在同一神经元内同时显示Fos－蛋白、酪氨酸羟化酶和HRP逆行标记的三重标记技术

本文介绍了一种能在同一神经元内同时显示ＨＲＰ逆行标记以及Ｆｏｓ和某类神经递质或相关酶（例如ＴＨ）的三重标记技术。首先将ＨＲＰ注入脑内某一核团（如中央杏仁核），动物存活４８ｈ后，再向胃内导入１％福尔马林２ｍｌ，以造成对胃的伤害性刺激，２ｈ后将动物处死。脑的切片（如本文的延髓切片）先用四甲基联苯胺－钨酸钠（ＴＭＢ－ＳＴ）法进行ＮＲＰ呈色反应，后用二氨基联苯胺（ＤＡＢ）和氯化钻作加强；然后按ＡＢＣ法进行Ｆｏｓ免疫组织化学反应，继之按ＰＡＰ法进行ＴＨ免疫组织化学反应。光镜下在延髓切片观察到７种标记神经元，即ＴＨ－、ＨＲＰ－或Ｆｏｓ－单标记神经元，ＴＨ和ＨＲＰ－、ＴＨ和Ｆｏｓ－或ＨＲＰ和Ｆｏｓ的双标记神经元以及ＴＨ和ＨＲＰ和Ｆｏｓ的三标记神经元。该方法为研究同时显示中枢神经元的功能活动状态、传出投射及所含神经递质提供了一个强有力的工具。

伤害性刺激大鼠切牙引起三叉神经脊束核尾侧亚核内Fos的表达

在甲氧氟烷麻醉下，给大鼠切牙不同形式的伤害性刺激．动物存活２ｈ后，用ＡＢＣ法检查大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核神经元的Ｆｏｓ（原癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的蛋白产物）．结果发现，几种伤害性刺激均引起同侧三叉神经脊束核尾侧亚核神经元的Ｆｏｓ表达．以机械穿髓为最多，依次是化学刺激、热刺激和电刺激．提示不同的刺激引起牙髓痛反应程度可能不同，其结果可为牙痛研究提供较为客观的指标，并可用以探索牙痛的的中枢调制和传导途径．