利用激光微束穿刺法将GUS基因导入百脉根并获得转基因植物的研究

利用激光微束穿刺法将ＧＵＳ基因导入百脉根并获得转基因植物的研究周奕华韩厉玲王兰岚宋桂英陈正华（中国科学院遗传研究所北京１００１０１）ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＧＵＳＧｅｎｅｉｎｔｏＬｏｔｕｓａｎｄＡｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｏｆＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＰｌａ...

离体培养下白杜木质部的形态发生研究

白杜(Euonymus bungeanus Maxim.)的离体木质部经过组织培养,成功地诱导出小植株,诱导率为8%。诱导过程经过3个阶段:1.诱导愈伤组织形成,以 H 培养基效果最好,但需附加不同浓度的2,4-D、NAA 或 BA。2.分化阶段,诱导小植株的形成,以 H 或 MS+BA2mg/1+KT0.5—1mg/1+NAA0.2mg/1分化培养基为宜。3.小植株的成长,以 White+NAA0.1mg/1+IAA0.1mg/1培养基最适。愈伤组织主要起源于木射线细胞。在愈伤组织中可以产生连续的或不连续的、呈带状排列的分生组织,其中有些分生组织最后可形成象茎中的形成层那样连成一圈,但它们不能产生正常的维管组织,只能向一侧分化出木质部的管状分子,而不能向另一侧分化出韧皮部的筛状分子。另外,在愈伤组织中还出现了一些鸟巢状管胞团。不定根发生在愈伤组织深处,为内起源;不定芽起源于愈伤组织表面,为外起源。

利用激光微束穿刺法将GUS基因导入百脉根并获得转基因植物的研究

利用激光微束穿刺法将ｐＢＩ１２１质粒ＤＮＡ导入百脉根。该方法是用高渗缓冲液对百脉根子叶进行预处理，通过激光微束对子叶细胞进行穿刺，然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的绿色小苗。转化植物在含卡那霉素浓度为１００μｇ／ｍｌ条件下筛选培养三代后，获四株转基因植物，取其中两株进行总ＤＮＡＰＣＲ扩增分析，皆为阳性。证实ＧＵＳ基因已导入百脉根中。通过研究建立了激光微束穿刺法转化百脉根的技术体系，从而证明该转化方法操作简便，重复性好，转化频率较高。