不同甜瓜品种遗传转化再生体系的建立与基因编辑植株的快速获取

【目的】研究不同甜瓜品种遗传转化再生体系的建立与基因编辑植株的快速获取。【方法】选用巴吾顿、老汉瓜、其里甘、新密杂11号(86-1)4个甜瓜品种的子叶为外植体,通过农杆菌介导法侵染甜瓜子叶,采用组织培养法建立老汉瓜的遗传转化再生体系,运用PCR法检测获取基因编辑植株。【结果】从4个甜瓜品种中筛选出老汉瓜为优势品种作为外植体,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基预培养2 d和共培养3 d,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+潮霉素5 mg/L+头孢霉素250 mg/L筛选培养基上继续培养7 d,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+潮霉素5 mg/L+头孢霉素250 mg/L的不定芽诱导培养基上培养1~2周可见长出的小芽,将诱导芽分别放置于不加潮霉素和加潮霉素的芽伸长培养基上培养,诱导芽在不加潮霉素的芽伸长培养基上的生长速度比加潮霉素的培养基生长快,可使芽生长至2叶苗期缩短3周,在无菌环境下剪去一个芽提取DNA,并采用RT-PCR方法检测获得21株转化植株。【结论】筛选出基因编辑植株嫩芽,不加潮霉素的芽伸长培养基可将获得基因编辑植株周期缩短3周。

喀什地区甜瓜田间杂草3种病毒的检测及分析

2021年在新疆喀什地区伽师县和疏勒县厚皮甜瓜主产区随机采集了7科13种杂草的47份鲜样,采用RT-PCR法检测杂草带毒情况,分析杂草带毒率及病毒间的亲缘关系。结果表明:不同地点、不同种类杂草上的WMV、CMV、ZYMV检出率存在明显差异,伽师县WMV、CMV、ZYMV的检出率分别为5.77%、1.43%、32.19%,而疏勒县分别为17.14%、2.86%、7.14%;大部分杂草都携带病毒。杂草上的WMV、CMV和ZYMV存在较高的遗传变异。

8种生物源和矿物源农药防治加工番茄细菌性斑点病试验

【目的】研究8种生物源和矿物源农药对加工番茄细菌性斑点病的防治效果,筛选出更加适合番茄制品出口食品安全要求的高效农药。【方法】采用田间小区试验,比较8种生物源和矿物源农药对加工番茄细菌性斑点病防效差异。【结果】第3次施药后7 d各药剂的防效分别为:77%氢氧化铜干悬浮剂73.11%、37.5%氢氧化铜悬浮剂67.43%、波尔多液64.78%、2.0%氨基寡糖素水剂51.14%、4%春雷霉素可湿性粉剂50.38%、3%多抗霉素可湿性粉剂45.46%、0.5%小檗碱水剂43.45%,植物激活蛋白防效最低仅为29.17%。【结论】77%氢氧化铜干悬浮剂、37.5%氢氧化铜悬浮剂和波尔多液3种矿物源农药防效较高,且更适合加工番茄产品出口的食品安全要求。

鲜杏采后病原菌鉴定及室内药剂筛选研究

【目的】确定新疆杏采后病害的主要病原菌并筛选有效防治药剂。【方法】采集新疆伊犁、库车、喀什等地的李光杏、小白杏、色买提杏等鲜杏品种,在室温或4℃条件下贮藏,对贮藏期采后病害的病原菌进行分离鉴定,针对主要病原菌进行室内药剂筛选。【结果】引起新疆三种鲜杏采后果实病害的病原菌有:粉红聚端孢霉(Trichothecium roseum)、链格孢霉(Alternaria alternata)、黑根霉(Rhizopus nigricans)、青霉(Penicillium freguentans)、灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)、毛霉(Mucor spp.)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、镰刀菌(Fusarium oxysporum)、黑曲霉(Aspergillus spp.)等9种真菌,其中黑根霉、灰葡萄孢霉、链格孢霉、青霉和粉红聚端孢霉为主要病原菌。精油A 1 000倍液对所有供试病原菌都有很强的抑菌效果,其对青霉、灰葡萄孢霉、链格孢霉、黑根霉、毛霉、镰刀菌的抑菌率均为100%,对黑曲霉的抑菌率也达97.87%。4℃贮藏条件下,精油A 500倍液和1 000倍液处理的鲜杏贮藏25 d时,杏果实发病率分别为0%、1.67%,贮藏32 d后,精油A 500倍液和1 000倍液处理的鲜杏发病率分别为10%、20%,精油A 500倍液和1 000倍液处理可显著延长4℃条件下鲜杏的贮藏时间。【结论】黑根霉、灰葡萄孢霉、链格孢霉、青霉和粉红聚端孢霉为新疆鲜杏采后贮期主要病原菌,精油A可作为鲜杏采后病害的有效防治药剂。

新疆吐鲁番地区三种甜瓜病毒病的发生与分子鉴定

【目的】明确吐鲁番地区西瓜花叶病毒(WMV)、小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)、南瓜蚜传黄化病毒(CABYV)的发生情况及三种病毒不同来源分离物间的遗传差异。【方法】采用分子检测方法,确定吐鲁番地区甜瓜CABYV、WMV、ZYMV的侵染比例,应用序列比对及构建系统发育树分析三种病毒,吐鲁番分离物与国内外其他分离物间遗传差异。【结果】吐鲁番地区40份病毒病样中WMV、ZYMV、CABYV分子检测阳性比例分别达87.5%、50%、30%。ZYMV吐鲁番分离物等部分国内外分离物NIB与CP蛋白之间存在蛋白切割位点Q/S,WMV、ZYMV吐鲁番分离物等部分国内外分离物DAG基序的氨基酸序列均为DAG。依据系统发育树分析将三种病毒吐鲁番分离物分别划分至不同的亚组。【结论】WMV、ZYMV为吐鲁番地区甜瓜病毒病的优势毒原,CABYV为吐鲁番地区甜瓜病毒病的主要病毒之一。CABYV、WMV吐鲁番分离物与国内部分省份分离物亲缘关系更近,ZYMV吐鲁番分离物XJturufan2与东欧、中东国家的分离物亲缘关系更近,ZYMV吐鲁番分离物XJturufan与国内部分省份分离物及美国、西班牙、日本等国分离物亲缘关系更近。

新疆籽瓜细菌性果斑病的发生与分子鉴定

【目的】明确新疆部分地区籽瓜细菌性果斑病发生情况,分析不同分离物16S^23S rRNA的ITS区序列,确定不同分离物该基因区遗传变异情况。【方法】采集并分离来自阜康、额敏、沙湾等地的籽瓜以及五家渠甜瓜的病原细菌,应用细菌ITS区通用引物对各分离物16S^23S rRNA的ITS区序列进行扩增测序,并在GENEBANK数据库中作序列比对确定所分离病原种类,同时分析该ITS区序列差异。【结果】从四个地区籽瓜或甜瓜病组织上分离获得分离物均为噬酸菌属燕麦种西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.Citrulli),研究获得的7个果斑病菌分离物与国内外已报道7个分离物间ITS区序列同源性达99.5%~100%,该区遗传序列间并无显著差异。【结论】新疆阜康、额敏、沙湾等地籽瓜均有细菌性果斑病发生,参与比对的细菌性果斑菌分离物16S^23S rRNA的ITS区基因序列高度保守,该基因区遗传变异较小。

六种生物农药防治加工番茄棉铃虫试验

【目的】研究六种生物源农药对加工番茄棉铃虫的防治效果,筛选出更加适合番茄制品出口食品安全要求的高效农药。【方法】采用田间小区试验,比较六种生物源农药对加工番茄棉铃虫的防效差异。【结果】施药后第10 d,各药剂的防效分别为:48%多杀菌素悬浮剂93.28%、600×108PIB/g棉铃虫核型多角体病毒水分散粒剂91.44%1、6 000 IU/mgBT可湿性粉剂83.88%、0.3%印楝素乳油73.44%、5%天然除虫菊素乳油68.21%、0.36%苦参碱水剂43.89%,对照化学药剂2.5%高效氯氟氰菊酯水乳剂为86.67%。【结论】48%多杀菌素悬浮剂6、00×108PIB/g棉铃虫核型多角体病毒水分散粒剂、16 000 IU/mgBT可湿性粉剂、0.3%印楝素乳油、5%天然除虫菊素乳油5种生物源农药的防效较好,且更适合加工番茄产品出口的食品安全要求。

干果贮藏害虫印度谷螟的研究

【目的】确定乌鲁木齐地区红枣、葡萄干、巴旦木、核桃、杏仁、杏脯等干果贮藏害虫种类及其优势种，研究优势贮藏害虫在乌鲁木齐的年生活史、不同食料对其发育历期的影响及自然天敌对其控制作用。【方法】采集不同来源贮藏害虫危害的干果，鉴定其贮藏害虫种类及优势贮藏害虫，以印度谷螟幼虫接种葡萄干研究印度谷螟在乌鲁木齐的年生活史。采用初产印度谷螟卵接种红枣、葡萄干、玉米粉、黄豆粉、人工饲料等五种食料，分析五种食料对印度谷螟卵～成虫发育历期的影响。采集野生麦蛾茧蜂成蜂接种印度谷螟幼虫，分析麦蛾茧蜂对印度谷螟幼虫的控制作用。【结果】印度谷螟在供试五种干果样品中危害比例为100％，花斑皮蠹和锯谷盗仅在部分核桃、杏干、巴旦木等干果中有危害，印度谷螟一年可发生三代。28℃、40％RH培养条件下，人工饲料、黄豆粉、红枣、葡萄干、玉米粉卵一成虫发育历期分别为（30．66±5．02）d、（53．98±5．30）d、（59．91±5．48）d、（68．54±6．16）d、（74．61±9．24）d。野生麦蛾茧蜂对印度谷螟5～6龄老熟幼虫的单雌寄生率达（43．80±20．63）％，麻痹率达100％。【结论】乌鲁木齐地区干果优势贮藏害虫为印度谷螟，印度谷螟在乌鲁木齐一年可发生三代，五种食料培养条件下印度谷螟卵一成虫发育历期由长至短依次为玉米粉〉葡萄干〉红枣〉黄豆粉〉人工饲料，人工饲料可作为印度谷螟人工繁殖饲料，野生麦蛾茧蜂对印度谷螟幼虫具有较好的控制作用，其具备较好的生防应用前景。

打瓜白粉病药剂防治技术研究

【目的】针对打瓜白粉病在新疆严重危害的现状,研究6种杀菌剂对打瓜白粉病的田间防治效果。【方法】采用田间小区试验,比较6种药剂的防效差异。【结果】两次施药后第14 d,10%苯醚菌酯悬浮剂5000倍液防效最高,防效达73.80%。10%苯醚菌酯悬浮剂10 000倍液、50%醚菌酯水分散粒剂3 000倍液、400 g/L氟硅唑乳油7 500倍液和25%乙嘧酚悬浮剂1 500倍液的防效也较好,药后14 d分别达69.69%、69.56%、68.48%和67.32%。【结论】4种药剂防效较好,推荐在生产中交替使用。提出了打瓜白粉病防治原则,明确了该病的初侵染来源和防治始期。防治打瓜白粉病的关键是抓住发病始期,选用高效杀菌剂及时喷药。

小儿术前口服咪唑安定、氯胺酮、阿托品混合液的临床观察

目的:比较小儿术前口服咪唑安定氯胺酮阿托品混合液与常规方法肌注安定阿托品的临床效果。方法:择期行小儿泌尿外科手术的男性小儿40例,随机分为2组。观察指标:对术前药的接受程度、给药后的血氧饱和度、镇静状态评分、与父母分离程度和静脉穿刺时的反应、对面罩的接受程度、苏醒时间以及术后并发症。结果:肌肉注射给药65％小儿不能接受、哭闹,给药30 min后,与父母难分离,静脉穿刺及麻醉诱导不平稳。口服组用药30min后,小儿安静、合作,易与父母分离,静脉穿刺及麻醉诱导无抵抗,两组差异显著(P<0.01)。结论:小儿术前口服咪唑安定氟胺酮阿托品混合液的临床效果优于常规传统方法肌注安定阿托品,是较为理想的麻醉前用药。

复方氯胺酮口服液对大鼠胃NMDAR_1、GABA_A R表达的影响

目的通过动物实验,观察复方氯胺酮口服液(Compound ketamine oral solution,CKOS)对大鼠胃NMDAR1、GABAA受体的影响,探讨其对胃肠动力的调节机制,并进一步评价其临床应用的安全性。方法选择雄性、健康SD大鼠50只,随机分10个时间点,每个时间点5只大鼠。0点为对照组,经灌胃器注2μL/g生理盐水,其他各点将CKOS[含氯胺酮(Ketamine,KET)100mg/kg,咪达唑仑(Midazulum,MID)10mg/kg]灌入胃内。采用免疫组化和原位杂交的方法,观察服药后10个点大鼠胃NMDAR1、GABAA受体的变化。显微(荧光)图像分析系统对切片进行采集分析。结果用CKOS后10min,NMDAR1表达开始减少,15～120min NMDAR1明显减少,240min时开始恢复,但仍然低于对照组。360min时仍未恢复到正常水平。用CKOS后30min,GABAA R表达开始增加,60～90min GABAA R表达明显增加,240min时开始恢复,360min时恢复到正常水平。结论CKOS抑制胃排空可能与其能够抑制胃NMDAR1受体的表达、增强GABAA受体的表达有关。

植物病毒分子检测方法研究进展

介绍了双链RNA、核酸杂交、多聚酶链式反应、核酸序列扩增、基因芯片等分子检测方法在植物病毒检测中运用的成功技术,并具体介绍了各种分子检测方法的原理和特点。

新疆橡胶草锈病病原菌的分离与鉴定

【目的】研究引起新疆伊犁橡胶草锈病的病原菌种类,为该病的有效防控提供科学依据。【方法】按照柯赫氏法则,分离田间橡胶草锈病病原并接种健康橡胶草以验证其致病性,采用显微镜观察橡胶草锈菌夏孢子形态,应用真菌通用引物NL1/NL4和锈菌通用引物ITS5-u/ITS4rust分别对锈菌的28S rDNA和ITS基因序列进行PCR扩增和测序,通过ITS序列构建系统发育树分析该菌种属地位。【结果】田间病样分离获得的锈菌可侵染健康株并且发病症状与田间症状一致。橡胶草锈菌夏孢子近球形、椭圆形或卵圆形,大小为(24~32×21~26)μm,淡黄色至栗褐色,有刺,单胞,壁厚为1~2.5μm。新疆伊犁橡胶草锈菌与山柳菊柄锈菌最为接近,其序列同源性达到了99.06%。【结论】引起新疆伊犁橡胶草锈病的病原菌为山柳菊柄锈菌。

复方氯胺酮口服液对胃肠动力的影响

目的:观察复方氯胺酮口服液(CKOS)对大鼠胃排空、肠转运速度、胃动素水平的影响,进一步评价其临床应用的安全性.方法:选Wister大鼠125只,随机分成5组,每组25只,每组又分成5个时点,每个时点5只.对照组(C组):蒸馏水1mL灌胃;调味剂组:调味剂溶液(含清甜素、巧克力香精、除苦剂)1mL灌胃;咪达唑仑组(MID组):咪达唑仑溶液1mL灌胃,剂量为10mg/kg;氯胺酮组(KET组):氯胺酮溶液1mL灌胃,剂量为100mg/kg;CKOS组:CKOS溶液(含氯胺酮剂量为100mg/kg、咪达唑仑剂量为10mg/kg加调味剂等)1mL灌胃.立刻用0.2%酚红1mL灌胃.分别于0、30、60、120、360min5个时点断头取血2mL,检测血浆胃动素.将30min时点对应的大鼠取出胃肠,观察色素在小肠移行速度,用分光光度计检测胃内色素残留率.结果:C组30、60min胃动素水平分别为219.6ng/L±13.05ng/L、235.4ng/L±22.43ng/L较0点水平178.3ng/L±15.32ng/L有显著的升高(均P<0.01),T组30、60min胃动素较0点也有明显升高(均P<0.01),且与C组对应时点相比,也有显著差异(均P<0.01),表明调味剂能促进胃动素的分泌.KET组、MID组、CKOS组30、60min胃动素水平都低于C组对应时点(均P<0.05或0.01).T组30min胃残留率为30.29%±7.42%比C组30min残留率(46.07%±6.01%)显著减少(P<0.01),T组小肠推进比显著大于C组(P<0.01).KET组、MID组和CKOS组的30min胃残留率显著大于C组(P<0.05或0.01).KET组小肠推进比显著小于C组(P<0.01).结论:CKOS口服减慢大鼠胃液体排空速度;CKOS对胃动素分泌有一定的抑制作用.

“新疆甜瓜霜霉病预测与控制的技术推广”通过验收

1月7日,由我院植保所承担的自治区科技厅成果转化项目＂新疆甜瓜霜霉病预测与控制的技术推广＂通过自治区科技厅专家组验收。该项目针对新疆甜瓜主产区——伽师县、岳普湖县和阿勒泰等地区甜瓜生产中的病害问题,通过3年甜瓜病害预测和控制技术的示范推广,在喀什地区和阿勒泰地区建立了甜瓜病害监测网络,建成了甜瓜霜霉病预测和控制的计算机技术分析平台。

瓜类褪绿黄化病毒及其系统进化分析

【目的】检测新疆南疆7个县/市瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV),进行系统发育分析,为新疆南疆CCYV预警和防控提供参考。【方法】于2019年,从中国新疆南疆7个县/市采集带有黄化特征的51份甜瓜叶片样品,RT-PCR进行CCYV的检测,进行特异性片段的克隆、测序和系统发育分析。【结果】中国新疆巴楚县、阿克苏市、莎车县、伽师县、疏勒县、疏附县均未检测到CCYV,而洛浦县的13份样本中,8份检出为CCYV阳性,检出率为61.53%,洛浦县CCYV特异性片段克隆测序获得了685 bp的核酸序列,与GenBank中的CCYV分离物外壳蛋白(Coat protein,CP)的一致性达到100%。所得序列与中国新疆(吐鲁番)、中国其他省、苏丹、日本、塞浦路斯、黎巴嫩的CP基因聚在I组(Group),沙特阿拉伯的分离物聚在Ⅱ组,伊朗的分离物聚在Ⅲ组。【结论】CCYV在中国新疆南疆洛浦县甜瓜产区发生,与中国新疆吐鲁番、中国其他省及周围国家的CCYV分离物亲缘关系很近,且群体遗传变异很小。

三种PCR引物法制备生物素标记的HpLV衣壳蛋白基因cDNA探针检测效果的比较

采用正义、反义引物及正义和反义引物双链PCR法制备了生物素标记的HpLV衣壳蛋白基因的cDNA探针。检测结果表明,三种PCR引物法标记的cDNA探针显色灵敏度均可达到10pg/μL,对目标基因DNA的检测灵敏度可达90pg/μL,但反义引物PCR法标记探针的检测效果要好于正义和反义引物双链PCR法制备的探针;在目标基因DNA浓度一定的情况下,探针的浓度对检测效果的影响并不大;正义、反义引物PCR法制备的探针可不经煮沸变性处理直接使用;用50ng/mL浓度的反义引物PCR法制备的生物素标记cDNA探针可检测到带毒啤酒花叶片和花瓣中的啤酒花潜隐病毒RNA。

不确定性知识表达的新方法——灰概率测度集

通过模拟人类对不确定性信息的描述和融合,提出了一种新的灰数描述方法,定义了灰概率测度集的概念及其交运算。灰概率测度集对"贫信息"及"外沿明确,内涵不明确"的不确定性问题进行描述;交运算对灰概率测度集描述的不确定信息"内涵"逐渐丰富和准确的过程进行表达。通过自助式移动机器人拓扑定位的实例,检验了灰概率测度集在模拟人类智能对不确定信息的表达和推理中的有效性。

手术前后小儿及家长心理调查分析及麻醉前用药途径的选择

目的:通过对手术前后小儿及家长心理状态及麻醉前用药途径选择的调查,了解他们的心理变化和对麻醉前用药途径的需求,为合理用药提供依据。方法:调查107例,3 d～14岁小儿及家长对手术的心理状态以及小儿和家长喜欢的麻醉前用药途径。结果:手术前绝大多数家长都表现为紧张或恐惧;手术种类不同,小儿及家长表现出不同的心理状态;年龄越小,小儿越闹家长术前越紧张;麻醉前用药途径口服给药最易被小儿接受。结论:手术和打针均可导致小儿及家长的恐惧,术前采用小儿易接受的经口给药途径实施麻醉前用药是缓解恐惧心理的有效措施。

基于多重RT-PCR技术检测新疆甜瓜主栽区3种病毒病及其分布

采用同源克隆的方法,从新疆感染病毒病的甜瓜中克隆获得WMV、CMV、ZYMV 3种病毒CP蛋白基因的部分片段。并基于单重RT-PCR扩增条件,采用单因素分析法,优化所获得多重RT-PCR的反应体系,利用多重PT-PCR体系对48份供试样品检测。结果表明,多重RT-PCR的检测结果与单重RT-PCR结果一致,说明构建的多重RT-PCR体系具有一定准确性和稳定性,可以用于WMV、CMV、ZYMV 3种病毒的快速检测、病源鉴定、阳性筛选等研究。通过分析甜瓜主要种植区病毒病的多重RT-PCR检测结果,初步得出新疆甜瓜主栽区3种病毒的分布现状与侵染形式,从而为病毒病的防治工作提供依据,以期对新疆瓜果生产中病毒防治,田间检测,流行病学调查以及抗病毒病甜瓜育种等研究提供相应的理论基础与依据。