红外光谱法与化学法对尿路结石主要成分分析比较

目的通过红外光谱分析法及化学法对尿路结石进行成分分析,比较二者在尿路结石诊断及预防中的临床价值。方法分别应红外光谱法和化学法对903例尿路结石进行成分分析,并对分析结果进行总结。结果红外光谱分析法测得的结石晶体成分类型明显多于化学分析法,二者检测为同一种主要成分的比例为76.30%,其中草酸钙结石检出率最高。与红外光谱分析法比较,化学法对草酸钙的检测灵敏度为98.34%(653/664),差异无统计学意义(P>0.05),特异度为22.59%(54/239),差异有统计学意义(P<0.01)。结论红外光谱法及化学法对尿路结石成分分析均具有临床意义,但前者准确性更高,应根据实际情况选择结石分析方法。

人胚胎干细胞定向分化为晶状体小体过程中晶状体发育相关转录因子的动态变化

目的探讨人胚胎干细胞（hESC）定向分化为晶状体小体（LB）过程中晶状体发育相关转录因子的表达特点和规律。方法通过＂三阶段法＂体外诱导hESC定向分化为LB。取hESC（D0）和诱导分化不同时间点的细胞，应用高通量测序技术，通过生物信息学方法分析晶状体发育相关的转录因子及其亚型的表达变化特点和规律。采用Western blot法和免疫荧光染色技术对相关基因在蛋白水平的表达进行检测。结果光学显微镜下，未分化的hESC呈圆形；分化后0～6 d（D0～D6）的细胞更圆且排列更紧密；D7～D18细胞由圆形逐渐延长变为梭形；D19～D32，形成有三维立体结构的透明结构，即LB。荧光定量PCR结果显示，干细胞标记基因的表达在分化过程显著降低，而晶状体特异性基因的表达明显升高。免疫荧光染色结果显示，LB表达晶状体特异性蛋白α-crystallin和β-crystallin。高通量测序聚类分析结果显示，D0与D32之间的转录因子基因表达谱差异最为显著，而D6和D18之间的差异最小。前基板基因DLX3、DLX5、DLX6、HES1、HES4、OTX2和EYA1在分化第一阶段表达显著升高，随后下降；晶状体特异性基因中SOX2蛋白表达逐渐降低，而后升高，而PAX6蛋白的表达随分化时间延长逐渐增加；晶状体分化基因MAB21L1、CMAF、PROX1及PITX3等在分化早期变化不显著，在分化第三阶段表达明显增加。结论体外定向分化的3个阶段依次对应体内晶状体发育的前基板外胚层（PPE）阶段、前晶状体外胚层（PLE）和晶状体外胚层（LE）阶段、晶状体泡（LV）和晶状体细胞分化阶段，提示hESC体外定向分化过程很好地模拟了体内晶状体的胚胎发育过程，为研究晶状体发育和先天性晶状体疾病的分子机制提供了理想的模型。