基于UPLC-Q-Orbitrap-MS对铁皮石斛水提物不同极性溶剂萃取物化学成分分析

目的建立超高效液相色谱串联—四极杆—静电场轨道阱质谱技术(ultra-performance liquid chromatography-linear ion trap quadrupole-Orbitrap-mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap-MS)对铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura&Migo)水提物石油醚、乙酸乙酯、正丁醇3种萃取组分进行定性表征的方法。方法提取铁皮石斛水提物并依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,旋蒸浓缩后,得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取组分。样品经UPLC-Q-Orbitrap-MS分析,根据元素组成、分子量、质荷比、离子碎片等确定化合物信息并推导裂解规律,通过与文献、MzCloud、MzVault、PudChem、本地数据库比对确定鉴定结果。结果在正负离子模式下共鉴定出化合物62种,包括黄酮类成分20种,联苄类成分6种,羧酸及其衍生物6种,脂肪酸及其衍生物6种,酚类成分4种,氨基酸及其衍生物3种,糖类成分2种,生物碱类、苯丙素、蒽醌、萜类化合物各1种,其他类成分3种,还检测到8种含量较高、质谱信号较强的未知成分。其中水提石油醚萃取物中鉴定出化合物7种,乙酸乙酯萃取物中鉴定出化合物36种,正丁醇萃取物中鉴定出化合物48种。通过与文献比对,62种化合物中有7种化合物为首次从铁皮石斛中提取得到。结论该方法可快速有效分析铁皮石斛中多种化学成分,可为铁皮石斛质量控制及药效物质基础研究提供参考。

霍山石斛对脾阴虚型慢性萎缩性胃炎大鼠免疫功能的影响

目的探讨霍山石斛对脾阴虚型慢性萎缩性胃炎大鼠免疫功能的影响。方法将36只SD大鼠随机分为正常组,模型组,霍山石斛低、中、高剂量组,每组6只,通过灌服N-甲基-N-硝基-亚硝基胍复合温热药(附子、干姜、肉桂)及劳倦法建立脾阴虚型慢性萎缩性胃炎大鼠模型。霍山石斛低、中、高剂量组大鼠分别按0.7、1.4、2.8 g/kg灌胃霍山石斛水悬液,正常组和模型组大鼠灌胃等容积生理盐水,持续灌胃21 d。比较各组大鼠的活动情况,体质量变化,脾脏指数和胸腺指数变化,脾脏组织形态学变化,外周血T淋巴细胞亚群、白细胞计数和分类,血清中免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG),以及血清和胃黏膜组织中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平。结果各给药组大鼠脾脏指数和胸腺指数均显著上升(P<0.05);脾脏组织病理状态改善;血清IgA、IgM、IgG水平显著上升(P<0.05);血清和胃黏膜组织IL-2、TNF-γ水平均有不同程度的升高(P<0.05),IL-4和IL-10水平均有不同程度下降(P<0.05)。此外,霍山石斛可提高大鼠外周血白细胞计数、淋巴细胞计数和中性粒细胞计数(P<0.05);能上调外周血中CD3+T淋巴细胞水平、CD4+T淋巴细胞水平、CD4+/CD8+,下调CD8+T淋巴细胞水平(P<0.05)。结论霍山石斛可提高脾阴虚型慢性萎缩性胃炎大鼠的免疫功能。

桃红四物汤活血化瘀作用的实验研究

目的:探讨桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,TSD)的活血化瘀作用。方法:采用电刺激血栓形成法测定体内血栓形成时间(occlusive thrombus formation time,OT);采用毛细血管法和玻片法测定凝血时间(clotting time,CT);建立血瘀模型,测定血瘀大鼠全血、血浆和血清比黏度。结果:TSD能显著延长大鼠OT及CT,能显著降低血瘀大鼠的全血比黏度、血浆比黏度及血清比黏度。结论:TSD具有较好的活血化瘀作用。

四物汤对血管性痴呆大鼠的神经保护作用及其机制研究

目的探讨四物汤对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠的保护作用及其机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组,模型组,四物汤高剂量(6g/kg)、低剂量(3g/kg)组,尼莫地平组(20mg/kg),每组12只。采用大脑中动脉阻塞再灌注法复制大鼠VD模型,术后连续给予相应药物14d。采用水迷宫实验观察VD大鼠学习能力和记忆能力;酶联免疫吸附法测定海马组织中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)、5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的含量。腹主动脉取血检测血液流变学指标。苏木精-伊红染色观察海马CA1区神经细胞形态学变化。结果与模型组比较,四物汤高剂量组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),在目标象限距离百分比显著增加(P<0.05),海马AChE、ET-1含量显著降低(P<0.05),5-HT、VEGF含量显著升高(P<0.05),全血黏度、血浆黏度和红细胞聚集指数显著降低(P<0.05)。四物汤高、低剂量组比较,仅血浆黏度和红细胞聚集指数的差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,四物汤组海马CA1区锥体细胞缺失减轻,神经纤维排列整齐,仅少数细胞核固缩。结论四物汤对VD具有一定的改善作用,其机制与改善神经递质,调节海马ET-1、VEGF含量,改善血流状态有关。

桃红四物汤抗血栓形成作用研究

目的探讨桃红四物汤的抗血栓作用。方法采用Chandler环血栓形成法测定体外血栓的湿质量、干质量和血栓长度,采用大鼠下腔静脉结扎血栓形成法观察静脉血栓湿质量及干质量,采用二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)和肾上腺素致肺栓塞实验模型观察小鼠肺栓塞时间。结果桃红四物汤能显著降低体外血栓长度、湿质量和干质量,显著降低体内静脉血栓湿质量和干质量,显著缩短静脉注射ADP和肾上腺素所致小鼠肺栓塞时间。结论桃红四物汤具有较好的抗血栓作用,其作用环节可能与抑制血小板聚集有关。

密码子优化的纳豆激酶基因在番茄果实中的瞬时表达

根据植物偏爱密码子设计并人工合成了纳豆激酶基因sNK,在其中插入番茄内含子构成sNKi基因.将这两种基因通过农杆菌渗透法在不同成熟时期的番茄果实中实现了瞬时表达.通过实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)比较两种基因在番茄果实中转录水平的表达量,通过纤维蛋白平板法检测两种基因表达产物的纤溶酶活性.结果表明,两种基因在番茄果实的转色期、成熟期和完熟期均有表达,其中成熟期表达量最高,破色期基本无表达.果实特异性E8启动子调控下的纳豆激酶基因的表达量较组成型35S启动子调控下的该基因表达量明显提高.插入内含子的sNKi基因的表达量高于没有内含子的sNK基因,表明内含子在提高纳豆激酶的表达量方面具有显著的作用.

桃红四物汤含药血清对缺糖缺氧损伤PC12细胞的保护作用

目的探讨桃红四物汤含药血清对缺糖缺氧(oxygen glucose deprivation,OGD)损伤的PC12细胞的保护作用及其机制。方法采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)联合低糖培养基建立体外OGD致PC12细胞损伤模型;分别给予不同浓度的桃红四物汤含药血清,以MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态学变化;检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;观察Hoechst33258染色后的细胞形态学变化;Western blot法检测给药后细胞Caspase-3蛋白的表达。结果与空白血清对照组相比,经OGD损伤后,细胞活力显著降低,桃红四物汤含药血清可减轻PC12细胞形态损伤,显著提高SOD活力,降低MDA和LDH含量,降低Caspase-3蛋白表达;Hoechst 33258染色结果表明桃红四物汤含药血清能降低OGD诱导的细胞凋亡。结论桃红四物汤含药血清对OGD诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,其机制与提高SOD活力和降低MDA含量有关。

耐低温螺旋蓝细菌诱变株的诱变及特性研究

为了获得能适应较低生长温度的菌种,对极大螺旋蓝细菌进行紫外诱变,通过低温筛选获得了生理性状稳定的耐低温诱变株。其中两个诱变株YB01和YB02在10、15和20℃低温条件下生长速率显著高于出发藻株,诱变株的胡萝卜素和不饱和脂肪酸的含量也比出发藻株明显提高,是两株较理想的诱变株。对YB02株的抗低温生理进行研究发现,其光合放氧速率和体内积累的脯氨酸含量明显高于出发藻株。此外,对YB02进行了二次诱变,获得两株在低温条件下生长速率更快的诱变株YB0201和YB0202。

药学类本科生毕业实习精细化管理的改革与实践

安徽中医药大学的药学类人才培养目标是立足地方,培养应用型兼具创新性的高素质药学类人才。其中毕业实习是强化实践能力、创新能力和行业适应性的重要环节。为此,学校对毕业生实习管理采取了全过程、立体化的精细管理模式。文章在明确精细化管理理念的基础上,详细阐述了学校药学类大学生毕业实习精细化管理的实施过程。

基于Nrf2信号通路探讨黄精对自然衰老大鼠睾丸生精功能衰退的保护作用

目的:探讨黄精对自然衰老大鼠睾丸生精功能衰退的保护作用及机制。方法:17月龄SPF级雄性SD大鼠随机分为衰老模型组及黄精低(0.125 g/kg)、高(0.5 g/kg)剂量组,衰老模型组和黄精给药组分别给予普通饲料和含药饲料饲养5月;以5月龄雄性SD大鼠为正常对照组。大鼠称量质量后处死,取出睾丸和附睾并称量质量,计算其脏器指数;采用伊红染色检测附睾中精子活率,血球计数板光镜下计数精子数量并计算精子浓度;HE染色观察睾丸组织形态变化,统计分析生精上皮厚度、生精小管直径及各类生精细胞数目;TUNEL染色检测生精细胞凋亡情况,并计算生精细胞凋亡指数;Western Blot检测睾丸组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2及Nrf2通路相关蛋白Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达;生化试剂盒检测大鼠睾丸组织中Caspase-3、SOD、CAT、GSH-Px、MDA水平;免疫荧光法检测Nrf2在生精细胞中的表达和定位。结果:与模型组比较,黄精可显著升高衰老大鼠睾丸质量及其指数、精子活率、精子浓度。组织病理学检查结果显示,黄精能明显改善衰老大鼠睾丸组织形态,显著增加生精上皮厚度及生精细胞数目,对生精小管直径无明显影响。TUNEL结果显示,黄精可显著减少衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡,降低凋亡指数。Western Blot及免疫荧光结果显示,黄精可显著促进Nrf2核移位,显著上调Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达,显著下调Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达及Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值。生化试剂盒检测结果显示,黄精可显著升高衰老大鼠睾丸组织中SOD、CAT、GSH-Px水平,降低Caspase-3、MDA水平。结论:黄精可通过激活Nrf2信号通路,提高睾丸组织抗氧化能力,进而抑制生精细胞凋亡,减轻自然衰老大鼠睾丸生精功能衰退。

中西医结合治疗宫颈癌腹腔镜术后患者36例

目的:观察在西医常规化疗的基础上采用八珍汤治疗宫颈癌腹腔镜术后患者的临床疗效。方法:将72例患者随机分为观察组、对照组各36例,2组均以伊立替康联合顺铂进行化疗,观察组在化疗期间给予八珍汤加减治疗。观察2组术后3个月时并发症发生情况、复发率、5年生存率及生存质量。结果:尿潴留、淋巴囊肿、神经损伤和泌尿系统损伤等并发症发生率观察组均低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。复发率观察组为11.11%,对照组为19.44%;5年生存率观察组为94.44%,对照组为86.11%。2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。身体状况及负面效应评分2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在西医常规化疗的基础上采用八珍汤治疗宫颈癌腹腔镜术后患者可减少并发症,降低复发率,提高生存质量。

米非司酮配伍米索前列醇用于稽留流产83例临床观察

我院计划生育科自1997年以来,用米非司酮配伍米索前列醇治疗稽留流产83例,方法及疗效满意,现报告如下。 资料与方法 一、资料

手术对卵巢上皮性肿瘤患者细胞免疫功能的影响

目的：分析手术对卵巢上皮性肿瘤患者细胞免疫功能的影响。方法：分析我科2008—03／2010—02住院治疗的卵巢上皮性肿瘤患者52例进行细胞免疫功能检测的临床资料，并与同期体检的36例健康妇女资料对比。结果：治疗组术前术后与对照组比较，CD3细胞数、CD4细胞数、CD4／CD8均有明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；治疗组术后较术前更降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组术前术后的CD8细胞与对照组比较，高低不同，无统计学差异；治疗组术后较术前降低，但差异不显著。治疗组术前术后与对照组比较，NK细胞含量明显下降，差异明显（P〈0．05），治疗组术后较术前降低明显，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：卵巢上皮性肿瘤患者的细胞免疫功能已低下，经缩瘤手术后，短期内细胞免疫功能进一步损害；可指导临床于手术后给予免疫调节剂治疗，使机体恢复细胞免疫力。

腹腔镜下腹膜代阴道和腹腔镜辅助乙状结肠代阴道的对比研究

目的观察比较腹腔镜下腹膜代阴道和腹腔镜辅助乙状结肠代阴道的临床疗效。方法26例先天性无阴道患者随机分为A组和B组各13例,A组采取腹腔镜下腹膜代阴道成形术,B组采取腹腔镜辅助乙状结肠代阴道成形术。结果A组手术时间、术中出血量、术后起床活动时间、术后住院时间明显短于B组,2组手术效果比较,差异有显著性(P<0.05)。2组患者术后3个月阴道情况比较显示,2组阴道外观、阴道松紧度、阴道分泌物效果基本相同,但B组的乙状结肠阴道成形术组阴道深度长于A组的腹膜代阴道成形术组(P<0.05)。结论腹腔镜下腹膜代阴道与腹腔镜辅助乙状结肠代阴道手术效果及术后对阴道的改善方面有一定的区别。

宫角妊娠4例误诊分析

宫角妊娠较少见，因其种植部位异常，不易与宫腔正常妊娠与宫外妊娠区分，病情进展有子宫角部破裂可能，故早期诊断及时处理可避免严重后果，保留生育功能。现将我院2004—2007年之间宫角妊娠4例误诊原因分析如下：

黄式三对于王阳明学术思想的认识

黄式三(1789—1862),字薇香,号儆居子,浙江定海紫微人,晚清知名学者。其认为王阳明本人的学术思想卓然可立,但因为思想形式过于简略,思想态度过于自信,以至天资不足的后学流于空谈狂妄。因而不认同王阳明对朱熹的批评,斥责阳明后学的思想弊不胜言。黄式三为清代实学一脉的代表人物之一,由此可知该学派对王阳明思想的认识为阳明后学的流弊所蔽,未能认识到"敬"、"诚"是先秦儒家"礼"和"仁"的精神内核,而王阳明的"良知"说又是对"敬"、"诚"精神的继承和发展。

豆豉纤溶酶的溶血栓作用研究

豆豉纤溶酶(Douchi Fibrinolytic Enzyme,DFE)是一种具有强烈纤溶活性的丝氨酸蛋白酶,来源于中国传统发酵食品——豆豉。它能直接降解血栓中的交联纤维蛋白,具有良好的溶栓作用。本文综述了DFE的理化特性和溶栓作用,为利用其制备口服溶栓制剂指明了方向。

《论语后案》叙记五种

黄式三(1789—1862),字微香,浙江定海紫微人,晚清著名学者。《论语后案》是他的代表作,在晚清、民国期间影响甚大,其实事求是、不主汉宋的学术贡献获得李慈铭、章太炎、程树德等人高度评价。该书共有叙记五种,其中清道光二十四年活字印本有"黄式三《论语后案弁言》"一种,光绪九年浙江书局刻本有"黄式三《论语管窥叙》"、"黄式颖《论语后案叙》"、"黄式三《论语后案自叙》"、"黄以周《后记》"四种。据此五种叙记,可大略认识《论语后案》的版本源流、思想特质等问题,故试予以点校整理。

个体经验之上的理性批判精神——《无梦楼随笔》的思想价值

《无梦楼随笔》是张中晓于1955年因胡风冤案的牵连,在极端困苦和孤独的最后十年所作的思想札记。他从经验主义出发,思考了经验和理性的关系,批判了当时学术界占主导地位的黑格尔“绝对理念”、“历史逻辑”的观念。他强调个体理性的价值和意义,对信仰、真理和传统文化作了深刻的反思,并且揭露了上世纪五、六十年代中国社会和政治的一些丑陋面目。透过这些用生命铸成的文字,可以看到一位正直的知识分子的灵魂。

芍药花粉活力和柱头可授性的研究

用TTC法测定了芍药花粉的活力和寿命,用联苯胺—过氧化氢法测定了其柱头的可授期。结果表明,栽培芍药单瓣花植株的花粉活力和重瓣花植株的花粉活力在开花初期(1～2d)无明显差别,但重瓣花植株的花粉活力比单瓣花植株的花粉活力下降快;通常情况下,花粉寿命约为7d。栽培品种的柱头有个体差异,单瓣花植株有的开花后2h即可分泌粘液,而重瓣花植株的柱头在开花后,有的一直不分泌粘液,有的在开花后两天才分泌粘液;单瓣花植株的柱头可授性比重瓣花植株的强,一般分别在开花后6d和3d之内具可授性。移栽的野生芍药植株的花粉活力比栽培品种下降的慢,其寿命也较长,一般为15d;柱头的可授性和粘液分泌比栽培植株强。