淫羊藿总黄酮通过抑制小胶质细胞/巨噬细胞介导的氧化应激反应促进髓鞘再生

目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)通过抑制小胶质细胞氧化应激(OS)促进髓鞘再生的作用及机制。方法:BV2、原代小胶质细胞和骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)以1×106个/ml接种于6孔板,贴壁后加入LPS、TFE 37°C孵育24 h;C57BL/6小鼠用含0.2%CPZ饲料喂养6周诱导脱髓鞘模型,4周末TFE治疗组小鼠腹腔注射TFE 2周。结果:TFE可浓度依赖性地清除氧自由基,降低NO、H2O2、MDA等氧化中间产物含量,上调抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px表达,激活Nrf2/HO-1信号通路,增强抗氧化能力,通过抑制OS上调少突胶质前体细胞CNPase表达,促进髓鞘再生。结论:TFE可通过抑制小胶质细胞OS激活Nrf2/HO-1信号通路,促进髓鞘再生。

银杏内酯K通过抑制小胶质细胞介导的炎性反应保护髓鞘

目的:研究银杏内酯K(GK)能否通过抑制小胶质细胞介导的炎性反应保护髓鞘。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为正常(Normal)组、双环己酮草酰双腙(Cuprizone,CPZ)组和银杏叶内酯K组(GK组),通过免疫荧光染色评估各组髓鞘脱失程度和小胶质细胞的活化情况,Western blot和ELISA检测各组脑组织细胞因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)的表达情况。结果:与正常组相比,CPZ成功诱导了小鼠胼胝体广泛的髓鞘脱失(P<0.001),并引起了小胶质细胞的活化和炎性细胞因子iNOS、TNF-α及IL-6的升高(P<0.001)。与CPZ组相比,GK组有效阻止了髓鞘脱失(P<0.01),抑制了小胶质细胞的活化(P<0.01)。同时GK组下调了促炎细胞因子iNOS、TNF-α和IL-6(P<0.05),上调了抗炎细胞因子Arg-1、IL-10、和TGF-β(P<0.05)。结论:GK通过抑制小胶质细胞介导的炎性反应保护髓鞘。

《医林改错》之益气活血法浅析

“人之所有者,血与气耳”,气血是构成人体重要的物质基础,历代医家辨证论治皆不离气血。王清任在《医林改错》中以气血关系为基,创立了一系列有关活血化瘀的方剂,完善了益气活血的理法方药,为后世医家论治疾病提供了新思路。

从瘀血致病到益气活血之思想发展探析

瘀血学说起源于《内经》,瘀血理论在张仲景《伤寒杂病论》中得到发展,从“瘀血”二字的提出,到相关病因、症状、脉象、诊断、治法方药,至今应用广泛。受仲景瘀血论的启发,王清任在其基础上,重释气血,将气虚作为瘀血之因,细致瘀血症状,再次拓宽致病范畴;并对《伤寒杂病论》中活血化瘀用药配伍规律加以运用、升华,最终形成益气活血法则,为临床诊治提供了思路。

基于抑制小胶质细胞介导的炎症反应探讨淫羊藿总黄酮保护髓鞘的机制

目的:研究淫羊藿总黄酮(TFE)能否通过抑制小胶质细胞介导的炎症反应保护髓鞘。方法:BV2细胞、原代小胶质细胞及BMDMs随机分为正常组、LPS组、TFE组,并以1×10;/孔密度接种于6孔板。细胞贴壁后,TFE组细胞给予TFE预处理2 h后,LPS组和TFE组再给予LPS处理24 h。提取培养细胞上清液经ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和抗炎因子IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)分泌;18只C57BL/6小鼠按平均体质量随机分为正常组、CPZ组、TFE组,每组6只。正常组小鼠给予正常饲料饲喂养,另两组小鼠用含0.2%双环己酮草酰二腙(CPZ)的饲料饲育6周。第4周末开始,TFE组小鼠经腹腔注射TFE 2周。同时正常组和CPZ组每日给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射。采用免疫荧光染色观察MBP、Iba-1、Iba-1;/iNOS;、Iba-1;/Arg1;、Iba-1;/TLR4;、Iba-1;/NF-κB;和PDGF-Rα/Ki67/DAPI表达。结果:体外实验观察到TFE能显著抑制促炎因子TNF-α和IL-1β分泌(P<0.05,P<0.01),增加抗炎因子IL-10与TGF-β分泌(P<0.05)。体内实验经MBP免疫荧光染色发现TFE能显著增加胼胝体尾部MBP荧光强度(P<0.01)。经免疫荧光染色发现TFE降低胼胝体区Iba-1;小胶质细胞数量,并能诱导Arg-1表达增多(P<0.01),降低iNOS表达(P<0.01);并且能降低胼胝体部位TLR4与NF-κB的表达(P<0.01);同时研究还发现TFE能促进侧脑室高表达PDGF-Rα(P<0.01),促进少突胶质前体细胞的增殖。结论:TFE能通过抑制小胶质细胞介导的炎症反应保护髓鞘,可能的机制是通过降低TLR4/NF-κB炎症信号通路发挥作用。