丹参-葛根提取物对小鼠动脉粥样硬化的保护作用

目的探究丹参-葛根提取物(DG)对动脉粥样硬化(AS)小鼠的保护作用。方法选择6周龄的ApoE-/-雄性小鼠24只,随机分为空白组、模型组、DG低剂量组(200 mg/kg)和DG高剂量组(400 mg/kg),每组6只。空白组用正常饲料喂养,模型组和DG治疗组用高糖高脂饲料喂养;空白组和模型组每天灌胃生理盐水,DG治疗组每天灌胃DG提取液,实验持续16周。实验结束后应用生化试剂盒检测小鼠血清中脂质成分三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL-C)水平,氧化应激因子丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)的含量;采用油红O染色和Masson染色观察小鼠主动脉病理组织学变化;采用ELISA方法检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素12(IL-12)、可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)、可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)水平。结果生化检测结果显示,与空白组比较,模型组小鼠血清中的TG、TC和LDL-C水平显著升高,给予药物DG干预后可以浓度依赖性改善脂质紊乱(F=180.0~564.6,P<0.001);模型组小鼠血清中的氧化应激因子MDA含量显著升高,抗氧化因子SOD、GSH含量显著降低,给予DG干预后MDA血清含量有效降低,抗氧化因子SOD、GSH含量升高(F=133.0~194.7,P<0.001)。ELISA检测结果显示,与正常小鼠相比,模型组小鼠血清中炎症因子TNF-α和IL-12以及sICAM-1、sVCAM-1水平显著增加,DG剂量依赖性抑制炎症因子水平(F=247.0~371.0,P<0.001)。油红O和Masson染色结果显示,与模型组比较,DG低剂量和高剂量组小鼠动脉斑块面积减少,斑块处胶原纤维含量增加。结论DG能降低AS小鼠脂质过氧化水平,抑制炎症反应,减少斑块的面积,提高易损斑块的稳定性,抑制AS的发生和发展。

丹参葛根提取物对阿霉素引发小鼠心力衰竭的作用

目的探究丹参葛根提取物(DG)对阿霉素(DOX)引发的心力衰竭小鼠(DOX-HF小鼠)的心脏保护作用。方法将32只6周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量给药组(C组)和高剂量给药组(D组),每组8只。B组、C组和D组腹腔注射DOX 4周(每周5 mg/kg),C组和D组在建模开始时每日1次灌胃DG水溶液,灌胃剂量分别为50 mg/kg和100 mg/kg;A组、B组每日灌胃相同剂量的生理盐水。采用超声心动图检测评估心脏机械功能改变情况,苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察心肌组织病理学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌钙蛋白I(cTnI)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果超声心动图检测结果显示,与A组相比,B组左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)显著下降,左室舒张末期容积(LVEDV)和左室收缩末期容积(LVESV)显著升高;与B组相比,C组和D组EF和FS显著升高,LVEDV和LVESV显著下降,差异均有显著性(F=7.66~29.30,P<0.05)。HE染色结果显示,与A组相比,B组心肌组织结构明显异常,心肌细胞排列紊乱且水肿,空泡化严重;C组和D组心肌细胞排列轻度紊乱,可见少许空泡。Masson染色结果显示,与A组相比,B组胶原沉积显著增加,C组和D组胶原沉积较B组明显减少。ELISA检测显示,与A组比较,B组NT-proBNP、cTnI、TNF-α和IL-6水平显著升高,C组和D组NT-proBNP、cTnI、TNF-α和IL-6水平较B组显著下降,差异有显著性(F=17.54~32.59,P<0.05)。结论DG能够有效保护DOX-HF小鼠的心脏功能。

扇贝多肽对长期紫外线A辐射无毛小鼠皮肤所致突变型p53,EGFR和SP表达的抑制作用

探讨局部应用扇贝多肽(PCF)对长期长波紫外线(UVA)辐射无毛小鼠皮肤所致突变型p53,表皮生长因子受体(EGFR)和P物质(SP)表达的影响。建立长期长波紫外线辐射无毛小鼠皮肤模型,免疫组化法测定皮肤组织突变型p53,表皮生长因子受体和P物质的表达。无毛小鼠背部皮肤每天一次应用5％和20％扇贝多肽可显著降低长期长波紫外线辐射(剂量为4556.4 J·cm-2)所致突变型p53,表皮生长因子受体和P物质的过表达。和模型组相比,5％扇贝多肽可分别降低突变型p53,表皮生长因子受体和P物质的表达至86.7％,81.7％和85.2％。20％扇贝多肽几乎可完全对抗长期长波紫外线辐射所致的过表达。扇贝多肽可通过抑制无毛小鼠皮肤中突变型p53,表皮生长因子受体和P物质的过表达,从而可保护皮肤防止光致癌和光老化。

海洋低温碱性蛋白酶的皮肤变态反应研究

利用酶工程技术制得的海洋低温碱性蛋白酶 ,主要用于加酶的洗涤剂 ,在室温下有较高的酶活力。为确保海洋低温碱性蛋白酶使用的安全性 ,并为其应用提供实验依据 ,本文以豚鼠为受试动物 ,进行皮肤致敏反应试验。结果表明 ,经致敏接触和激发接触 ,2 ,4 -二硝基氯苯组 ( DNCB)皮肤最大平均反应值为 3.3,致敏率为 10 0 %。海洋低温碱性蛋白酶组皮肤最大平均反应值为 0 .0 5,致敏率为5%。

医学机能实验学虚拟实验室建设的探讨

虚拟实验室是一种基于计算机虚拟仿真和网络技术、虚拟仿真技术构建的开放式网络化的虚拟实验教学系统，是现有各种教学实验室的数字化和虚拟化。

创新型实验:玫瑰花液抗UV损伤的HaCaT细胞的作用的设计与实施

为培养学生的创新能力,启发学生的科研思路,拓宽科研视野,激发学生的创新意识,在建设创新型实验教学实验室的同时,将承担科研项目的教师作为创新型实验导师,暨本科生导师制,实行学生和导师双向选择,导师指导学生掌握带题查阅、阅读文献、科研设计、资料收集、统计分析等,通过科研活动与实践,完成创新型实验,扩展了学生的科研空间。将科研成果转变成研究性、创新性实验项目融入到医学机能学实验教学,使学生在实验过程中直接接触到科研前沿,为国家培养一批综合素质好、基础扎实、实际应用和实践能力强的高素质综合性创新医学人才奠定基础。

睫状神经营养因子对应激大鼠体质量的影响及其机制探讨

①目的 探讨睫状神经营养因子 (CNTF)对躯体性和心理性应激大鼠体质量的影响及其与下丘脑促肾上腺皮质素释放激素 (CRH)含量的关系。②方法 建立应激大鼠动物模型 ,应用鼠脑立体定向方法 ,在应激前给予大鼠双侧海马微量注射CNTF ,称量大鼠应激前后的体质量变化 ,并用放射免疫分析法测定大鼠下丘脑CRH含量的变化。③结果 在应激前及应激期间给予双侧海马微量注射CNTF ,可以有效改善应激引起的大鼠体质量的下降 (t=2 .16 3.86 ,P <0 .0 5 ,0 .0 1) ,改善应激引起的下丘脑CRH含量的升高 (t=3.0 5 4.0 3,P <0 .0 1)。④结论 CNTF可以改善应激对大鼠生长的损害 ,其机制可能与CNTF降低应激大鼠下丘脑CRH的含量有关。

扇贝多肽在体外对免疫细胞活性的影响及其抗紫外线的氧化损伤作用

采用噻唑盐 (MTT)比色方法研究在紫外线辐射损伤条件下扇贝多肽对免疫细胞的保护作用 ,并探讨扇贝多肽对胸腺细胞和脾细胞活性的影响。结果表明 ,扇贝多肽具有抗紫外线氧化损伤的作用 ,可减轻或抑制紫外线对胸腺细胞和脾细胞的氧化损伤 ,并且呈剂量依赖性。扇贝多肽在 0 .5%— 1 0 .0 %的浓度范围内 ,其抗氧化能力随浓度的增高而增强 ;在正常条件下可显著增强免疫细胞的活性 ,并且可拮抗雌激素对免疫细胞的抑制作用。提示扇贝多肽不仅具有抗氧化损伤作用 ,而且具有免疫增强作用。

左卡尼汀对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞保护作用的实验研究

目的研究左卡尼汀对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用。方法通过STZ诱导建立I型糖尿病大鼠模型,成模后采用灌胃方式给予不同剂量的左卡尼汀口服液,6周后行电镜观察,比较疾病模型组与治疗组之间视网膜节细胞的超微结构变化,并进行DNA末端转移酶介导缺口末端标记(TUNEL)染色,观察细胞的凋亡情况。结果电镜显示药物治疗组神经节细胞核异染色质及线粒体空泡化较对照组减少,200 mg·kg-1的治疗剂量效果优于100 mg·kg-1组(P<0.05)。药物治疗组减少了由糖尿病导致的视网膜神经节细胞的凋亡数目(P<0.05)。结论左卡尼汀对糖尿病大鼠模型视网膜节细胞具有保护作用,抗凋亡可能是作用机制之一。

扇贝多肽对UVB照射HaCaT细胞后NO释放及热休克蛋白70表达的影响

目的观察UVB诱导的HaCaT细胞一氧化氮(nitricoxide,NO)释放及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的动态变化,探究扇贝多肽(polypeptide from Chlamys farreri,PCF)对UVB照射后NO释放、热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)表达的影响。方法以电子自旋共振(electronspin resonance,ESR)技术检测NO的释放量;蛋白质印迹法检测iNOS、HSP70蛋白表达。结果 20 mJ.cm-2 UVB照射HaCaT细胞后NO释放明显增多,有3、24 h两个释放高峰期;PCF对各时间点NO的释放均有抑制作用;iNOS蛋白表达在UVB照射后6 h开始逐渐升高,18～24 h达到高峰;iN-OS抑制剂可抑制UVB照射后24 h时NO的释放,对3 h时NO的释放无影响;PCF可剂量依赖性增强UVB照射后HSP70的蛋白表达。结论 UVB照射HaCaT细胞诱导iNOS高表达从而引起NO产生增加,但在照射前期也可通过非iNOS途径生成NO;PCF可能通过增强UVB照射后HSP70的表达,进而抑制iNOS蛋白表达、减少NO的生成而保护HaCaT细胞免受UVB辐射损伤。

盐藻β-胡萝卜素促进学习和记忆的作用

采用跳台实验和Y-迷宫实验,观察盐藻β-胡萝卜素对大、小鼠学习和记忆的影响。实验结果显示,盐藻β-胡萝卜素(12.5,25和50 mg.kg-1,ip)对正常小鼠的学习和记忆有明显的促进作用;对东莨菪碱,20%乙醇所引起的记忆障碍有明显的改善作用,但对亚硝酸钠所致的记忆障碍无明显作用。结果表明,盐藻β-胡萝卜素作为一种抗氧化剂,对实验动物的学习和记忆功能有明显的促进作用。

扇贝(Chlamys farreri)多肽通过EGFR抑制受紫外线B(UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡

利用Hoechst 33258荧光染色法检测紫外线B(UVB)辐射诱导HaCaT细胞凋亡率。结果表明,扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)可以剂量依赖性抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡;表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478能明显抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡。采用3’-RACE法构建EGFR的cDNA片段,克隆测序检测突变位点。结果表明,UVB照射后EGFR发生碱基突变A→G,A→G,T→C,G→A,G→A;预加入5.69mmol/L的PCF,产生部分抗突变作用,1,2,3突变位点处未发生碱基的突变。

药理学实验教学改革探讨

目的探讨高等医学院校实施药理学实验教学改革的意义和手段。方法实验教学模式改革:二步法实验教学模式的实施及多种教学方法的应用;教学手段的改革:更新设备及多媒体的应用;根据实际情况对实验教材及实验内容的调整;对实验考核方式及内容的改革。结果通过四方面的改革提高了学生的实践能力和创新意识,激发了学生的学习兴趣和学习主动性,有利于药理学实验教学质量与科研水平的提高。结论我院所采用的四方面教学改革对药理学实验教学的质量与科研水平的提高具有重要意义。

柱前衍生化HPLC法检测兔血浆和肝组织中左卡尼汀及其代谢物的含量

目的:建立兔血浆和肝组织中左卡尼汀(LC)及其代谢物的柱前衍生化高效液相(HPLC)的分析方法,检测兔内源性LC、乙酰卡尼汀(ALC)和丙酰卡尼汀(PLC)及单次灌胃后LC、ALC和PLC在血浆和肝组织的含量。方法:采用新西兰大耳兔,以1mL/kg的剂量单次灌胃给予左卡尼汀,在药前(0h)和药后取血浆(1、3、7h)和肝组织(7h),采用柱前衍生化HPLC法检测血浆和肝组织中LC、ALC和PLC的含量。结果:兔血浆和肝组织中LC、ALC和PLC的线性范围分别是2～200、0.2～40和0.1～8μmol/L;日内、日间精密度均小于4.12%;平均方法回收率在80%～95%之间。空白兔血浆LC、ALC和PLC的浓度分别为15.8、2.2和0.5μmol/L,空白兔肝组织的浓度分别为24.8、4.6和2.1μmol/g。给药7h后,LC、ALC和PLC在血浆和肝组织中的浓度明显升高。结论:本方法简单、可靠、精密度高。给药7h后,LC在体内的吸收过程中,发生了左卡尼汀乙酰化和丙酰化的过程,LC代谢成为ALC和PLC,并且其在肝组织中的浓度明显大于血浆,证明LC、ALC和PLC很快从血浆转移到肝组织中去。

齐墩果酸对oxLDL诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨齐墩果酸对氧化性低密度脂蛋白（oxLDL）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用。方法体外培养HUVEC,以维生素E（200μmol/L）或齐墩果酸（5-40μmol/L）预处理细胞24h,再加入200mg/L oxLDL继续培养24h造成细胞损伤。采用MTT法检测各组细胞存活率,同时检测细胞丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、还原型谷胱甘肽（GSH）含量,采用DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧（ROS）含量。结果与正常组比较,200mg/L oxLDL组细胞存活率、SOD活性、GSH含量明显降低,MDA、ROS含量明显增加,差异均有统计学意义（F=67.72-173.25,q=11.46-30.86,P〈0.01）;与200mg/L oxLDL组比较,齐墩果酸在5-20μmol/L浓度范围内,可剂量依赖性提高细胞存活率、减少MDA含量及ROS形成、增加GSH含量及SOD活性（q=4.26-22.35,P〈0.05）。结论齐墩果酸能抑制ox-LDL诱导的HUVEC氧化损伤,其机制可能与维持SOD活性,减少ROS释放、MDA生成及GSH消耗有关。

医学机能实验学课程体系的构建与实践

以世界医学教育联合会提出的《医学教育国际标准》为参照,以我国制定的《中国医学教育本科标准》为依据,根据学校、学院人才培养定位,提出实验教学改革的思路是:坚持"加强基础、拓宽知识、培养能力、激励个性、提高素质"的人才培养思想,突出"能力"核心,以培养学生深厚的人文素质、扎实的医学基本技能、严谨的科学素养和良好的创新能力为目标,以满足我国社会经济发展对高素质医学专业人才的需求。以科学设置的教学内容与课程体系、充分有效的教学手段和方法、先进可行的教学运行和管理机制、合理匹配的教学组织形式为保障,建立新型的医学机能学实验教学体系。该独立课程已成为医学和教育心理学各专业学生的必修课程,并获山东省高等教育教学成果三等奖。

裙带菜提取物体外抗氧化活性研究

目的探讨裙带菜提取物的体外抗氧化活性。方法以过氧化值(POV)法和DPPH法对提取物进行抗氧化活性的测定,以维生素E(VE)和维生素C(VC)作抗氧化性能对照。结果不同溶剂提取物均有不同程度的抗氧化活性,石油醚提取物清除自由基的效率比较高。结论裙带菜的石油醚提取物具有较强抗氧化活性。

制药工程硕士药剂学教学的改革与实践

目的药剂学作为制药工程硕士专业的一门必修专业基础课,具有很强的实践性和应用性。为提高教学质量,为社会培养高级科研和药事管理方面的人才,本校在该学科的教学中进行了一系列的改革。方法通过借鉴国内外教学方式,从课堂教学和实践教学等方面入手,改变传统的药剂学教学模式,在传授学生理论的同时,挖掘和提高他们的自主创新能力。结果通过本校三年多的应用和完善,已有多批的研究生顺利的开题、结题、毕业,且毕业生们在工作单位也获得好评。结论针对药剂学这种知识点多、应用性强的学科,采用新的教学模式较传统模式能更好地提高教学质量。