丹参酮ⅡA通过调节PI3K/AKT及MAPK信号通路保护癫痫大鼠神经元损伤的作用机制

目的:探讨丹参酮ⅡA保护癫痫模型大鼠神经元损伤的作用机制。方法:将126只成年雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、红藻氨酸注射组(KA组)、假手术+丹参酮ⅡA组(Sham+TA组)、KA+丹参酮ⅡA组(KA+TA组)、KA+丹参酮ⅡA+二硫代氨基甲酸二乙酯(DDC)组(KA+TA+DDC组)、KA+50 mg/kg氯喹(CQ)组(KA-CQ组)。采用免疫荧光染色评价海马CA3区中心区域内神经元染色反应,检测大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性。提取大鼠的海马区组织,采用蛋白免疫印记(Western Blot)法检测SOD1、SOD2、微管相关蛋白轻链Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和Beclin1蛋白的相对表达量。结果:免疫荧光检测显示,KA组NeuN+细胞的免疫反应水平明显低于Sham组和Sham+TA组,尤其是在海马CA3区;KA+TA组NeuN(+)细胞的免疫反应水平明显高于KA组。双染色结果发现,KA组大鼠海马CA3区LC3Ⅰ/Ⅱ表达明显增加,KA+TA组神经元LC3Ⅰ/Ⅱ表达水平降低。Western Blot检测结果显示,KA组SOD1和SOD2蛋白表在水平明显低于Sham组,KA+TA组SOD1和SOD2蛋白水平高于KA组,Beclin1表达低于KA组。与Sham组相比,KA组和KA+TA+DDC组大鼠海马CA3区NeuN(+)细胞较少。与Sham组相比,KA+TA+DDC组LC3Ⅰ/Ⅱ和Beclin1蛋白水平明显高于Sham组和KA组。KA+TA组大鼠海马区PI3K蛋白表达水平明显高于KA组和KA+TA+DDC组,而KA+TA+DDC组大鼠海马区PI3K蛋白表达水平低于KA组和KA+TA组。结论:丹参酮ⅡA预处理对KA诱导的大鼠颞叶癫痫模型神经元损伤具有保护作用,这可能是通过激活PI3K/AKT和MAPK通路调节自噬活性相关。

天麻钩藤颗粒联合丁苯酞对风火痰阻型脑卒中恢复期患者神经功能及脑血管储备功能的影响

目的探究天麻钩藤颗粒联合丁苯酞对风火痰阻型脑卒中恢复期患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)水平及脑血管储备功能的影响。方法前瞻性选取2021年1月至2023年12月张家口市第一医院收治的122例风火痰阻型脑卒中恢复期患者为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组(n=61)和观察组(n=61)。两组均给予常规治疗,对照组给予丁苯酞治疗,观察组在对照组的基础上加用天麻钩藤颗粒治疗。比较两组患者疗效,比较两组治疗前和治疗28 d后的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、日常生活活动能力(Barthel指数)、中医证候积分评分、血清VEGF和BDNF水平、脑血管储备功能指标[脑血管储备功能(CVR)、脉动指数(PI)];观察并记录两组研究过程中不良反应发生情况。结果观察组整体疗效优于对照组,且观察组总有效率为93.44%,显著高于对照组(77.05%),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗28 d后的NIHSS评分、中医证候积分分别为(4.93±1.30)、(10.17±2.27)分,均低于对照组[(6.88±1.79)、(13.96±2.46)分],Barthel指数评分为(71.61±12.29)分,高于对照组[(60.96±11.28)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗28 d后的血清VEGF、BDNF水平分别为(241.61±51.79)、(9.12±1.36)μg/L,均高于对照组[(211.45±47.94)、(7.62±1.28)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗28 d后的CVR为(29.94±5.48)%,高于对照组[(25.61±5.37)%],PI为0.61±0.19,低于对照组(0.72±0.22),差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者在整个研究中均未发生明显不良反应。结论丁苯酞联合天麻钩藤颗粒可显著降低风火痰阻型脑卒中恢复期患者的中医证候积分,改善神经功能和脑血管储备功能,且对提高患者日常生活能力也具有显著的作用。

灯盏花素调控Nrf2/Gpx4通路对MIRI模型心肌凋亡的影响及作用机制研究

[目的]探究灯盏花素调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)通路对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型心肌凋亡的影响及作用机制。[方法]45只大鼠随机分为Sham组、MIRI组和MIRI+灯盏花素组,每组15只。通过结扎左前降支冠状动脉建立MIRI模型,建模24 h后,MIRI+灯盏花素组使用灯盏花素灌胃(200 mg/kg,1次/d,7 d)。比较各组大鼠心功能、心肌组织损伤、细胞凋亡、血清氧化应激因子、Nrf2/Gpx4通路表达水平。[结果]3组的上述指标比较差异显著(P<0.05)。MIRI组的左室收缩压力(LVESP)、上升和下降速率(±dP/dt max)、超氧化物歧化酶(SOD)、Nrf2和Gpx4 mRNA和蛋白水平显著低于Sham组,左室舒张末压力(LVEDP)、凋亡指数、丙二醛(MDA)水平显著高于Sham组(P<0.05)。MIRI+灯盏花素组的LVESP、±dP/dt max、SOD、Nrf2和Gpx4 mRNA和蛋白水平显著高于MIRI组,而LVEDP、凋亡指数和MDA显著低于MIRI组(P<0.05)。[结论]灯盏花素具有缓解MIRI模型大鼠心肌细胞凋亡的功能,并且其保护心功能的机制可能与促进Nrf2/Gpx4通路有关。

灯盏花素对COPD小鼠模型气道平滑肌细胞增殖的影响

目的探究灯盏花素通过肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/TNF受体(TNFR)/核因子-κB(NF-κB)通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)动物模型气道平滑肌细胞(ASMC)增殖的影响。方法45只小鼠分为对照组、COPD组和COPD+灯盏花素组,每组15只,通过鼻腔滴入脂多糖(LPS)和香烟环境诱导COPD模型,灯盏花素(48 mg/kg)腹腔注射干预。比较3组气道阻力、气管损伤情况、增殖细胞核抗原(PCNA)水平、TNF-α/TNFR/NF-κB途径转录和翻译的水平。将ASMC分为空白组、模型组、模型+灯盏花素组和模型+灯盏花素+EVP4593组,通过EdU法检测各组细胞活力和增殖能力。结果COPD组50 mg/mL和100 mg/mL条件下的气道阻力[(9.94±1.67)cm H_(2)O×s/mL,(18.94±2.13)cm H_(2)O×s/mL]、气管损伤情况、PCNA表达水平、TNF-αmRNA、TNFRmRNA、NF-κB mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)。COPD+灯盏花素组的气道阻力[(7.15±1.28)cm H_(2)O×s/mL,(13.78±1.86)cm H_(2)O×s/mL]、气管损伤情况、PCNA表达水平、TNF-α、TNFR、NF-κB mRNA和蛋白表达水平显著低于COPD组(P<0.05)。ASMC 4组增殖情况比较差异显著(P<0.05)。其中模型组的增殖率(41.26±3.58%)显著高于空白组(15.85±1.87%)(P<0.05),模型+灯盏花素组的增殖率(30.64±3.06%)显著低于模型组(P<0.05),模型+灯盏花素+EVP4593组的增殖率(22.18±4.02%)显著低于模型+灯盏花素组(P<0.05)。结论灯盏花素可能通过抑制TNF-α/TNFR/NF-κB通路抑制ASMC的增殖,进而减少气道阻力。

铜绿假单胞菌的耐药机制及群体感应研究进展

铜绿假单胞菌是临床上常见的条件致病菌,也是医院感染的重要病原体,在多种感染中分离率高,且对多种抗生素耐药。其耐药机制包括获得耐药基因、膜透性改变、药物外排泵表达、改变菌体表面电荷等。群体感应系统在调控菌体生物被膜形成、致病性和耐药性方面起关键作用,该系统包括Las、Rhl、PQS等,研究者正探索通过干扰此系统来削弱致病性和耐药性。对铜绿假单胞菌的群体感应系统及其耐药机制的研究,不仅有助于揭示其生物学特性,还能为开发新型抗感染药物和治疗策略提供依据。未来需将研究成果转化为临床应用,以控制感染。

谷胱甘肽-S-转移酶基因多态性与尿中苯乙烯巯基尿酸的关系

目的探讨GSTP1和GSTM1及GSTT1基因多态性与苯乙烯接触工人尿中苯乙烯巯基尿酸（PHEMA）水平的关系。方法选取山东省某机车外壳生产厂苯乙烯作业人员126名为接触组，非苯乙烯作业人员150名为对照组。应用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应（PCR．RFLP）法检测个体GSTPl基因多态性，多重PCR法检测GSTM1和GSTT1的基因多态性，分析GSTP1、GSTM1、GSTY1基因多态性与苯乙烯接触工人尿中PHEMA水平的关系。结果本次调查中3个基因型分布符合中国人群分布特征。在高浓度苯乙烯的接触水平下，携带GSTP1（exon5，A105G）野生基因型AA者尿中PHEMA浓度（43．58mg／g）明显高于携带突变基因型AG和GG者（AG：29．769mg／g；GG：30．245mg／g），携带GSTM1野生型基因型者尿中PHEMA浓度（40．197mg／g）明显高于携带缺失型基因型者（28．866mg／g），差异有统计学意义（P≮0．05）。未发现GSTT1野生型与缺失型的个体有明显差异。对照组中3个基因多态性与个体尿中PHEMA的水平关系不明显。结论GSTP1和GSTM1基因多态性可能与个体尿中PHEMA水平有关系。

XRCC1399与XPD751基因多态性与苯乙烯致周围血淋巴细胞损伤关系

目的探讨DNA修复基因X线修复交叉互补基因1(XRCC1)399与人类着色性干皮病基因D(XPD)751基因多态性与苯乙烯致周围血淋巴细胞损伤的关系。方法 选取山东省某机车外壳生产厂126名苯乙烯作业人员为接触组,150名非苯乙烯作业人员为对照组。应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术检测患者XRCC1 399位点和XPD 751位点的基因多态性,分析其与苯乙烯致周围血淋巴细胞损伤的关系。结果 XRCC1 399 Arg/Gln分布主要以Gln/Gln和Arg/Gln基因型为主,Arg/Arg基因型仅出现在少数人群中。XPD 751 Lys/Gln主要以Lys/Lys基因型为主,未发现Gln/Gln基因型者,2种基因的基因型均符合Hardy-Weinberg平衡。接触组携带XRCC1 399 Arg/Gln和Gln/Gln基因型的个体周围血淋巴细胞双核微核率低于Arg/Arg基因型者,差异有统计学意义(P<0.05),携带XPD 751 Lys/Gln基因型的个体周围血淋巴细胞双核微核率高于Lys/Lys基因型者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 XRCC1 399和XPD751基因多态性可能与苯乙烯致周围血淋巴细胞损伤有关系。

大蒜素对慢性肾功能衰竭模型大鼠肾纤维化的影响

目的 观察大蒜素对慢性肾功能衰竭（chronic renal failure, CRF）模型大鼠肾组织纤维化的影响，探讨其作用机制。方法 采用腺嘌呤溶液（250 mg/kg）灌胃21 d的方法建立CRF大鼠模型。造模成功后，将80只模型大鼠采用随机数字表法分为模型组和大蒜素低、中、高剂量组，每组20只，另设正常对照组20只。大蒜素低、中、高剂量组分别灌胃大蒜素溶液2.5、5.0、10.0 mg/ml，模型组和正常对照组灌胃等体积生理盐水，按2 ml/kg大鼠体重给药，1次/d，连续给药28 d。末次给药后2 h，测定大鼠体重并计算肾脏指数；采用HE染色观察肾组织病理改变并进行评分；采用生化分析仪测定血清BUN、SCr、尿酸、24 h尿蛋白水平；采用ELISA法检测血清中CRP、IL-6、TNF-a水平及血浆中Ⅳ型胶原（collage typeⅣ, CⅣ）、Ⅲ型前胶原（Ⅲ procollagen, PCⅢ）、层黏连蛋白（laminin, LN）、纤维连接蛋白（fibronectin, FN）水平；采用免疫组化染色法观察肾组织Ⅰ型胶原（collage typeI, ColⅠ）、丝氨酸蛋白酶-1 （plasminogen activator Inhibitor-1, PAI-1）、MMP-1表达。结果 与模型组比较，大蒜素中、高剂量组大鼠体重升高，肾脏指数降低（P＜0.05或P＜0.01），肾组织病理学改变评分降低（P＜0.01）；大蒜素中、高剂量组大鼠血清BUN[（14.51±2.76）mmol/L、（11.48±2.43）mmol/L比（24.07±3.82）mmol/L]、SCr[（116.28±27.35）μmol/L、（106.57±24.18）μmol/L比（134.89±35.02）μmol/L]、尿酸[（83.34±16.42）mmol/L、（77.86±13.97）mmol/L比（114.76±16.53）mmol/L]、24 h尿蛋白[（152.79±48.43）mg、（137.03±42.61）mg比（177.94±96.47）mg]、CRP[（8.79±1.84）mg/L、（7.51±1.69）mg/L比（11.64±1.95）mg/L]、TNF-a[（184.37±24.15）ng/L、（126.82±12.96）ng/L比（255.87±31.93）ng/L]水平降低（P＜0.05或P＜0.01）；血浆C-Ⅳ[（40.26±7.12）ng/ml、（23.79±4.25）ng/ml比（67.53±8.39）ng/ml]、PC-Ⅲ[（32.03±5.89）ng/ml、（24.31±5.84）ng/ml比（54.20±7.08）ng/ml]、LN[（99.05±38.17）ng/ml、（83.42±28.83）ng/ml比（117.83±35.76）ng/ml]水平降低，FN[（98.58±21.43）mg/L、（125.96±25.12）mg/L比（66.72±13.09）mg/L]水平升高（P＜0.05或P＜0.01）；大蒜素中、高剂量组肾组织Col Ⅰ[（0.17±0.03）、（0.09±0.03）比（0.27±0.05）]、PAI-1[（0.20±0.05）、（0.16±0.04）比（0.31±0.08）]表达下调，MMP-1[（0.10±0.03）、（0.22±0.05）比（0.04±0.02）]表达上调（P＜0.05或P＜0.01）。结论 大蒜素可抑制CRF大鼠肾组织纤维化，减轻炎症反应，保护肾组织。