纳米金比色传感器检测食品中的沙门氏菌

为了快速、简便地检测食源性沙门氏菌,试验采用制备纳米金比色传感器的方法,设计沙门氏菌的特异性引物,并对沙门氏菌进行不对称扩增,得到的ss DNA可以保护纳米金,从而使得纳米金的耐盐性增强;根据纳米金耐盐程度的不同,使得纳米金呈现不同的颜色,由单分散到聚集依次呈现为红色→紫色→蓝色,通过肉眼观察或者分光光度计来识别食品中是否含有沙门氏菌。结果表明:沙门氏菌的检出限为5 ng/μL;利用传感的方法检测沙门氏菌,具有快速、灵敏、费用低等优点;并且可以应用于临床样品的检测。

三重荧光PCR法鉴定食品中牛、猪、鸭3种动物源性成分

旨在建立一种快速、灵敏、可以同时鉴定食品中多种动物源性成分的方法。根据线粒体环氧酶3(cox3)、细胞色素b(cytb)和线粒体d-loop,分别设计鸭、牛和猪特异性引物序列。应用SYBR实时荧光PCR技术,分析熔解曲线,根据出峰位置的不同,定性识别鸭、牛、猪源成分。单重PCR试验测得鸭、牛和猪PCR扩增产物熔解曲线峰值对应的熔解温度分别为(83.5±0.5)℃、(79.5±0.5)℃和(76.5±0.5)℃。三重PCR体系扩增产物的吸收峰与单重PCR体系扩增产物的吸收峰对应的熔解温度吻合,说明试验的可行性。此外,试验检测鸭成分的灵敏度为0.1%,牛成分的为0.1%,猪成分的为1%。结果表明,该方法成本较低、灵敏度较高,可用于同时定性检测食品中鸭、牛和猪3种动物源性成分。

超高效液相色谱法检测猪肉中麻保沙星残留

为了检测猪肉中麻保沙星残留，试验采用一种快速、高效的超高效液相色谱（UPLC）法，以氧氟沙星为内标，样品经三氯甲烷提取，50℃吹干，流动相溶解，正己烷除脂，紫外检测器检测，色谱柱为Waters ACQUITY BEH RP18柱（2．1mm×50mm，1．7μm），流动相为0．2％三氟乙酸（A）：乙腈（B）=82：18。结果表明：线性范围为10—1000μg/kg（r=0．9994），检出限为5μg／kg，定量限为10μg/kg，在50，150，300μg／kg3个浓度水平进行添加试验，平均回收率为85．80％～103．20％，批内相对标准偏差为2．1％-3．8％，批间相对标准偏差为2．9％-4．7％。此方法操作简单、灵敏度高，可用于相关药物的残留检测。

超高效液相色谱-串联质谱法测定中兽药散剂中4种喹诺酮药物

为了检测中兽药散剂中喹诺酮类药物的非法添加情况,试验利用超高效液相色谱-串联质谱技术,采用ACQUITY UPLCTM C18色谱柱(2.1 mm×100 mm)进行分离,以乙腈(A)和0.2%甲酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,多反应监测(MRM)扫描,电喷雾电离正离子模式(ESI+),流速为0.4 m L/min,外标法定量。结果表明:4种喹诺酮药物在1~100 ng/m L浓度范围内,药物浓度与吸收峰面积呈现良好的线性关系,相关系数(r)≥0.997。检出限为0.3 ng/m L,定量限为1 ng/m L。该方法可以同时定量检测中兽药散剂中是否添加4种喹诺酮类药物,具有快速、准确、灵敏、成本较低、节省时间、可以应用于高通量的实际检测样品等优点。

酶标法检测牛奶中硫氰酸盐

本试验基于酶标仪法建立了用于快速、准确检测牛奶中硫氰酸根浓度值的方法,该方法用三氯乙酸除去牛奶中的蛋白和脂肪,过滤后取上清液,硫氰酸根与硝酸铁溶液显色后,用酶标仪在450 nm波长处测吸光度值,用模拟奶做标准曲线,通过科学的数据处理,定量测定牛奶中硫氰酸盐的含量。试验检测体系适用对象为生鲜乳及复原乳,试验结果表明：当硫氰酸根的浓度在0.5~16 mg/kg范围内时,硫氰酸根的质量浓度与溶液的吸光度值呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 7,回收率为98.6%~105%,仪器检测下限为0.3 mg/kg。本试验所建立的方法数据可信度高,检测灵敏度高,成本低廉,操作方便,适合中小单位对牛奶中硫氰酸根做定量分析。

双重荧光PCR法快速检测饲料中牛羊源成分

为了快速、灵敏检测反刍动物饲料中的牛羊源成分,试验采用双重荧光PCR方法,根据线粒体环氧酶2(Cox2)和细胞色素b(Cytb)基因,分别设计牛羊特异性引物序列,基于SYBR荧光PCR技术,分析熔解曲线,根据吸收峰的位置不同,定性识别牛羊源成分。结果表明:试验测得单重牛PCR产物熔解曲线吸收峰对应的熔解温度为(76.0±0.5)℃,羊PCR产物熔解曲线吸收峰对应的熔解温度为(81.5±0.5)℃,且双重体系吸收峰与单重对应的熔解温度吻合,说明试验可行。试验检测牛成分的灵敏度为0.01%,检测羊成分的灵敏度为0.1%。该方法可以同时定性检测饲料中牛羊源性成分,成本较低,节省时间,可以应用于高通量的实际检测样品,灵敏度较高。

氯唑沙宗在C57BL/6小鼠体内的代谢及药代动力学参数研究

目的通过氯唑沙宗(CZX)经口灌胃C57BL/6雄性小鼠,确定血浆中CZX和代谢产物6-羟基-氯唑沙宗(6-OH-CZX)的浓度-时间曲线,计算药代动力学参数,并与文献报道的CZX药代动力学参数进行比较和讨论。方法 72只SPF级C57BL/6雄性小鼠,随机分成20和200 mg/kg·bw 2个剂量组,经口灌胃给药。在灌胃前和灌胃后2、5、10、15、20和30 min,1、2和4 h分别取4只小鼠采血,通过高效液相-串联质谱测定血清中的CZX和6-OH-CZX浓度,并利用DAS 2.0软件计算药代动力学数据。结果 20 mg/kg·bw CZX组小鼠灌胃后30 min,CZX和6-OH-CZX在血浆中均达到最高浓度,分别为57.61和1.84 nmol/ml。200 mg/kg·bw CZX组小鼠灌胃后10和15 min,CZX和6-OH-CZX血浆中的浓度分别达到最高峰,为332.56和5.96 nmol/ml。药代动力学参数结果表明,20和200 mg/kg·bw剂量组的CZX半衰期t_(1/2)分别为63.11和53.80 min。200 mg/kg·bw剂量组的CZX和6-OH-CZX的浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为20 mg/kg·bw剂量组AUC的3.71和2.91倍。结论 C57BL/6小鼠在经口灌胃CZX的剂量为20～200 mg/kg·bw时,可以选择检测灌胃后5～20 min内血浆CZX和6-OH-CZX的浓度,以便在进行同一种属小鼠的CYP2E1酶活性相关研究中,达到较好的对比效果。

一种新金纳米反应体系检测牛奶中的三聚氰胺

基于金纳米的颜色变化及优良的光学特性,建立了快速及高灵敏度的检测方法,以检测牛奶中的三聚氰胺。本试验所建立的新金纳米反应体系主要包含两部分内容：（1）用克伦特罗标记金纳米;（2）调整反应最佳p H,并在此基础上,优化牛奶前处理过程。在金纳米体系中加入三聚氰胺,随着加入量的增加,溶液会呈现红紫蓝颜色逐渐变化,并且吸光度值A520有降低趋势,A670有升高趋势。本反应体系检测范围为0.4~12 mg/kg,线性相关系数为0.993,检测回收率范围是86%~105%。试验操作简便,灵敏度高。当牛奶中三聚氰胺浓度超过8 mg/kg时,可用肉眼检测。