内皮祖细胞增殖、迁移和黏附能力与端粒酶活性的关系

目的观察体外培养外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移和黏附能力与EPCs端粒酶活性之间的关系。方法密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞(MNCs),接种至明胶包被的培养板上,培养7d后进行细胞免疫组化鉴定EPCs,采用MTT比色法、Transwell小室和黏附能力测定实验,观察EPCs的增殖、迁移和黏附能力。TRAP-PCR银染法检测EPCs端粒酶活性。结果从人外周血能成功分离EPCs细胞。从冠心病患者分离的EPCs增殖、迁移、黏附能力较非冠心病患者下降。冠心病患者EPCs端粒酶活性较非冠心病患者低。结论冠心病患者EPCs功能显著减弱,可能与EPCs端粒酶活性降低有关。

老年变异型心绞痛2例

1临床资料 患者1，男性，72岁，因“间断心前区疼痛1年，加重12h”，于2010年6月26日以“急性冠脉综合征”入院。患者无明显诱因反复出现心前区疼痛1年，每次持续3min左右，含服“硝酸甘油”后缓解，多于凌晨4：00～5：00时发作。入院前12h反复发作10余次，含服“硝酸甘油”约3min缓解。既往有高血压病史2年，血压控制尚可。吸烟40余年，平均20支／d。无糖尿病、冠心病家族史。查体：

血管紧张素Ⅱ对成人脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对成人脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向心肌细胞方向分化的诱导作用,并与5-氮杂胞苷(5-aza)作比较.方法:自成人脂肪组织中分离培养ADMSCs,分别用AngⅡ(Ⅰ组)和5-aza(Ⅱ组)诱导ADM-SCs,同时设立对照组(Ⅲ组),光镜下观察细胞的生长情况及形态学变化,电镜下观察细胞的超微结构,免疫细胞化学方法检测心肌特异性肌钙蛋白-Ⅰ(cTn-Ⅰ),MTT法检测细胞活性,流式细胞术分析细胞周期及凋亡.结果:Ⅰ,Ⅱ组ADM-SCs诱导后呈现类似心肌细胞的形态学特征,第28日Ⅰ,Ⅱ组均表达cTn-Ⅰ,两组间诱导转化率无差别,其中Ⅰ组ADM-SCs增殖迅速,较少凋亡细胞.结论:AngⅡ在促进ADMSCs增殖的同时诱导其向心肌细胞分化,优于传统的化学诱导剂5-aza.

人脂肪间充质干细胞的分离培养及其遗传稳定性

背景:研究发现脂肪间充质干细胞核型具有不稳定性,且干细胞移植后长期安全评价等问题尚未从根本上得到解决。目的:观察体外分离培养的人脂肪间充质干细胞传代培养的遗传稳定性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/11在解放军兰州军区兰州总医院骨科研究中心完成。材料:成人腹部大网膜脂肪组织来源于单纯性阑尾炎患者,由解放军兰州军区兰州总医院普通外科提供。方法:胶原酶消化法体外分离培养人脂肪间充质干细胞,加入含体积分数为10%胎牛血清的HG-DMEM培养基吹打细胞沉淀,过滤后于37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度条件下培养,待细胞生长至70%～80%融合时消化传代。分别取第3,25,30代脂肪间充质干细胞进行相关指标检测。主要观察指标:脂肪间充质干细胞表面标志表达、细胞增殖、核型分析、超微结构电镜观察、恶性肿瘤特异性生长因子的表达。结果:第3代脂肪间充质干细胞CD13,CD44,CD59均呈阳性表达,而造血干细胞表面标志CD34及成纤维细胞表面标志HLA-DR均呈阴性表达;染色体的形态、结构和数目均未见异常,呈二倍体结构;镜下可见完整的高尔基复合体,数量较多的粗面内质网,部分糖元颗粒分布在胞浆中。第25代脂肪间充质干细胞分裂增殖作用强于第3代脂肪间充质干细胞;多条染色体出现断裂畸变,并且染色体数目出现异常,呈亚二倍体或超二倍体核型;核仁增大,异染色质及线粒体数量增多,内质网数量少,细胞较为幼稚。第3,25,30代脂肪间充质干细胞恶性肿瘤特异性生长因子的表达吸光度值无明显差异(P>0.05)。结论:分离获得的人脂肪间充质干细胞长期体外培养具有遗传不稳定性,有向肿瘤细胞突变的倾向。

5-氮胞苷对脂肪间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的影响

目的:观察5-氮胞苷(5-aza)对脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向心肌样细胞诱导分化的影响。方法:对第3代细胞以10μmol/L 5-aza诱导作用24 h后,用含体积分数5%胎牛血清的完全培养基继续培养,镜下观察细胞形态学变化。RT-PCR检测NKX2.5、GATA4及cTnI基因mRNA表达,免疫组化法检测cTnI蛋白表达。结果:5-aza作用7 d后ADMSCs形态及排列开始发生变化,RT-PCR产物条带见NKX2.5、GATA4基因的表达。4周后见极个别细胞出现细微搏动,免疫细胞化学显示cTnI阳性,RT-PCR产物条带见cTnI基因表达。结论:5-aza可以诱导ADMSCs向自发搏动的心肌样细胞分化。

Rho激酶抑制剂对急性冠脉综合征患者MCP-1、hs-CRP和MMP-2水平的影响

目的:观察法舒地尔对急性冠脉综合征(ACS)患者外周血MCP-1、hs-CRP和MMP-2水平的影响,探讨Rho激酶抑制剂对ACS患者斑块的稳定作用。方法:选择未行介入治疗的ACS患者82例,稳定型心绞痛(SAP)患者20例及正常对照组20例。ACS患者随机分为常规治疗组和法舒地尔治疗组,治疗14 d,比较各组及ACS患者治疗前、后外周血MCP-1、hsCRP和MMP-2水平的差异。结果:ACS组患者MCP-1、hs-CRP及MMP-2水平明显高于SAP组及正常对照组(P<0.01);ACS患者治疗14 d后,同常规治疗组相比,法舒地尔组MCP-1、hs-CRP及MMP-2水平显著降低(P<0.01)。结论:法舒地尔能够降低ACS患者血MCP-1、hs-CRP及MMP-2水平,发挥稳定粥样斑块的作用。

法舒地尔对老年慢性充血性心衰患者心功能及脑钠肽的影响

目的探讨Rho激酶(ROCK)抑制剂法舒地尔对老年慢性充血性心力衰竭(CHF)患者心功能及脑钠肽(BNP)水平的影响。方法将120例NYHA心功能Ⅲ～Ⅳ级的老年患者分为两组:(1)对照组60例给予常规抗心衰治疗(强心剂、利尿剂、β-受体阻滞剂及ACEI/ARB等);(2)治疗组60例在对照组常规抗心衰治疗基础上加用法舒地尔静脉滴注,两组患者均治疗14 d,观察治疗前、后6 min步行距离、左室射血分数(LVEF)及血浆BNP水平的变化。结果治疗14 d后,同常规抗心衰治疗组相比,加用法舒地尔组患者临床有效率、6min步行距离及LVEF明显提高,BNP显著降低(P<0.05)。结论法舒地尔结合常规抗心衰治疗能够明显改善老年CHF患者的临床症状及心功能指标,疗效优于单纯常规药物治疗。

5-氮胞苷诱导脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化的毒理遗传学研究

目的:观察5-氮胞苷(5-aza)对成人脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向心肌细胞方向诱导分化的毒理遗传学影响.方法:自成人脂肪组织中分离培养ADMSCs,用5-aza对ADMSCs进行诱导,设立不同诱导浓度的I,II,III,(5,10,20μmol/L)组及对照组IV,光镜下观察细胞的生长情况及形态学变化,免疫细胞化学方法检测心肌特异性肌钙蛋白I(cT-nI),RT-PCR方法检测cTnI基因的表达,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,并对各诱导组常规核型分析.结果:诱导后4wk I,II,III组ADMSCs呈现类似心肌细胞的形态学特征.I,II,III组免疫组化结果见cTnI阳性表达,RT-PCR条带见cTnI基因表达.各组染色体结构及数目均未见异常.结论:5-aza作为诱导剂对ADMSCs遗传性无不良影响.

左心室大小和术后收缩压变化与心脏再同步化治疗疗效的关系

目的:观察左心室(LV)大小和术后急性期收缩压(SBP)变化对心脏再同步化治疗(CRT)疗效的影响。方法:分别于术前及术后6个月评估21例CRT患者的心功能及超声参数。至术后6个月时,NYHA至少下降1级,左室收缩末容积(LVESV)至少降低10%的为CRT反应较好组,余为反应较差组。结果:术后6个月时,反应较好组和其基线期相比左室射血分数(LVEF)显著升高[(32±9)%vs.(45±10)%,P<0.05)]、左室舒张末容积(LVEDV)显著降低[(237±54)ml vs.(151±45)ml,P<0.05]、左室舒张末内径(LVEDD)显著降低[(68±8)mmvs.(55±6)mm,P<0.05]、左室收缩末容积(LVESV)显著降低[(165±46)ml vs.(84±31)ml,P=0.01]、NYHA的分级由术前6/8(III/IV)降至术后11/3(II/III);反应较差组和术前相比有所改善,未达到统计学意义。反应较好组术后7d SBP均显著升高(P<0.05),反应较差组下降。结论:心力衰竭患者CRT治疗反应较好与治疗前左心室较小和术后急性期SBP升高有关联性。

培养基血清浓度对5-氮胞苷诱导脂肪间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的影响

目的观察脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向心肌样细胞诱导分化的适宜培养基血清浓度。方法采用Ⅰ型胶原酶消化法自成人脂肪组织分离ADMSCs进行培养。对第3代细胞以10μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)诱导作用24h,用含10%、5%胎牛血清的完全培养基继续培养,镜下观察细胞形态学变化,采用免疫细胞化学染色鉴定心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI),计算心肌细胞转化率,采用RT-PCR方法检测NKX2.5、GATA4及cTnI基因表达。结果5-aza诱导ADMSCs后7 d细胞形态及排列开始发生变化,4周后可见极个别细胞出现细微搏动,10%、5%胎牛血清培养下心肌样细胞转化率分别为31.5%±4.2%、32.8%±5.0%,P=0.72;RT-PCR产物条带见NKX2.5、GATA4及cTnI基因表达。结论ADMSCs在5-aza诱导后于低浓度血清培养基中培养效果更好。

前列地尔对急性ST段抬高型心肌梗死PCI术后心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的分析前列地尔对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)PCI术后心肌缺血再灌注损伤的保护效果及作用机制。方法回顾性分析2016年1月-2017年2月兰州军区总医院心血管内科治疗急性ST段抬高型心肌梗死患者116例临床资料,采用前列地尔+常规治疗59例作为观察组,常规治疗57例作为对照组,比较2组患者治疗前后的心电图ST段回落情况,左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD),检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌钙蛋白(cTNI)等心肌酶的浓度变化以及超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素-1(IL-1)等炎性因子的浓度变化。结果观察组术后4 h、12 h、24 h心电图ST段恢复幅度明显高于对照组(t/P=12.832/0.025、31.674/0.013、53.392/0.008),术后14 d观察组LVEF、LVEDD、LVESD与对照组比较差异有统计学意义(t/P=7.536/0.041、6.958/0.043、6.483/0.046);术后24 h观察组CK-MB、LDH、和cTnI浓度低于对照组(t/P=8.693/0.032、7.325/0.041、7.358/0.042);观察组PCI术后hs-CRP、IL-6、TNF-α及IL-1浓度低于对照组(t/P=7.635/0.035、6.328/0.031、5.693/0.046、5.398/0.046)。结论前列地尔可以通过抑制急性ST段抬高型心肌梗死PCI术后体内炎性因子浓度,从而保护心肌缺血再灌注损伤后的心肌细胞,恢复其心脏功能,值得推广应用。

氯吡格雷联合替罗非班用于STEMI患者PCI术后的抗血小板治疗及对血清炎症因子的影响

目的分析氯吡格雷联合替罗非班用于急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后的抗血小板治疗及对血清炎症因子的影响。方法回顾性分析2016年5月至2017年5月在西安市国际医学中心医院心内科治疗的127例STEMI患者资料,将其中采用氯吡格雷抗凝的患者63例作为对照组,采用氯吡格雷联合替罗非班抗凝的64例作为观察组,所有患者入院后均给予常规基础治疗,对照组在上述治疗基础上术前给予氯吡格雷300mg,口服,术后继续维持治疗;观察组在对照组基础上给予术中静脉推注替罗非班,维持用药36h,术后继续口服氯吡格雷维持。观察两组患者的抗血小板治疗效果及对血清炎症因子的影响。结果两组患者PCI术前心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流分级经比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者PCI术后TIMI血流分级明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者PCI术前血小板黏附率及血小板聚集率差异无统计学意义(P>0.05);两组患者PCI术后血小板黏附率及血小板聚集率与术前比较均明显降低(P<0.05),且观察组明显优于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后血清中C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组降低更加明显(P<0.05);所有患者出院1个月后均定期门诊随访行心脏彩超检查,观察组左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)与对照组比较均明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);观察组住院期间及出院后1个月内心脑血管不良反应事件发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯吡格雷联合替罗非班术后可以明显抑制血小板功能,改善心肌再灌注和心功能,减少严重心脑血管不良反应事件的发生,值得推广应用。

让学生爱上写作

学生的写作能力与生活、阅读是紧密相连的。生活是作文的材料来源，阅读是作文的语言来源，不断增加语言和材料的储备，才能写好文章，才能让三者相辅相成。那么，怎么才能让学生爱上写作呢？

右美托咪定对心肌收缩蛋白表达的影响

目的研究右美托咪定(DEX)对心肌细胞收缩相关蛋白表达的影响及其分子机制。方法在50 ml/L浓度氧环境下培养H9C2细胞,建立心肌低氧损伤模型。实验分为对照组、低氧组、低氧+DEX(0.01μmol/ml、1μmol/ml、100μmol/ml)组。除对照组培养在正常细胞环境中外,其余四组培养在低氧环境下,且其中三组按要求添加相应浓度的DEX。细胞存活率和细胞凋亡水平分别采用MTT法和流式细胞仪进行检测,采用ELISA试剂盒检测细胞培养液中心肌酶谱蛋白cTnI、LDH和CK-MB的漏出量,Western blot法检测H9C2细胞中titin、β-MHC、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白表达。结果低氧条件成功诱导心肌细胞缺氧损伤。低氧组细胞较对照组存活率低、凋亡增加、细胞培养液中cTnI、LDH和CK-MB蛋白水平增加;低氧+DEX(0.01μmol/ml、1μmol/ml、100μmol/ml)组较低氧组,细胞存活率增加、凋亡减少,cTnI、LDH和CK-MB蛋白水平降低,p-PI3K和p-Akt蛋白表达增加,β-MHC和titin蛋白表达降低,且随着DEX剂量增加,变化更显著。结论在低氧损伤心肌细胞中,DEX能抑制收缩相关蛋白表达,可能与PI3K/Akt信号通路有关,是否与激活PI3K/Akt信号通络相关,还有待进一步研究。

冠心病患者外周血肝细胞生长因子水平及内皮祖细胞数量检测及意义

目的:探讨冠心病患者外周血中肝细胞生长因子浓度与CD133+内皮祖细胞数目的关系及临床意义。方法:30例冠心病患者(冠心病组)与30例非冠心病患者(非冠心病组),采用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,以FITC-鼠抗人CD133标记,流式细胞仪检测其CD133+细胞数目;用ELISA法检测血浆中肝细胞生长因子浓度。结果:与非冠心病组比较,冠心病组外周血中CD133+细胞数目少,血浆中肝细胞生长因子浓度高,差异均有统计学意义(P<0.01)。冠心病患者外周血中CD133+细胞数量与肝细胞生长因子浓度呈负相关。结论:检测外周血中CD133+细胞和血浆中肝细胞生长因子浓度,有望成为诊断冠心病的辅助检查。

谷氨酰胺与缬沙坦对大鼠心房纤维化及缝隙连接蛋白43重构的影响

目的研究谷氨酰胺（Gln）与缬沙坦对大鼠心房纤维化及缝隙连接蛋白43（Cx43）重构的影响及其可能的作用机制。方法将SD雄性大鼠（160±20）g32只随机等分为对照组（A组）、盐酸异丙肾上腺素（ISO）（5mg·kg^-1·d^-1）（B组）、ISO（5mg·kg^-1·d^-1）＋丙氨酰谷酰胺注射液（Ala—Gln）（0．75mg·kg^-1·d^-1）（C组）和ISO（5mg·kg^-1·d^-1）＋缬沙坦（30mg·kg^-1·d^-1）（D组）。各组1次／d给予相关试剂，ISO连续给药7d，而后C、D两组大鼠继续给予相关试剂至28d后处死。心肌组织中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量采用放免法检测；通过H—E染色观察心肌纤维化情况；Masson染色计算胶原容积分数（CVF）并作为心肌纤维化程度的量化指标；免疫组化SP法半定量测定心肌组织中热休克蛋白70（HSP70）、磷酸化c—Jun氨基末端激酶1／2／3（p-JNK1／2／3）、c-Jun及Cx43蛋白的表达。结果AngⅡ在B、C、D组中含量较A组显著升高且差异有统计学意义（P〈0．01）；B组与A、C、D组相比出现明显的心房纤维化（P〈0．01）且心肌组织中p-JNK1／2／3和c—Jun的含量较高，差异有统计学意义（P〈0．01），C、D组与A组相比心房纤维化程度及心肌组织中p-JNK1／2／3和c—Jun的含量差异无统计学意义（P〉0．05）；与其他各组相比，C组中HSP70的含量明显升高，且差异有统计学意义（P〈0．01），A、B、D组中HSP70的含量相互间差异均无统计学意义（P〉0．05）；B组中Cx43含量较A组减少（P〈0．01）且分布无规律性，侧面化分布相对增多。而C、D组中Cx43含量与A组比较差异无统计学意义（P〉0．05）且部分呈线性分布于心肌细胞闰盘处；C、D两组中Cx43含量比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论谷氨酰胺与缬沙坦均可减轻AngⅡ诱发的大鼠心房纤维化及Cx43重构，其机制可能与降低p-JNK1／2／3和c—Jun的表达，抑制JNK信号通路的不同位点有关，在改善大鼠心房纤维化程度和Cx43重构方面起到类似的作用。