一例猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与链球菌混合感染的实验室诊断

某规模化自繁自养猪场产房母猪出现流产,保育猪关节肿胀、倒地不起、大量死亡,为研究发病原因,采集流产胎儿、死亡仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和关节液,进行分子生物学检测,病毒和细菌分离鉴定,并检测不同胎龄母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体,结果显示猪繁殖与呼吸综合征病毒检测为阳性,使用PAM分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒,经序列鉴定为高致病性毒株;抗体结果表明四胎及以上母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率异常升高;病料分离的细菌经鉴定为猪链球菌,经实验室诊断确定猪场发病的原因为猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与猪链球菌混合感染。

PEDV变异株的分离鉴定和S1基因序列分析

为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)分离株,并对其S1基因进行序列分析,本试验从江苏2个猪场发病死亡仔猪的肠道组织分离病毒,接种至Vero细胞培养;通过实时荧光定量PCR方法鉴定PEDV、反转录PCR(RT-PCR)方法对PEDV S1基因进行扩增测序;并将10^(7.0)TCID_(50)/mL的分离毒株口服接种5头哺乳仔猪(2 mL/头),观察临床症状,统计发病率和死亡率。结果显示,经鉴定获得的2株分离株均为PEDV,分别命名为DJCY株和DJYJ株。分离毒株能在Vero上产生典型细胞病变,传代至F10代时病毒滴度分别为10^(7.80)TCID_(50)/mL和10^(8.16)TCID_(50)/mL。RT-PCR鉴别诊断S1基因测序和分析显示,2株PEDV均为变异株。接种分离株的哺乳仔猪发病率为100%,接种DJCY株的死亡率为80%,接种DJYJ株的死亡率为100%。体外和体内试验证实,2株分离毒株均为PEDV变异株,且毒力较强。

使用泰万菌素治疗鸡胚中鸡滑液支原体的效果试验

为了解泰万菌素对鸡胚中鸡滑液支原体(MS)的治疗效果,本试验将鸡滑液支原体分别以106.0变色单位(CCU)和105.0 CCU感染15日龄SPF鸡胚,并对感染后鸡胚注射泰万菌素和泰妙菌素,统计入孵蛋健雏率和孵化雏鸡肺脏感染情况。结果显示,无论MS以高剂量或低剂量感染SPF鸡胚,用药组入孵蛋健雏率均高于MS对照组,且MS+泰万菌素组效果优于MS+泰妙菌素组。对雏鸡肺脏支原体含量进行检测,MS对照组为24.8±0.84 CCU/0.1 mL,用药组为21.6~22.0 CCU/0.1 mL,二者差异显著。表明使用泰万菌素对被感染的种蛋进行治疗,可增加健雏率,减少雏鸡肺脏支原体含量,对种鸡场的净化有重要意义。

3型鸭病毒性肝炎的诊断与病毒的分离鉴定

江苏某鸭场5日龄雏鸭发病,并在发病后很快死亡,剖检可见肝脏肿大,有出血点或出血斑,采集雏鸭肝脏进行PCR鉴定,确定为3型鸭甲型肝炎病毒引发的鸭病毒性肝炎,建议鸭场紧急接种高免卵黄抗体;同时在实验室进行病毒的分离和鉴定:将死亡雏鸭肝脏接种10日龄鸭胚,分离到1株病毒,经纯净性检验、PCR鉴定和中和试验确定为3型鸭甲型肝炎病毒,命名为DHAV-3 JS株。将DHAV-3 JS株通过人工感染雏鸭,雏鸭死亡率为70%,表明JS株毒力较强。

伪狂犬活疫苗C株抗体消长规律及攻毒保护试验

应用中和试验法对伪狂犬活疫苗C株免疫仔猪进行抗体水平动态监测,结果表明,疫苗接种7 d产生中和抗体,42 d抗体水平达到高峰,180 d时抗体仍保持较高水平。攻毒试验证实,免疫后80%免疫仔猪获得保护。确定伪狂犬活疫苗C株免疫保护期可持续6个月。

种鸭源猪丹毒丝菌分离及血清学调查

从发生生产性能异常的2个种鸭群中分离到2株革兰阳性丝状菌,经16S rRNA基因序列分析鉴定为猪丹毒丝菌。采用多重PCR对分离株编码表面保护性抗原(spa)基因进行扩增,分别获得大小约1 000 bp和900 bp的片段,判定为spaC型和spaB型。毒力检测结果表明,2个分离株对小鼠的半数致死量(LD50)分别为103CFU/0.2 mL和≤102CFU/0.2 mL。药敏试验结果表明,分离株对青霉素类和大部分头孢菌素类抗生素敏感,对氨基糖苷类等药物具有明显的抗性。为进一步了解猪丹毒丝菌对鸭群的感染情况,本研究采用生长凝集试验对来源于3个不同鸭场的种鸭群进行血清学调查,结果,抗丹毒丝菌抗体阳性率(抗体效价≥16)分别为82%、35%和20%,表明鸭群中广泛存在猪丹毒丝菌感染。

1株低毒力鸭考诺尼亚菌的分离与鉴定

鸭考诺尼亚菌为革兰阴性、无鞭毛、不运动的杆菌，能引起鸭和鹅等呼吸道感染和渗出性败血症。本研究首次在国内鸭群中1株鸭考诺尼亚菌，基因序列分析表明，该分离株与已发表的考诺尼亚菌属其他菌株16SrRNA和rpoB基因序列的同源范围分别为99．8％和98％。动物回归试验表明，该分离株对雏鸭无明显的致病作用，但对鸭胚具有致死作用，鸭胚的半数致死量（ELD，。）为5．24×10。CFU／0．1mL。药敏试验结果发现，在所选的17种抗生素中，该分离株对多粘菌素B、克林霉素和卡那霉素耐药，对其余抗生素都高度敏感或中度敏感。

猪繁殖与呼吸综合征疫情与猪繁殖与呼吸综合征病毒基因型的相关性研究

本试验在暴发猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的广东某猪场进行,猪群暴发PRRS后立即封群。为研究猪场PRRS疫情和PRRSV基因型之间的相关性,在母猪饲料中全群添加抑制PRRS的泰万菌素100 mg/kg^200 mg/kg,持续90 d。统计猪场PRRS暴发到平稳期间的临床数据,并用RT-PCR检测的方法检测分娩母猪血清、脐带血、弱残仔猪和保育死淘猪病料。结果显示,猪群PRRS暴发时,存在PRRSV经典毒、高致病性野毒和高致病性疫苗毒3种毒株亚型;猪群PRRS平稳时,猪群只检测到PRRSV疫苗毒株1种亚型。表明猪群感染PRRSV类型越单一,猪群PRRS越平稳。

猪伪狂犬疫苗及评估

伪狂犬病（Pseudorabies，PR)是伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus，PRV)引起的髙度接触性传染病，主要通过接触和空气传播，家畜的主要症状有奇痒、发热、脑脊髓炎和繁殖障碍等症状，一旦疫病发生，该病毒可感染脑神经，形成“潜伏感染”，终身带毒，很难根除，给养殖业造成巨大的经济损失。

泰万菌素对鸡胚中鸡滑液支原体的抑制研究

为了解泰万菌素对鸡滑液支原体(MS)垂直传播的抑制作用,我们测定泰万菌素对MS-HB1株的最低抑菌浓度(MIC)。结果显示,泰万菌素对MS-HB1株的MIC为0.008μg/m L。然后将MS接种5日龄SPF鸡胚,3日后分别接种10MIC和50MIC泰万菌素,作用3日和5日后分别检测鸡胚中的MS。结果泰万菌素作用3日对鸡胚中MS的抑制率分别为30%和41.7%,与对照组相比差异不显著(P>0.05);作用5日对鸡胚中MS的抑制率分别为54.5%和70%,与对照组相比差异显著(P<0.05)。结果表明,泰万菌素对鸡胚中的MS有抑制作用,且作用时间对抑制效果影响较大。