抗癌药物抗药性的分子机理

近20年来化疗在抗癌中的贡献越来越显著。但疗效好的则限于那些药物易达到的肿瘤,而对那些药物不易达到或有固有抗药性的肿瘤,则疗效不佳。本文试从分子水平简述抗药性的发生及其克服方法的研究进展。国际上对此已经开展了广泛的研究,仅从美国肿瘤年会(AACR)发表的摘要就可以看出其重视程度。1987年有29篇,1988年71篇,1989年87篇,1990年67篇,1991年74篇。至今研究热情未减,但没有突破性进展。借助于分子生物学研究技术,相信会有更大的进展。我国此项研究刚刚起步,利用我国的病例数量和中医中药优势将有助于我们在抗药性研究中做出贡献。

煤层开采技术浅析

由于煤层的自然条件和采用的机械不同,完成回采工作各工序的方法也就不同,并且在进行的顺序、时间和空间上必须有规律地加以安排和配合。这种在采煤工作面内按照一定顺序完成各项工序的方法及其配合,称为采煤工艺。在一定时间内,按照一定的顺序完成回采工作各项工序的过程,称为采煤工艺过程。

耐顺铂人肺腺癌细胞系A_（549）DDP的建立及耐药机制

采用递增顺铂（ＤＤＰ）浓度的方法，体外连续培养建成一株耐ＤＤＰ的人肺腺癌细胞系Ａ（５４９）ＤＤＰ，耐ＤＤＰ为亲代Ａ（５４９）的２４．４倍。在无ＤＤＰ的培养基中培养５月余，其耐药性仍稳定。Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞内谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平显著高于亲代细胞（Ｐ＜０．０１）。ＢＳＯ耗竭细胞内ＧＳＨ后，Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞对ＤＤＰ敏感性增加５倍，ＢＳＯ对亲代Ａ（５４９）细胞无增敏作用，Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞ＧＳＴ酶同功酶ＧＳＴ—π含量较Ａ（５４９）高１．６倍，却无ＧＳＴ基因扩增，表明ＧＳＨ／ＧＳＴ解毒系统参与Ａ（５４９）ＤＤＰ耐药性的产生。实验结果亦示Ａ（５４９）ＤＤＰ与卡铂及氨甲喋呤间存在交叉耐药，而与易产生ＭＤＲ或ａｔＭＤＲ之ＡＤＭ、ＶＣＲ、ＶＰ－１６、ＶＭ－２６无交叉耐药，Ａ（５４９）细胞无Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）表达，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ研究Ａ（５４９）ＤＤＰ无ｍｄｒｌＴｏｐｏⅡ基因扩增，提示Ａ（４５９）ＤＤＰ细胞系与ＭＤＲ及ａｔ－ＭＤＲ无交叉耐药。

中药方剂R_1对耐阿霉素人乳腺癌细胞P糖蛋白表达的影响

免疫细胞化学技术和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证实ＭＣＦ７ａｄｒ细胞Ｐ－糖蛋白（ＰＧＰ）过量表达，而ＭＣＦ７细胞无ＰＧＰ表达。１：６０Ｒ１（复方Ｒ１）和１：９０Ｒ１处理细胞２小时、３小时均使ＭＣＦ２ａｄｒ细胞ＰＧＰ表达下降，并且与药物作用时间和浓度有关。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析示ＭＣＦ１ａｄｒ细胞ｍｄｒ１ｍＲＮＡ高表达，而ＭＣＦ７细胞无表达。１：６０Ｒ１、１：９０Ｒ１处理２小时或３小时均使ＭＣＦ７ａｄｒ细胞ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达降低，且随着时间的延长而更加明显。浓度（１：６０Ｒ１，１：９０Ｒ１）改变对耐药细胞ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达下降的影响程度无明显差异。结果提示Ｒ１的逆转作用机理之一可能与其从蛋白质和ｍＲＮＡ水平使耐药细胞ＰＧＰ表达下降．从而增加细胞内药物聚集量和抗癌药细胞毒性有关。

阿霉素在小鼠体内诱导S－180细胞株抗药性的实验研究

利用ＢＡＢＬ／ｃ小鼠，腹腔接种Ｓ－１８０瘤细胞，阿霉素腹腔注射治疗１５个周期培育传代，得到抗阿霉素的Ｓ－１８０细胞株（Ｓ－１８０Ｒ）。此抗药细胞对阿霉素的抗药性比亲本细胞提高６６倍。对典型的ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ抑制刻ＶＰ１６（Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）抗药性增加９倍。经免疫组化进一步证实，抗药细胞显示多药抗药基因（ＭＤＲｇｅｎｅ）产物Ｐ－１７０糖蛋白过表达。流式萤光细胞仪测试结果也表明抗药细胞比亲本细胞排出药物能力提高８９倍。可以肯定这是ＭＤＲ基因过表达产物所致。本工作为筛选有效逆转抗药功能的药物及其他治疗手段提供了有用的动物模型。

异搏定对耐阿霉素人乳腺癌细胞系多药耐受的逆转作用

多药耐受是肿瘤化疗失败的主要原因之一.耐阿霉素的人乳腺癌细胞系MCF_7^(adr)具有多药耐受表型,对阿霉素和罗丹明123表现交叉耐受.本文应用MTT法证实;钙通道阻滞剂异搏定能够逆转 MCF_7^(adr)细胞对阿霉素或罗丹明 123的耐受;荧光显微镜技术和 FCM进一步证实了无毒浓度异搏定(10μm)可增加MCF_(adr)~7细胞内阿霉素或罗丹明123的荧光强度.该作用系由于异搏定使耐药细胞表达的大量P一糖蛋白功能失活,细胞摄取药物量增加或延长药物在细胞内滞留时间所致.

综采工作面局部片帮冒顶原因分析及其控制

综采工作面在生产中经常发生片帮冒顶事故,这不仅使工作面经常处于半停产状态,而且造成机械设备的损坏,采煤机开机率下降,导致综采工作面产量和效益的降低,同时对人身安全造成严重威胁。本文通过对综采工作面片帮冒顶的机理及特点进行分析,提出了综采工作面片帮冒顶的控制措施。

锚网支护在复合岩层条件下的应用

文章针对S3715工作面复合顶板不易支护的实际情况,采用锚杆、金属网、锚索联合支护技术,有效地降低了顶板下沉,控制了巷道围岩变形,同时取得了良好的经济效益。

无血切肝术的护理体会

无血切肝术是指通过阻断肝的出入血管血流,使肝脏处于完全无血状态下,进行手术操作的一类技术方法的总称[1].它在肝门区,即Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅷ段肿瘤的切除中有着特别的价值.由于无血切肝术创伤大,术中术后患者的血液动力学、酸碱平衡、血氧饱和度和肝肾功能的变化较常规切肝手术复杂,故加强术前准备和术后并发症的观察及护理,对提高治愈率有重要意义.现将护理体会总结如下.

P-170在亲本S-180和抗药S-180-R瘤细胞中的表达

①目的探讨ＭＤＲ基因产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－１７０）在亲本Ｓ－１８０及抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中的表达。②方法用ＡＢＣ免疫组化方法，按日本ＤＡＫＯ公司免疫药盒程序进行，单抗为Ｃ２１９，ＬｉｎＫｉｎｇｒｅａｇｅｎｔ１∶４００，Ｓｔｒｅｐｔａｉｖｉｄｉｎｒｅａｇｅｎｔ１∶４００，ＤＡＢ染色，苏木精复染。③结果Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中，有明显的Ｐ－１７０表达，亲本Ｓ－１８０细胞则无此表达。抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞比抗阿霉素Ｐ３８８／ＡＤＲ细胞有更多的Ｐ－１７０表达。④结论ＭＤＲ基因产物Ｐ－１７０的过表达是抗阿霉素细胞系Ｓ－１８０－Ｒ的抗药标志之一。

阿霉素诱导S-180瘤细胞凋亡核型分析

①目的探讨阿霉素诱导Ｓ－１８０瘤细胞凋亡过程中细胞核型的变化。②方法用低剂量（３．２５μｇ）阿霉素处理经Ｓ－１８０瘤细胞腹腔接种的ＢＡＬＡ／Ｃ鼠，０～７２ｈ分别取腹水进行细胞核型检测。③结果用阿霉素处理２４ｈ时，细胞变圆，胞浆浓缩；４８ｈ时，染色质密集度增高；７２ｈ时，核仁裂解，核膜内陷，形成内涵物不外溢的凋亡小体。④结论阿霉素是良好的细胞凋亡诱导剂，凋亡期间细胞外形及染色质凝聚逐渐改变，直至形成凋亡小体。

男性乳腺癌65例临床病理分析

探讨男性乳腺癌的发病及预后因素。方法 :对 65例男性乳腺癌患者的临床病理特点进行分析。结果 :本组 5年生存率为 78 5% ,1 0年生存率为30 8%。Ⅰ期的生存率显著高于Ⅱ期 ,Ⅱ期生存率显著高于Ⅲ期 ,非浸润性癌的生存率显著高于浸润性特殊型癌 ,浸润性特殊型癌生存率显著高于浸润性非特殊型癌 ,行根治术的生存率显著高于未行根治术者 ,术后行放疗和化疗的生存率显著高于术后未行放疗和化疗者。结论 :男性乳腺癌预后取决于期别 ,病理类型及治疗方法。男性乳腺癌应以根治术为主 ,术后配合放疗和化疗。

阿霉素诱导亲本 S-180 和抗药 S-180-R 细胞凋亡的差异

①目的探讨阿霉素对抗阿霉素细胞系Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡的作用。②方法用低剂量（３．２５μｇ）和高剂量（６．５０μｇ）阿霉素分别处理亲本Ｓ－１８０和抗药Ｓ－１８０－Ｒ细胞腹腔接种的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠，７２ｈ取腹水，用流式细胞仪测定细胞ＤＮＡ相对含量。③结果低剂量阿霉素７２ｈ使亲本Ｓ－１８０细胞出现６２．５％的凋亡，使抗药Ｓ－１８０－Ｒ仅出现１３．０％的凋亡细胞，高剂量阿霉素７２ｈ使亲本Ｓ－１８０细胞几乎全部死亡，使Ｓ－１８０－Ｒ出现２０．０％的细胞凋亡。低剂量阿霉素处理７２ｈ，亲本Ｓ－１８０细胞鼠腹腔出现大量淋巴细胞；抗药Ｓ－１８０－Ｒ细胞鼠腹腔只有少量淋巴细胞出现。高剂量阿霉素处理亲本Ｓ－１８０细胞仍保留很多淋巴细胞，其他Ｓ－１８０细胞几乎全部死亡，而抗药Ｓ－１８０－Ｒ细胞中淋巴细胞消失。④结论细胞抗凋亡是细胞抗药性的明显标志之一。抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ细胞接种的小鼠腹腔内淋巴细胞的数量与阿霉素的剂量有关。

高剂量阿霉素对亲本S-180和抗药S-180-R瘤细胞凋亡的影响

①目的探讨高剂量阿霉素对亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞凋亡的影响。②方法用高剂量（１００μｇ）阿霉素处理经亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞腹腔接种的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠，０～２４ｈ后取腹水，用流式细胞仪测定细胞相对ＤＮＡ含量。③结果阿霉素处理６，９，２４ｈ后，亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞流式图上均未出现凋亡细胞峰；在抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞被杀伤的同时，鼠腹腔出现淋巴细胞，并且随时间推移逐渐增多，但却不能刺激Ｓ－１８０细胞接种鼠腹腔淋巴细胞的增殖。④结论高剂量（１００μｇ）阿霉素对亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞的杀伤不是由细胞凋亡诱导的。高剂量阿霉素对抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞鼠腹腔中的淋巴细胞有轻微刺激增殖作用，但对Ｓ－１８０鼠腹腔的淋巴细胞却有免疫抑制作用。

人胃癌c-Ha-ras基因的限制片段长度多态性

以^(32)P-dATP 标记的克隆的人 c-Ha-ras 基因为探针,通过 Southern吸印杂交,鉴定了 c-Ha-ras 基因座位在胃癌患者瘤组织及其远端组织 DNA 中,3种 Bam HI 限制片段长度的多态性,并在2个病例中发现了可能的移位。

阿霉素耐药性研究与流式细胞分析

目的 探讨流式细胞术在阿霉素多药耐药研究中的特殊意义。方法 对两组不同耐药倍数的阿霉素耐药细胞系 (S 1 80R和BGC 82 3/DOX)进行动态、对比性流式细胞分析。结果 流式细胞术在高倍数耐药细胞系S 1 80R中表现出与亲代细胞耐药性的直观的整体差异 ,在低倍数耐药细胞系BGC 82 3/DOX中则可以定量地分辨与亲代细胞耐药性的细微差异。在动态分析中 ,检测到耐药细胞群中个体细胞耐药性的变化 ,即个体细胞内荧光含量的接近 ,细胞荧光峰的集中。结论 流式细胞术在阿霉素耐药性研究中具有灵敏、准确。

P_4噬菌体——一种卫星噬菌体的特性及其DNA的研究

本实验观察了P4噬菌体在大肠杆菌C117中的增殖过程。该噬菌体在60℃几乎完全被灭活,对紫外线有抗性,对乙醇和EDTA溶液敏感。用电镜和琼脂糖凝胶电泳对其DNA进行分析提示,P4噬菌体中除含一般的双链开环和线性DNA外,在未完全成熟时它的头部衣壳中还有一种复杂的不均一打结DNA,这种特殊构型DNA的发现将为DNA拓扑异构酶Ⅱ的鉴定及酶活力测定奠定基础。

美术教学中学生创造能力之培养

伴随着基础教育课程改革的浪潮,新课标体现在课程功能、结构、内容等方面都较原来课程有了重大创新和突破。新课标强调"一切为了学生的发展",重点是培养学生的创新意识和创造能力。

论《素问·至真要大论》中从少从多对于治法的意义

目的:探讨中医学治法的分类与机制。方法:由《内经》入手,查阅历代医家的注解,将治法进行分类总结,探讨其机制,并举例说明。结论:中医治法根据"从少从多"可分为正治法、反治法、正治反佐法和反治正佐法。

HL-60细胞系基因组文库的构建

从培养的HL-60细胞中提取出高分子量的基因组DNA,以EcoRⅠ部分酶解,蔗糖密度梯度离心得到15～30kb的插入片段。以PEG8000沉淀,CsCl密度梯度离心提纯EMBL4噬菌体DNA,以EcoRⅠ,EamHⅠ双酶解得到左右臂,连接、包装得到9.7×10~5个重组体.随机检测了4个重组体,其插入片段平均为19kb.对于19kb的插入段,特定DNA序列达到99％检出率所需的重组体为7.3×10~5(Pfu).