SIRT6对小鼠米色脂肪细胞适应性产热功能的影响

目的:探索沉默信息调节因子6(SIRT6)对小鼠米色脂肪细胞适应性产热功能的影响及其机制。方法:利用Seahorse能量代谢分析仪和real-time PCR检测SIRT6对小鼠原代米色脂肪细胞线粒体呼吸的调控作用及产热基因表达的情况;在HEK293A细胞和小鼠原代米色脂肪细胞中利用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测SIRT6和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的相互作用;利用免疫沉淀(IP)实验检测SIRT6对PGC-1α乙酰化水平的影响,并通过双萤光素酶报告基因实验检测SIRT6对PGC-1α转录辅激活活性的调控作用。结果:过表达SIRT6可增加小鼠原代米色脂肪细胞的氧气消耗速率,上调产热基因的表达,Co-IP实验说明SIRT6与PGC-1α存在相互作用,IP实验表明SIRT6会去乙酰化PGC-1α,双萤光素酶报告基因实验证实SIRT6会协同增强PGC-1α的转录辅激活活性。结论:SIRT6通过去乙酰化PGC-1α增强小鼠原代米色脂肪细胞的适应性产热,从而促进能量消耗。

葛甘咀嚼片有效成分提取工艺的研究

目的建立葛甘咀嚼片有效成分含量测定方法,优化葛甘咀嚼片有效成分提取工艺。方法采用高效液相色谱法进行有效成分的含量测定,色谱条件:Agilent TC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0→10→30→40→45 min;15%→15%→30%→70%→15%乙腈),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长为254 nm。采用正交设计,以提取物中有效成分含量、出膏率为指标,用综合评分法进行数据处理,优化提取工艺条件。结果五味子醇甲、甘草苷、甘草酸铵、葛根素的线性范围良好,方法学考察符合规定;葛甘咀嚼片的最佳提取工艺为8倍量70%乙醇提取1次,1 h/次。结论本研究建立的含量测定方法符合方法学验证要求,可用于葛甘咀嚼片有效成分的测定,有效成分提取工艺条件合理、稳定。

比拉斯汀关键中间体的合成

以2-[1-（4-溴苯基）-1-甲基乙基]-4,5-二氢-4,4-二甲基唑为原料,通过与二溴乙烷的格氏反应得到4-[1-（5,5-二氢-4,4-二甲基-2-唑基）-1-甲基乙基]-2-苯乙基溴,再与2-（4-哌啶基）-1H-苯并咪唑在碱性条件下经亲核取代得到比拉斯汀中间体2-（2-（4-（2-（4-（1H-苯并咪唑-2-基）哌啶-1-基）乙基）苯基）丙-2-基）-4,4-二甲基4,5-二氢唑,总收率63%。新工艺不仅避免了正丁基锂、环乙烷等危险试剂的使用,而且降低了安全隐患和环境污染,简化了实验步骤,且操作简便、收率高,适合工业化生产。

脂肪组织特异性Sirt6基因敲除小鼠发生非酒精性脂肪肝

为了探讨脂肪组织特异性Sirt6基因敲除对小鼠肝脏的影响,利用CrE-LoxP系统获得脂肪组织特异性Sirt6基因敲除小鼠的基础上,通过组织病理学检查,Sirt6基因敲除小鼠和野生型小鼠的肝脏组织形态,进而提取两种基因型小鼠的肝脏组织RNA,通过实时定量PCR分析肝脏中参与脂肪生成的关键基因以及炎症标记物的表达水平。结果显示,成功获得脂肪组织特异性Sirt6基因敲除小鼠,组织病理学检查表明,无论是正常饮食还是高脂饮食,Sirt6基因敲除后小鼠均会发生脂肪肝并伴有炎症反应;此外,实时定量PCR的分析结果也显示,肝脏组织中参与脂肪生成的关键基因以及炎症标记物的表达均有明显升高。表明脂肪组织特异性Sirt6基因敲除小鼠发生非酒精性脂肪肝。

苦瓜咖啡饮料的研制及其减肥功能的研究

目的以苦瓜、咖啡、木糖醇和柠檬酸为原料,研制苦瓜咖啡饮料,并对该饮料的减肥功能进行研究。方法通过正交试验,确定了苦瓜咖啡饮料的配方,开发出了一种口味良好、具有一定保健功能的饮料。将30只成年C57BL/6小鼠按体重随机分为3组,即空白对照组、高脂模型组、高脂实验组,每组10只。其中,空白对照组给予普通饲料;其余各组均给予高脂饲料;高脂实验组灌胃苦瓜咖啡饮料;高脂模型组灌胃等体积水;每天1次,连续30 d。采用全自动生化分析仪测定血清中葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。结果结果表明,最佳配方为:苦瓜∶咖啡为50∶50(质量比),木糖醇25%,柠檬酸0. 5%,黄原胶0. 25%;高脂实验组小鼠血清中的葡萄糖、TC、TG和LDL-C的含量均显著降低(P <0. 05),并且HDL-C的含量显著升高(P <0. 05)。结论苦瓜咖啡饮料具有明显的减肥降脂作用。

胡萝卜鳄梨复合果酱制作工艺的研究

目的以胡萝卜和鳄梨为原料制作复合果酱。方法以复合果酱的感官评价作为主要指标,利用质构仪对复合果酱进行质构分析,并作为辅助评价指标,研究胡萝卜鳄梨复合果酱的最佳工艺条件。结果最佳配方为(均为质量比):胡萝卜∶鳄梨的比例为1∶1,白砂糖35%,柠檬酸0. 5%,黄原胶0. 25%。所研制的胡萝卜鳄梨复合果酱色香味俱佳,同时具有理想的质构特性。结论按照以上最佳工艺研制出的复合果酱色泽自然、口感细腻、风味独特,具有较高的营养价值及保健功能。

苦瓜提取物指纹图谱的研究

目的建立苦瓜提取物的高效液相指纹图谱。方法采用高效液相色谱法,WondaSil C18色谱柱,用甲醇-0.1%磷酸作为流动相进行梯度洗脱。检测波长为254 nm,柱温为30℃,流速为0.8 mL/min。结果DAD图谱中有15个共有峰,确定为其指纹峰。采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)”自动处理,相对保留时间RSD范围为0.08%~0.98%。结论该方法操作简便、稳定、重复性好,可作为苦瓜提取物的质量控制评价标准。

含钛三元复合催化剂经熔融缩聚催化乳酸合成高分子量聚乳酸

构建了一种由四异丙氧基钛(TPT)、对甲基苯磺酸(TSA)和2,2-二羟甲基丙酸(DMPA)组成的三元复合催化体系。利用DMPA结构中双羟基和羧基与TPT有效作用,调节钛的催化活性。TPT/TSA/DMPA构成的复合催化体系在乳酸聚合过程中,TSA瞬时占据中心钛原子空轨道,有效防止了副反应发生。TPT/TSA/DMPA在最优摩尔比情况下,乳酸经熔融聚合可得数均相对分子质量10万、重均相对分子质量在20万以上的聚乳酸。通过核磁氢谱、碳谱、质谱等方法分析了三元复合催化体系可能存在的络合结构和催化乳酸聚合的反应中间阶段。此三元复合催化体系方便易得,其合成操作简单,催化乳酸聚合所得聚乳酸相对分子质量较高,具有较好的发展前景。

五味枳椇颗粒有效成分提取工艺的研究

目的优化五味枳椇颗粒有效成分最佳提取工艺。方法采用乙醇回流提取法提取五味枳椇颗粒有效成分,采用HPLC测定其中效标成分葛根素、双氢杨梅素、甘草酸铵和五味子醇甲的含量,以乙醇浓度、提取时间和药液比例作为考察因素进行单因素考察,通过正交实验优化提取工艺。结果最佳提取工艺为提取次数2次,乙醇浓度60%药液,液料比例8倍量,加热时间1 h。结论该提取工艺安全合理,成本低,提取率高,简单易行,便于操作。

“双创”时代中药物化学课程改革的探讨

"双创"时代下我们需要结合时代特点,基于现在的实际情况对药物化学课程改革进行探讨,该文分析了药物化学的学科特性、教学中存在的问题,并提出改革理论和实验课程,构建网络课程资源平台等改革建设。通过药化课程的改革培养学生的创新能力,培养创新型药学人才。

萝卜苷改善db/db小鼠糖尿病的效果

目的探索萝卜苷在2型糖尿病模型db/db小鼠中的作用。方法取12周龄雄性db/db小鼠20只,随机数字表法分为对照组和萝卜苷组,分别给予蒸馏水和100 mg/kg萝卜苷水溶液灌胃,每天1次,连续8周,每周监测小鼠体重,于第8周进行葡萄糖耐量试验(glucose tolerance test,GTT)和胰岛素耐量试验(insulin tolerance test,ITT),第9周采用全自动生化分析仪测定血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和血糖含量。结果与对照组相比,100 mg/kg萝卜苷组小鼠体重增长缓慢,从第2周至第8周均明显低于对照组(P<0.05);血清TG、TC、LDL-C和血糖含量均显著降低(P<0.05),HDL-C水平上升但差异无统计学意义;GTT和ITT实验结果显示萝卜苷组小鼠具有更好的葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性。结论萝卜苷不仅能够抑制db/db小鼠体重增长,还可以改善db/db小鼠的糖脂代谢稳态,并提高其胰岛素敏感性。

贝利司他的合成

本研究设计以下路线合成贝利司他。采用"一锅法"先使3-溴苯磺酰氯与苯胺反应得3-溴-N-苯基苯磺酰胺,然后不经纯化直接与丙烯酸乙酯经Heck偶联得(E)-3-[3-(N-苯胺基磺酰基)苯基]丙烯酸乙酯。最后在氢氧化钠作用下与羟胺反应得贝利司他,总收率62%,纯度99.1%。本工艺路线短、收率高、操作简捷,已经公斤级中试验证。