盐酸替罗非班引起严重血小板减少1例报道

盐酸替罗非班是一种静脉注射的非肽酪氨酸衍生物,可以竞争性抑制血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体,从而达到抑制血小板聚集的作用。相比于抑制环氧合酶和血栓素A 2合成的阿司匹林和抑制血小板二磷酸腺苷受体的噻吩吡啶类抗血小板药物,替罗非班直接作用于抗血小板药物的最终通路Ⅱb/Ⅲa受体,具有更强的抗血小板作用,常用于经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)。

心脏磁共振在冠状动脉微循环障碍评估中的应用进展

冠状动脉微循环障碍指冠状动脉微循环的结构或功能异常所导致的冠状动脉血流储备降低,其是未来发生不良心血管事件的强预测因子.冠状动脉微循环结构和功能的完整性对于存活心肌的恢复和防止永久性损伤具有重要的作用.心脏磁共振近来被认为是无创评估心肌微循环功能的金标准,其无辐射、无衰减,具有良好的空间分别率及动态追踪对比剂分布的特点,有很好的发展潜力.

从心电图和超声心动图相关性分析研究心肌梗死后心衰模型的早期评价和筛选方法

目的建立大鼠心肌梗死后心力衰竭动物模型早期评价和筛选新方法,为药物干预研究的早期随机分组提供依据。方法SD大鼠随机分为模型组和假手术组。结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,假手术组在相同位点,只穿线不结扎。两组分别于术后第2天、第10天和第60天进行12导联心电图(ECG)检测;术后第10天和60天,采用小动物超声仪进行心功能检测。分别对不同时间点的心电图病理性Q波与左室射血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS)进行相关性分析。结果模型组大鼠术后第2天、第10天以及第60天心电图病理性Q波个数与超声心动图EF和FS值存在显著的负相关性。若EF<50%,病理性Q波分布于V3~V6、Ⅰ、aVL兼有V1或V2;若EF<30%,除上述导联外,由于镜像效应出现下壁Ⅱ、Ⅲ、aVF中单一或多个导联的病理性Q波。应用第2天ECG病理性Q波进行心肌梗死后心衰动物模型早期筛选的特异性为100.0%,敏感性为95.0%,准确性为96.7%。结论心肌梗死后心力衰竭动物模型不同时间点的ECG病理性Q波个数与EF和FS值存在显著的负相关性,可用于动物模型的早期评价和筛选。此方法操作简单易行,效果理想,为药理实验的早期评价和随机分组提供了重要和可靠的实验依据。

氨基酸类神经递质与认知活动关系及中医药应用的研究进展

脑内氨基酸是中枢神经系统内重要的神经递质,其通过对神经元兴奋性和抑制性的控制在认知活动过程中发挥着举足轻重的作用。本文综述了兴奋性氨基酸神经递质谷氨酸和天门冬氨酸及其受体,抑制性氨基酸γ-氨基丁酸和受体,以及牛磺酸在认知活动中的最新进展;综述了填精补髓、健脾补肾、益气活血化瘀涤痰、芳香开窍、宁脑安神等不同治则的中药通过调节脑内氨基酸类神经递质的含量或受体的活化程度,从而改善认知功能和减轻脑病变后损伤。全面认识中医药对氨基酸类神经递质的影响将有益于认知障碍类疾病的防治。

血管外膜成纤维细胞在动脉粥样硬化及PCI后再狭窄中的作用

血管外膜是动脉粥样硬化(AS)和经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后再狭窄等血管重构疾病的"积极参与者"。血管外膜不仅发挥简单的支持血管、提供营养物质的作用,越来越多的研究表明,外膜还主动参与了AS和PCI后再狭窄的病理过程。作为血管外膜最重要的组成部分,外膜成纤维细胞(AF)通过活化、增殖、迁移,分泌细胞因子和细胞外基质导致血管外膜和内膜的增厚和管腔狭窄。另外,AF活化后还通过参与一氧化氮的调节、氧化应激和炎症反应等促进AS和PCI后再狭窄的形成。

BMP-2表达上调剂的筛选及其抗骨质疏松活性研究

目的筛选上调骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达的新型小分子活性化合物，为研发抗骨质疏松药物提供先导化合物。方法应用国家新药（微生物）筛选实验室前期建立的BMP-2表达上调剂的高通量筛选模型，对化合物库中10000余个化合物进行筛选，以染料木素作为阳性对照；应用实时定量 PCR 和 Western blot 方法检测活性化合物对 U-2OS 细胞 BMP-2 mRNA 和蛋白表达水平的影响。在mRNA 水平考察了活性化合物对 Runx2表达的影响， Western blot 法检测活性化合物对 Smad1/5/8蛋白磷酸化水平的影响；用 PNPP 法检测碱性磷酸酶活性，验证活性化合物体外促进成骨细胞分化的作用。结果在 BMP-2表达上调剂模型细胞上筛选得到活性化合物 E19773，其在模型细胞上的 EC50为46.2μmol/L；实时定量 PCR 结果显示，化合物 E19773能够提高 U-2OS细胞 BMP-2和 Runx2的 mRNA 表达水平；Western blot结果显示，Smad1/5/8蛋白磷酸化水平明显升高；碱性磷酸酶结果表明 E19773能够在体外促进成骨细胞的分化。结论化合物 E19773在0.75~50μmol/L 浓度范围内能明显上调 BMP-2的表达，主要通过 Smads 通路来调控细胞成骨分化，是活性较好的 BMP-2上调剂。

重组蛋白AdipoR1-EGFP真核表达质粒的构建和表达

目的构建重组pEGFP-N1-AdipoR1真核表达质粒并于HEK293T细胞中瞬时表达。方法提取HepG2细胞总RNA,逆转录合成cDNA,以其为模板,PCR扩增AdipoR1基因,将其插入到pEGFP-N1质粒中,构建重组真核表达质粒pEGFP-N1-AdipoR1,通过脂质体法转染HEK293T细胞,采用酶标仪测定荧光强度,Western blot方法鉴定融合蛋白Adipo R1-EGFP的表达情况。结果 Western blot结果显示,融合蛋白AdipoR1-EGFP在分子量约70 kD处可见明显的目的条带;同时,与未转染质粒的空白对照组相比,转染pEGFP-N1和pEGFP-N1-AdipoR1的细胞中荧光强度都有明显升高,表明融合蛋白AdipoR1-EGFP在HEK293T细胞中成功表达,并且EGFP的荧光强度测定能很好地反映细胞中融合蛋白的表达水平。结论构建并表达AdipoR1-EGFP融合蛋白,所采用的EGFP融合蛋白表达方法简单高效,重复性好,为今后AdipoR1蛋白的表达及功能研究提供了重要参考。

中医学类大学生最关心的十个问题的调查研究

目前关于中医学类专业具体一些情况的调查较少,尤其是对于中医学类大学生自身需求的调查较少。我们在天津地区对以天津中医药大学为代表的中医学类专业大学生的情况进行了调查,从而掌握中医学类专业大学生的一些现状,深入其中发现其在就业、心理、学习、感情、人际关系等方面存在的问题。借此为大学生的教育提供相关资料,以进一步提高大学生的人才质量。

益气活血解毒方对血管损伤后外膜早期炎症和血管重构的影响

目的观察球囊损伤血管内膜后外膜早期炎症和血管重构的变化及益气活血解毒方对其的影响。方法实验采用球囊导管拉伤大鼠左侧颈总动脉内膜模型,造模动物随机分为模型组、阿托伐他汀组、血府逐瘀组和益气活血解毒组,另以假手术组作对照。灌胃给药7 d后取材,行HE染色,观察血管壁各层面积和厚度的变化,免疫组织化学染色,观察血管壁各层单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及巨噬细胞特异性标志物CD68表达的变化。结果与假手术组比较,模型组血管内膜面积明显增大(P<0.01),外膜变厚(P<0.05),管腔变化不明显,CD68的含量显著升高(P<0.05)。与模型组相比,益气活血解毒方明显减少血管内膜的面积(P<0.05),降低CD68的含量(P<0.01)。与血府逐瘀组相比,益气活血解毒组外膜厚度明显降低(P<0.05)。结论球囊损伤大鼠颈总动脉早期,血管以正性重构为主,外膜增厚和炎症反应明显;益气活血解毒方能有效改善血管重构,可能与其能降低巨噬细胞浸润,抑制外膜炎症反应有关。

不同来源白细胞微粒诱导巨噬细胞极化的比较研究

目的探讨不同来源的白细胞微粒对于巨噬细胞亚型M1和M2的影响。方法诱导人单核细胞系(THP-1)细胞为巨噬细胞及泡沫细胞,提取巨噬细胞微粒(M-MPs)与泡沫细胞微粒(FC-MPs),将两种微粒分别加入巨噬细胞中。通过流式细胞仪观察微粒的大小;利用激光共聚焦显微镜观察微粒与巨噬细胞的结合状态;最后通过流式细胞仪检测M-MPs与FC-MPs分别诱导巨噬细胞后M1和M2亚型百分比。结果在细胞数相同的条件下,泡沫细胞产生的微粒数明显增多,大约是巨噬细胞产生微粒数的2倍(P<0.05)。镜下可见,两种微粒均与巨噬细胞接触或进入巨噬细胞内。与对照组相比,M-MPs与FC-MPs均可导致巨噬细胞向M1亚型极化;高浓度FC-MPs可显著抑制巨噬细胞向M2型极化,且M1/M2比值明显高于对照组,而M-MPs有降低M2亚型和M1/M2比值的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论两种微粒均能与巨噬细胞结合,将巨噬细胞向促炎性转化,进一步促进炎症反应。相同条件下,泡沫细胞能够比巨噬细胞产生更多的FC-MPs,后者明显抑制巨噬细胞向抗炎型极化,加重促炎/抗炎的失衡。

巨噬细胞极化及其衍生微粒在动脉粥样硬化中的作用

巨噬细胞作为动脉粥样硬化(AS)斑块中最主要的炎性细胞,与动脉粥样硬化发展及斑块稳定性密切相关。微粒作为细胞间信息传递的载体,不仅参与诱导巨噬细胞的极化,还参与动脉粥样硬化发展的各个病理环节。现就动脉粥样硬化中巨噬细胞亚型及其衍生微粒的作用进行综述,以期为防治动脉粥样硬化提供新的研究思路和干预靶点。

流感与心血管事件关系的研究进展

流感病毒不仅会引起呼吸困难和低氧血症为特征的肺部疾病,还会增加心血管事件的发生率和病死率。虽然接种流感疫苗已被推荐作为心血管疾病的二级预防措施,但目前流感对心血管系统的作用机制尚不明确,疫苗在预防心血管事件方面的获益证据不充分。因此,本文将对流感与心血管事件的研究进展进行综述。

大黄牡丹汤在异位妊娠保守治疗中的应用

大黄牡丹汤出自《金匮要略·疮痈肠痈浸淫病脉证并治》,载有“肠痈者,少腹肿痞,按之即痛如淋,小便自调,时时发热,自汗出……脉洪数者,脓已成,不可下也,大黄牡丹汤主之”.该方由大黄（四两）、牡丹皮（一两）、桃仁（五十个）、瓜子（半升）、芒硝（三合）5味药物组成,古人专为“肠痈初起”而设,具有泻热破瘀、散结消肿的功效.近年来,该方在急腹症如急性胰腺炎[1]、急性阑尾炎[2]、急性胆囊炎[3]、急性盆腔炎[4]等多种具有湿热瘀滞特点疾病的治疗中取得了显著疗效.笔者认为,异位妊娠具有少腹血瘀及湿热阻滞为主的病机特点,大黄牡丹汤既泻热祛湿,又逐瘀散结,在治疗中有比较明显的优势,临床观察亦取得良好疗效.然而,国内外文献对大黄牡丹汤在异位妊娠保守治疗中的应用鲜有报道,笔者结合临床验案从中医基本理论和现代医学研究两方面就其治疗异位妊娠的机理作简要分析.

细胞外囊泡在心血管疾病中的研究进展

细胞外囊泡是由细胞分泌的含有蛋白质、脂质和核酸等膜性小囊泡,参与多种疾病的病理生理进程,具有细胞间通讯功能。通过介绍细胞外囊泡分类和作用方式、细胞外囊泡作用,尤其是在心血管疾病中不同来源外泌体所含microRNA的作用特点、不同来源微粒的特异性蛋白及其病理生理作用、细胞外囊泡在心血管疾病诊断和治疗中的应用和存在问题,综述细胞外囊泡与心血管疾病的关系,以期为细胞外囊泡的深入研究和临床应用提供思路。

BMP2表达上调剂E40071体外抗骨质疏松活性研究

骨形态发生蛋白II(bone morphogenetic protein 2,BMP2)在骨发育与重建中具有重要作用,本研究利用前期已构建的BMP2表达上调剂高通量筛选模型对20 000个化合物进行了筛选,得到阳性化合物E40071[2-(4-(5-甲基-3-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)哌嗪-1-基)乙-1-醇],其EC50值为2.73μmol·L-1。体外活性研究表明,E40071能上调BMP2及其下游特异性转录因子Runx2、Osx的m RNA表达,并通过促进Smad1/5/8蛋白磷酸化,上调Runx2蛋白的表达;对成骨细胞碱性磷酸酶活性具有一定的上调作用;茜素红染色结果表明,E40071能够促进成骨细胞钙化。进一步研究发现,E40071能够明显抑制RANKL诱导小鼠巨噬细胞Raw264.7分化为破骨细胞,并降低破骨细胞分化标志MMP9和NFATc1蛋白的表达水平。研究结果表明,E40071可促进成骨细胞骨形成活性并抑制破骨细胞的分化。

“心主神明”的内涵及现代科学依据

"心主神明"理论是中医学的重要基础理论,贯穿于中医的理法方药并指导临床实践。本文首先回顾了"心主神明"的渊源和内涵;重点阐述了"心主神明"的现代科学依据,认为心脏的泵血功能是大脑功能正常的重要基础,心脏的内分泌功能与脑的功能密切相关,心血管疾病常导致患者认知功能障碍和情绪的焦虑抑郁,并有现代物理学和心脏移植的佐证;最后说明"心主神明"理论在临床实践中运用的有效性。"心主神明"的理论和科学依据提示,西医学的心脏功能与大脑的功能密切相关,我们应努力挖掘并进行深入的科学研究,以全面阐明"心主神明"的科学内涵。

小檗碱对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响及机制研究

本文旨在高脂喂养的ApoE^(-/-)小鼠模型中研究小檗碱(berberine, BBR)抗动脉粥样硬化的作用及可能的作用机制,为BBR的临床研究打下基础。将7周龄的雄性ApoE^(-/-)小鼠,随机分为对照组(普通饲料)、模型组、BBR组(BBR-L:50 mg·kg^(-1)、BBR-H:150 mg·kg^(-1))、阿托伐他汀组(5 mg·kg^(-1))。高脂饲料喂养ApoE^(-/-)小鼠12周建立实验性高脂血症动物模型,同时给予不同剂量的BBR。12周后,分离主动脉进行油红染色,统计各组ApoE^(-/-)小鼠主动脉斑块情况;采用悬液芯片试剂盒检测血清中炎症因子水平;应用试剂盒测定肝脏总胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸的含量, Western blot方法检测肝脏中炎症信号通路相关蛋白以及胆固醇转运相关基因的表达情况。所有动物实验均按照医药生物技术研究所实验室动物管理条例进行。结果表明,与模型组相比, BBR可以显著降低主动脉全长中的斑块面积,抑制血清中促炎性因子IL-1β等的表达,减少肝脏中总胆固醇等的聚积;机制研究结果显示, BBR能显著抑制MAPKs和NF-κB信号通路的活化,显著上调胆固醇代谢调节蛋白LDLR、ABCA1等的表达。总之,BBR能显著抑制高脂饮食喂养的ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的形成,其作用机制与抑制炎症和降低胆固醇的聚积有关。

豁痰解毒通络饮通过抑制eNOS解耦联途径减轻兔早期动脉粥样硬化

为研究豁痰解毒通络饮(HTJDTL)对兔早期动脉粥样硬化(AS)模型的疗效,探讨其是否通过抑制四氢生物蝶呤(BH4)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)解耦联/活性氧簇(ROS)途径抗AS,将24只日本大耳白兔随机分为假手术组、模型组、豁痰解毒通络饮组、阿托伐他汀组,采用高脂饲料+氮气干燥术+颈总动脉球囊损伤术建立兔早期动脉粥样硬化模型,球囊损伤术后7 d取材。取损伤侧颈总动脉进行HE染色观察病理形态,过氧化物酶法检测血脂四项,免疫印迹法检测血管eNOS二聚体和单聚体的比值,酶联免疫吸附试验检测血清BH4水平,生化法检测血清ROS水平。结果显示,与假手术组相比,模型组损伤侧颈总动脉管腔轻度狭窄,内膜不均匀增生,内膜和中膜有脂质沉积,外膜增生明显伴炎细胞浸润;豁痰解毒通络饮组内膜增生较模型组明显减少,中膜脂质沉积明显减轻,外膜炎细胞浸润较少。与假手术组比较,模型组的血脂五项显著升高,BH4明显降低,eNOS二聚体/单聚体的比值显著下降,ROS明显升高;与模型组比较,豁痰解毒通络饮显著降低TC及ox-LDL水平,有升高BH4趋势,但差异无统计学意义;同时显著上调eNOS二聚体/单体比值;明显降低ROS水平。结果表明,豁痰解毒通络饮可明显改善兔早期动脉粥样硬化模型的血管重构,对AS具有防治作用,其机制可能与抑制BH4/eNOS解耦联,减少氧化应激有关。

E23869体外对脂代谢的调节作用及机制研究

探讨化合物E23869体外对脂代谢的作用及其机制。本研究利用前期已建立的人ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)和清道夫受体B型I(scavenger receptor class B type I,SR-BI/CLA-1)表达上调剂筛选模型,对20 000个化合物进行筛选,获得能上调ABCA1和CLA-1表达的化合物E23869,其上调活性分别为196%和198%,EC50值分别为0.25和0.66μmol·L-1;Western blotting实验结果表明,在RAW264.7和L02细胞中,活性化合物E23869均能显著上调ABCA1、SR-BI/CLA-1及ATP结合盒转运体G1(ATP-binding cassette transporter G1,ABCG1)的蛋白水平;体外功能实验证实,E23869能有效地抑制巨噬细胞泡沫化和促进细胞内胆固醇外排。进一步研究表明,化合物E23869能通过部分激活PPARα和PPARγ从而上调ABCA1、SR-BI/CLA-1和ABCG1的表达,并且对前脂肪细胞3T3-L1诱导分化的作用较弱。总之,化合物E23869能够上调ABCA1和SR-BI/CLA-1活性,并且具有较好的体外调节脂代谢的作用,为新型调血脂药物的先导化合物。

吴茱萸次碱抗骨质疏松作用研究

骨保护素(osteoprotegerin,OPG)是骨转换的标志物,由成骨细胞等分泌。OPG与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)结合发挥抑制破骨细胞作用。本研究发现吴茱萸次碱(rutaecarpine,RUT)具有上调OPG表达的活性,并能显著增加小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1及人骨肉瘤细胞U-2OS中OPG的蛋白水平。钙化结节染色实验结果表明,RUT显著促进MC3T3-E1细胞向成骨细胞分化;抗酒石酸磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色结果表明,RUT显著抑制RANKL诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7向破骨分化。体内研究发现,与卵巢去势(ovariectomized,OVX)大鼠模型组相比,RUT低剂量组(5 mg·kg^(-1)·day^(-1))和高剂量组(45 mg·kg^(-1)·day^(-1))灌胃给药3个月,显著增加OVX大鼠骨密度;钙黄绿素双标实验及甲苯胺蓝染色实验结果表明,RUT低剂量组在体内促进骨形成并减少骨量丢失;免疫组化结果显示RUT低剂量组能够增加大鼠股骨中OPG的表达。动物福利和实验过程均遵循中国医学科学院医药生物技术研究所动物伦理委员会的规定。综上,本研究表明RUT能上调OPG表达并在体内外促进成骨分化和抑制破骨分化。