雀稗麦角菌原生质体诱变育种及发酵条件研究

为获得麦角碱高产菌株,提高雀稗麦角菌(Claviceps paspali strain3103)发酵的产碱率,用溶壁酶水解处理菌丝体、不同浓度的亚硝基胍诱变处理制备的原生质体,经再生培养获得诱变菌株,再经紫外初筛后进行发酵复筛,采用Van-Urk方法测定产碱量。筛选得到的高产菌株进行二级发酵并优化其发酵条件。实验结果表明,经亚硝基胍诱变处理,麦角总碱的产率由90mg/L提高到了1600mg/L,增加了约16倍;单位产碱率由22.5mg/L/g提高到了400mg/L/g,增加了约17倍;连续传代培养可以得到稳定的高产菌株,接种量为20%时可有效缩短发酵周期。结果表明,用亚硝基胍对原生质体进行诱变处理可有效提高C.papspali的产碱率。

斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留

研究斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留,将制备的金霉素多克隆抗体点在硝酸纤维素膜上,用以竞争捕获胶体金标记的金霉素-牛血清白蛋白结合物和样品中的游离金霉素,通过可见的颜色深浅判断结果。结果表明,本方法的检测限为0.4μg/ml,在金霉素浓度为0.6～1μg/ml范围内可实现定量分析。结果与酶联免疫方法的测定结果一致(相关系数r为0.970)。该法可应用于禽肉中金霉素残留的快速检测。

四环素与金霉素完全抗原的制备研究

采用戊二醛交联法和混合酸酐法制备了四环素-BSA与金霉素-BSA完全抗原,分别将两种不同偶联法制备的四种完全抗原按照常规免疫程序免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,酶联免疫吸附法测定出抗四环素与金霉素特异性抗体的效价最高达1∶320000,这为进一步制备抗四环素与金霉素抗体提供了良好的免疫原,同时为食品中四环素类残留的免疫学检测方法的建立奠定了基础。

三聚氰胺免疫层析试纸检测方法研究

研究免疫层析试纸方法快速检测样品三聚氰胺残留。采用戊二醛法和重氮法分别合成三聚氰胺-明胶和三聚氰胺-牛血清白蛋白,作为免疫抗原和检测抗原。按常规方法制备抗三聚氰胺多克隆抗体并用胶体金标记。制作免疫层析试纸,通过观察金标抗体在试纸条上检测线的呈色现象,判断样品中三聚氰胺的残留量。结果表明,本方法可在15分钟以内完成检测,检测限为1.0μg/mL,可应用于牛奶等样品中三聚氰胺残留的快速检测。