Cx32调控肝癌细胞上皮间质转化的机制

目的探讨缝隙连接蛋白32(Cx32)在肝癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及其机制。方法在Hep G2细胞(对阿霉素敏感)中干扰Cx32的表达,在Hep G2/doxorubicin(DOX)细胞(对阿霉素耐药)中过表达Cx32,Western blot测定Cx32、p-Akt的表达水平。20μmol/L的LY294002(PI3K/Akt信号通路的抑制剂)作用于Hep G2/DOX细胞24 h,Western blot检测p-Akt、E-cadherin、vimentin的表达水平,Transwell实验检测细胞的侵袭、迁移能力。在干扰Cx32的Hep G2细胞中,用20μmol/L的LY294002作用于细胞24 h,Western blot检测E-cadherin、vimentin的表达水平,Transwell实验检测细胞的侵袭、迁移能力。结果 Western blot结果显示,在Hep G2细胞中干扰Cx32的表达后,p-Akt的表达升高(P<0.05);在Hep G2/DOX细胞中过表达Cx32后,p-Akt的表达降低(P<0.05)。20μmol/L的LY294002作用于Hep G2/DOX细胞24 h后,p-Akt、vimentin的表达降低,E-cadherin的表达升高(P<0.05),且细胞的侵袭、迁移能力降低(P<0.05)。在Hep G2细胞中干扰Cx32的表达后,细胞中E-cadherin的表达降低,vimentin的表达升高(P<0.05),且细胞的侵袭、迁移能力显著增加(P<0.05);而在干扰Cx32的Hep G2细胞中,用20μmol/L的LY294002作用于细胞24 h后,细胞中E-cadherin、vimentin的表达均没有显著变化(P>0.05),细胞的侵袭、迁移能力也无显著改变(P>0.05)。结论 Cx32可调控肝癌细胞中PI3K/Akt信号通路的活性,LY294002可逆转Hep G2/DOX细胞的EMT,Cx32可能是通过PI3K/Akt信号通路调控肝癌细胞EMT。