胆红素诱导神经细胞凋亡及对其线粒体膜电位的影响——胆红素对中枢神经细胞损伤机理的研究

目的 观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法 将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用于体外培养的SH SY5Y细胞 ,在不同时间点通过倒置显微镜观察细胞形态的变化及存活情况 ;经Hoechst332 5 8染色后 ,在荧光显微镜下观察细胞核的形态变化 ;利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率 ;经罗丹明 12 3染色后 ,用流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果 在 0 0 2g/L胆红素作用下 ,SH SY5Y细胞 2h后即可见较多细胞皱缩、变圆 ,4h可见有少数细胞飘起 ,细胞轮廓不清 ,6h可见大部分细胞飘起 ,并已开始崩解 ;染色质在胆红素作用 6h出现典型的凋亡样改变 ;细胞凋亡率随作用时间的延长明显增加 ,3h为 19 4 % ,4h为 76 4 % ,6h达到 79 0 % ;在胆红素作用 1h后反映线粒体膜电位相对荧光强度即由 (16 6± 1 5 5 6 )U下降到 (7 11± 0 70 1)U ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,并随作用时间的延长而进一步降低。结论 胆红素作用早期即可导致SH SY5Y细胞线粒体膜电位下降 ,既而发生凋亡 ,提示通过诱导听觉中枢神经元凋亡可能在高胆红素血症所致的听力损伤和听神经病发病中起重要作?

短暂激活c-jun N-terminal激酶抑制胆红素诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4± 3 2 ) %降低到 (12 6± 2 6 ) %。为了进一步证实JNK的作用 ,在SH SY5Y细胞经H2 O2 预处理前 ,先经 2 0 μmol LJNK c jun AP1抑制剂curcumin作用 12h以抑制H2 O2 对JNK的激活 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞增高到 (42 8± 4 4 ) % ,curcumin完全抑制了短暂激活JNK所提供的保护作用。结果表明短暂激活JNK可能在胆红素诱导的SH SY5Y细胞凋亡中提供抗凋亡信号 。

P38激酶介导胆红素诱导的SHSY5Y细胞凋亡

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样改变 ;用P38激酶抑制剂SB2 0 3580预处理细胞后 ,在倒置光显微镜下观察胆红素作用不同时间细胞形态的变化及存活情况 ;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的改变。结果显示SHSY5Y细胞经胆红素作用后细胞核出现典型的凋亡样改变 ;细胞经SB2 0 3580预处理 1h ,胆红素作用 3h后凋亡率为 (1 2 1± 2 4) % ,对照组为(1 9 4± 2 7) % ;4h后凋亡率为 (39 3± 4 8) % ,对照组为 (66 2± 5 2 ) % ,差异有显著性意义 (P <0 0 1 )。

人参茎叶皂甙抑制肝癌细胞系SMMC7721增殖的实验研究

目的:探讨人参茎叶皂甙(GSL)对人肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:人肝癌细胞系 SMMC 7721在体外培养条件下,经浓度为200 gg/ml 的 GSL 作用3天后,进行如下检测:应用流式细胞仪检测对照组和 GSL 组人肝癌细胞细胞周期频数分布及细胞周期蛋白 D_1(Cyclin D_1)表达水平;运用原位杂交技术检测其 N-ras 基因 mRNA 转录水平,通过图像分析仪测量其胞浆内阳性杂交颗粒的平均吸光度值进行半定量分析。结果:GSL 组 S 期细胞数明显小于对照组(P<0.01);Cyclin D_1蛋白表达及 N-ras 基因 mRNA转录亦明显较对照组降低(P<0.0)。结论:人参茎叶皂甙通过抑制 N-ras 基因 mRNA 转录,进而 Cyclin D_1蛋白表达下调,从而使较多的人肝癌细胞被阻止于 G_1/S 检查点(checkpoint)。

反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡

目的 :观察P3 8激酶特异性抑制剂SB2 0 3 580及反义P3 8激酶cDNA对胆红素诱导人神经母细胞瘤SH -SY 5Y细胞凋亡的影响 ,探讨P3 8激酶信号转导通路在胆红素诱导SH -SY5Y细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法 :分别经SB2 0 3 580和二甲基亚砜预处理的SH -SY5Y细胞在胆红素作用 3h和 5h后 ,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况 ;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。采用脂质体法将含人反义P3 8cDNA的真核表达载体 pcDNA 3 0 -antiP3 8导入SH -SY5Y细胞 ,建立稳定低表达P3 8蛋白的细胞株 ,经Westernblotting鉴定后命名为SH -SY5Y -antiP3 8,而转染空载体pcD NA3 0的SH -SY5Y细胞株则命名为SH -SY5Y -pcDNA3 0 ;SH -SY5Y -antiP3 8细胞和SH -SY5Y -pcD NA3 0细胞分别经胆红素作用 3h和 5h ,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况 ;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果 :在 0 0 2 g/L胆红素作用下 ,流式细胞仪显示与对照相比SB2 0 3 580预处理的SH -SY5Y细胞在胆红素作用 3h后 ,其凋亡细胞由 19 4%下降到 12 1% ,5h后由 66 2 %降到 3 9 3 % ;与SH -SY5Y -pcDNA3 0细胞相比 ,SH -SY5Y -antiP3 8细胞在胆红素作用 3h后 。

非神经材料(干热变性骨骼肌)修复面神经缺损:附一例报告

目的探讨骨骼肌作为一种非神经材料在修复面神经缺损方面的临床应用价值。方法经动物实验证实,经微波变性处理后的骨骼肌作为桥接材料修复面神经缺损,具有较好的效果。在此基础上,对一例较大面神经瘤患者采取经乳突进路面神经鞘膜瘤切除术,同时采用经微波干热变性骨骼肌移植修复面神经缺损。结果术后随访一年,面肌功能恢复满意。结论提示干热变性骨骼肌作为一种非神经材料,在修复面神经缺损方面,具有较好疗效,值得进一步研究和应用。

要重视和提高听力

听力教学是中学英语教学的重要组成部分，是外语学习的基础。在每年的高考中，听力分值占了总分的五分之一。要重视和提高听力，首先应该了解影响听力的一些语言和非语言因素，然后才能采取相应对策加以攻克。

浅谈高中英语阅读理解的教学

美国心理语言学家Frank Smith在Understanding Reading一书中亦指出：“阅读不是一种消极的活动。读者要想获得知识，必须做出积极的贡献。至少要做出与作者同样大的贡献。”Smith所说的“贡献”就是指读者积极的思维活动。鲁姆哈特和Smith的观点都明确指出了阅读的正确过程，即从识别单词、领悟句意到理解篇章乃至摄取知识，实际上就是一种提出问题、解决问题、排疑解难的思维过程。

汉正街商潮中的先进纳税人

蜚声中外的汉正街小商品市场客商如潮、人流如涌,成为长江及汉水之滨的一片商潮的海洋。 汉正街位于汉水与长江交汇处的北岸,曾是武汉三镇一处濒邻桅樯林立,街巷商贯云集,购销繁荣兴旺的商业中心地带。十一届三中全会后,汉正街人得天时地利人和之利,以敢为天下先的勇气。

集束化护理在机械通气患者行高压氧治疗中的应用

目的探讨集束化护理在机械通气患者行高压氧治疗中的应用效果。方法选取2019年1月至2021年12月在海军第九七一医院军事医学与特种学科治疗的50例机械通气患者作为研究对象,按随机数字表法分为观察组和对照组,每组25例。对照组给予常规护理;观察组在对照组的基础上由ICU舱集束化护理小组给予舱内综合护理。高压氧治疗2个疗程后,统计观察组集束化护理各项措施的执行率,比较2组患者的误吸、呼吸机相关性肺炎(VAP)发生率,脱机时间和家属满意度。结果开展培训明确职责、体位管理、饮食管理的执行率为100%,口腔护理、吸痰护理、气囊压管理、气道湿化、预防非计划性拔管的执行率为96%,无菌操作及消毒隔离的执行率为92%。观察组患者误吸、VAP发生率(4%、4%)明显低于对照组(16%、20%),差异有统计学意义(P<0.01)。观察组患者脱机时间为(8.16±2.67)d,比对照组的(13.26±3.93)d明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。2组患者家属满意度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对舱内机械通气患者采用集束化护理能够规范操作流程,优化护理措施,减少并发症的发生。