.77×10^(7)CFU/g。【结论】从暴发病害鲤内脏组织中分离到的病原菌LY623鉴定为维氏气单胞菌,其毒力基因包括Alt、Act、hlyA、lip和ela,耐药基因包括tem、ctxM、tetC、qnrA和qnrS。该菌株对鲤具有较高毒力,在其肠道、鳃、肝脏和脾脏中引起明显的组织病理学变化;在鲤实际养殖过程中可选用庆大霉素、氟苯尼考和氯霉素等对该菌感染引起的疾病进行治疗。

半滑舌鳎源维罗纳假单胞菌的分离鉴定及药敏试验

为探究导致半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)疾病发生的病原,从患病半滑舌鳎肝脏中分离纯化出一株细菌,命名为CLPV-114,结合细菌形态学观察、生化鉴定和16S rRNA序列分析进行病原鉴定,对其进行药敏试验和生长曲线测定,人工感染试验后测定半数致死剂量(LD50),并进行组织病理学观察。结果表明:菌株CLPV-114为革兰氏阴性杆菌,在系统发育树上与GenBank登录号分别为AF064460、AY144583的维罗纳假单胞菌(Pseudomonas veronii)亲缘关系最近,自然聚为一支;综合生理生化特征和16S rRNA基因序列分析鉴定其为维罗纳假单胞菌;药敏试验显示,CLPV-114对阿莫西林、氨苄西林和头孢哌酮等18种抗菌药物高度敏感,对呋喃妥因、阿奇霉素和四环素等11种抗菌药物中度敏感,对头孢克肟、磺胺异恶唑和甲氧嘧啶等4种抗菌药物耐药;人工感染试验显示,CLPV-114对半滑舌鳎具有致病性,人工感染后的患病鱼与自然患病鱼症状相似,CLPV-114菌株对半滑舌鳎的LD_(50)为1.3×10^(7)CFU/mL;组织病理学观察显示,CLPV-114可引起明显的组织学损伤,表现为肝细胞组织坏死,鳃血管中心充血,脾脏出现含铁血黄素沉积、出血,肠绒毛脱落。研究表明,本次从患病半滑舌鳎肝脏中分离的菌株CLPV-114为维罗纳假单胞菌,对半滑舌鳎具有较强的致病性,可引起不同组织出现明显病理变化,本研究结果可为半滑舌鳎维罗纳假单胞菌病的防控提供科学参考。

铝盐和铁盐混凝对切削液废水中有机物的去除特性

采用PAC和PFS混凝处理切削液废水,并通过超滤膜法将水中有机物分子质量分级,考察混凝前后废水中有机物分子质量分布,可生物降解性及紫外光谱的变化。结果表明,原废水含大量共轭双键和不饱和芳香物质;PAC和PFS混凝剂最佳投加质量浓度均在9 g/L,相应的去除率分别为78.2%、38.2%,其中PAC对大分子有机物的去除率高于PFS,但两者对小分子有机物的去除效果均较差。与PFS相比,PAC改善了废水的可生物降解性。

鱼类性别决定机制及其控制技术

性别控制是水产动物遗传学研究领域的重要分支,在鱼类养殖管理、优良品种选育、提高养殖效益过程中发挥重要作用。鱼类性别决定机制是性别控制技术实施的基础,本文综述了鱼类性别决定的主要机制、鱼类性别控制的主要方法,以期为鱼类性别选择和良种选育提供理论参考。

毛蚶血细胞分类及吞噬功能研究

通过光镜观察毛蚶血细胞形态和结构,对其分类进行研究,分析不同类型血细胞吞噬能力,并研究温度对血细胞吞噬功能的影响。结果鉴定出毛蚶血细胞中有3种类型:(1)大透明细胞,大小为(12.97±1.22)μm,核质比为0.311±0.016,所占比例为(46.40±8.73)%;(2)颗粒细胞,大小为(9.98±1.85)μm,核质比0.390±0.058,所占比例为(41.48±8.63)%;(3)小透明细胞,大小为(7.60±1.17)μm,核质比为0.499±0.049,所占比例为(12.12±4.00)%。毛蚶血细胞在血淋巴液中的平均密度为(7.69±0.98)×106 cell/m L。体外吞噬活性试验表明,大透明细胞和颗粒细胞对酵母聚糖的吞噬率显著高于小透明细胞,吞噬率分别为(61.77±3.30)%、(61.32±3.62)%、(16.59±3.88)%。于15、20、25、30、35℃温度下进行毛蚶血细胞的吞噬试验,结果表明温度变化对血细胞吞噬能力产生明显的影响,30℃条件下,血细胞的吞噬活性最强,吞噬率达到(51.49±4.22)%。

领先农户对普通农户采纳意愿影响研究

领先农户作为农业新技术采纳的重要群体,对农业创新扩散起到关键作用。网络学习、网络信任、网络互动、网络互惠在促进领先农户与普通农户相互交流方面发挥重要作用;市场环境、政策环境、社会环境的建设有助于加强领先农户与普通农户间的社会网络联系。相关部门可以通过外部环境建设,促进领先农户与普通农户之间的社会网络关联,提高农业技术创新扩散效率。

供给侧改革视角下黑龙江省旅游发展研究

黑龙江省近年来旅游发展平缓,究其原因,主要是因为旅游产品结构出现了问题。现从供给侧改革的视角出发,发现黑龙江省的旅游产业存在旅游产品单一、基础设施较差、从业人员素质不高等问题。基于此,现提出优化旅游产品结构;加强旅游基础设施建设;加强旅游专业人才培养等发展对策。

全域旅游视角下齐齐哈尔旅游产业群发展的研究

随着人们对精神生活要求愈发提升,人们对旅游的要求也越来越高。但目前传统旅游已经不能满足人们的需求,在此基础上国家提出了全域旅游的概念。文章从全域旅游的角度对齐齐哈尔市的旅游业发展进行探究,并运用SWOT分析法对齐齐哈尔旅游发展进行了分析,认为齐齐哈尔市在全域旅游的背景下发展旅游业需要在以下三个方面进行加强:一是突出优势资源,进行差异化竞争,二是加强区域合作,打造协同效应;三是加大旅游业投入,提升区域知名度。

全域旅游背景下齐齐哈尔乡村旅游发展研究

随着经济的发展,乡村旅游已经逐渐成为重要的旅游方式。但目前齐齐哈尔市的乡村旅游发展仍存在着旅游产品单一、基础设施差及发展不协调等问题。文章从全域旅游的角度对齐齐哈尔市的乡村旅游进行探究,认为齐齐哈尔市在全域旅游的背景下发展乡村旅游需要在以下四个方面进行加强:一是旅游产品差异化;二是加强基础设施建设;三是进行区域内外合作、打造协同效应;四是提升区域知名度。

锦鲤厦门希瓦氏菌的分离鉴定及药敏试验

【目的】明确引起锦鲤发病死亡的原因及其病原菌的药敏特性,为生产中有效防治该病提供科学依据。【方法】采用常规方法从患病锦鲤的肝脏中分离病原菌,经形态观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列分析确定其种属,通过人工感染试验判断病原菌的致病性,并以纸片扩散法测定其药物敏感性。【结果】综合分离菌株的形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析结果,可确定其为厦门希瓦氏菌(Shewanella xiamenensis)。人工感染试验证明,从患病锦鲤肝脏分离获得的厦门希瓦氏菌具有较强毒力,其对斑马鱼的半数致死量(LD_(50))为2.30×10~4CFU/mL。厦门希瓦氏菌对阿莫西林、红霉素、头孢克肟、头孢哌酮、头孢噻肟、美罗培南、亚胺培南、阿奇霉素、克林霉素、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素和氟苯尼考等14种药物高度敏感,但对氨苄西林、左氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、利福平、链霉素、依诺沙星、磺胺异恶唑和甲氧嘧啶等抗生素已产生耐药性。【结论】厦门希瓦氏菌可感染引起锦鲤发病死亡,且具有较强毒力,实际生产中可选用阿莫西林、美罗培南、亚胺培南、庆大霉素、新霉素、卡那霉素、头孢哌酮、头孢克肟、头孢噻肟和阿奇霉素等抗生素进行防治。

海藻希瓦氏菌感染对半滑舌鳎肠道菌群结构及相关功能基因表达的影响

【目的】明确海藻希瓦氏菌(Shewanella algae)感染对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)肠道菌群结构及相关功能基因表达的影响,揭示肠道菌群和肠道组织相关功能基因在疾病发生及免疫应答过程中的作用机制。【方法】以致病性海藻希瓦氏菌人工感染半滑舌鳎后,采用16S rDNA高通量测序技术探究其肠道菌群组成结构的变化情况,并利用实时荧光定量PCR检测分析半滑舌鳎肠道组织中参与疾病发生和免疫应答相关功能基因的表达规律。【结果】共测序获得118657条有效序列,按97%的序列相似度聚类后得到6732个OTUs。Alpha多样性分析结果显示,Shannon指数和Chao1指数以感染前(CG)的健康半滑舌鳎最高,在感染后12 h(12hpi)最低;感染海藻希瓦氏菌前后半滑舌鳎肠道优势菌门无明显变化,但不同类群的相对丰度发生变化。在属水平上,Elizabethkingia、曼噬甲壳菌属(Chitinophaga)、Brevinema、苯基杆菌属(Phenylobacterium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、乳杆菌属(Lactobacillus)、Marivita和雷尔氏菌属(Ralstonia)的相对丰度在CG半滑舌鳎肠道菌群组成中占比最高,希瓦氏菌属(Shewanella)、Petrimonas、Proteiniphilum和Aminobacterium的相对丰度在12hpi的占比最高,食酸菌属(Acidovorax)、芽孢杆菌属(Bacillus)和弧菌属(Vibrio)的相对丰度在感染后24 h(24hpi)的占比最高。半滑舌鳎肠道组织相关功能基因的表达变化表现为:果糖二磷酸醛缩酶A基因(ALDOA)的相对表达量在24hpi时显著高于CG(P<0.05,下同);磷脂酶B1基因(PLB1)、热休克蛋白70 kD蛋白1A基因(HSPA1A)、组氨酸三聚体核苷结合蛋白1基因(HINT1)和γ谷氨酰转移酶1基因(GGT1)的相对表达量显著高于CG和24hpi;海藻糖酶基因(TREH)的相对表达量在12hpi时显著低于CG和24hpi。【结论】半滑舌鳎感染海藻希瓦氏菌后其肠道菌群多样性降低、菌群结构发生变化,肠道组织中免疫功能相关基因(HSPA1A和HINT1)及代谢功能相关酶类基因(ALDOA、PLB1、GGT1和TREH)呈差异表达,说明海藻希瓦氏菌感染引起半滑舌鳎肠道微生态紊乱,且肠道组织中免疫功能相关基因和代谢功能相关酶类基因分别参与机体的免疫应答及疾病发生过程。