颅中窝入路颞骨岩部胆脂瘤切除与面神经功能保护

目的 探讨经颅中窝入路颞骨岩部胆脂瘤切除的手术适应证、手术要点及面、听功能保护。方法 回顾性分析2006年1月至2021年1月我科经颅中窝入路手术治疗的颞骨岩部胆脂瘤病例的临床症状、体征、影像学特点、面神经修复方法、面、听功能保护、手术效果,总结分析颅中窝入路颞骨岩部胆脂瘤切除手术的适应证及手术要点。结果 接受颞骨岩部胆脂瘤外科切除的186例病例中,有56例患者采用颅中窝或颅中窝-乳突联合入路的手术方式。该组患者常见的临床症状分别为:听力下降(54/56,96.4%),面神经麻痹(42/56,75.0%)及耳漏(30/56,53.6%)。依据Sanna分型:迷路上型39例(69.6%),广泛型11例(19.6%),岩尖型6例(10.7%)。术前47例患者存在骨导听力,其中22例术后保留骨导听力,骨导听力保留率46.8%。手术涉及面神经的有36例(64.3%),其中20例行面神经减压术,1例行面神经端端吻合术,15例行面神经改道吻合术。术前面神经功能按House-Braekmann(H-B)法分级:Ⅰ级14例,Ⅱ级3例,Ⅲ级3例,Ⅳ级4例,V级10例,Ⅵ级22例。术后面神经功能H-B分级:Ⅰ级15例,Ⅱ级11例,Ⅲ级11例,Ⅳ级9例,V级1例,Ⅵ级9例。术后随访2-16年,1例患者术后5年复发,再次行手术切除。所有患者术后未发生硬膜外出血、颅内感染等并发症。结论 颅中窝入路是彻底切除迷路上、岩尖及部分广泛型岩部胆脂瘤、同时保留功能正常面神经和残留听力的最佳选择。面神经受损的患者可以依据损伤部位和程度的不同,采取减压、改道吻合或神经桥接移植以重建面神经功能。通过颅中窝入路切除岩部胆脂瘤,部分患者的听力有可能保留。

噪声暴露引起大鼠听觉器官线粒体DNA缺失

目的 探讨线粒体DNA(mitochondrialDNA ,mtDNA)缺失与噪声性聋的关系。方法 3月龄大鼠分噪声暴露组和无暴露对照组 ,各 2 0只。噪声暴露组暴露于 1 0 8～ 1 1 0dBSPL的白噪声4h/d ,共 40d ;对照组不接触噪声。噪声暴露结束 2周后测试两组大鼠的听性脑干反应 (auditorybrainstemresponse ,ABR)阈值 ,聚合酶链反应 ( polymerasechainreaction ,PCR)检测其耳蜗、蜗核、颞叶脑组织和颞肌组织中是否存在mtDNA4834缺失 ,对存在的缺失进行定量分析 ;PCR产物进行克隆、测序。结果 噪声暴露组大鼠出现永久性阈移 ,其ABR平均阈值 ( x±s,下同 )为 ( 75 2 5± 6 1 7)dBSPL ( 4 0耳 ) ,对照组为 ( 34 75± 3 80 )dBSPL( 4 0耳 ) ,两组ABR阈值的差异具有非常显著性意义 (P<0 0 1 )。噪声暴露组大鼠的耳蜗、蜗核、颞叶脑组织中mtDNA4834缺失发生率 ( 2 4 /40、1 6/2 0、1 8/2 0 )明显高于对照组 ,两组之间的差异具有非常显著性意义 (P <0 0 1 ) ;而与听觉无关的颞肌组织中mtDNA4834缺失发生率 ( 2 /2 0 )在两组中均很低 ,两组之间的差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;噪声暴露组大鼠的耳蜗、蜗核、颞叶脑组织和颞肌中mtDNA4834 缺失占总mtDNA的平均百分率 ( x±s)分别为( 0 9988± 0 5 5 1 6)× 1 0 - 2 %、( 1

人听觉器官线粒体DNA^(4977)缺失与老年聋的关系

目的 探讨mtDNA4 977缺失与老年聋的关系。方法 采用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)及套式PCR技术 ,扩增正常及缺失区mtDNA片段 ,pGEM TEasy载体连接扩增产物 ,重组、克隆目的DNA进行序列分析。检测 6 7耳 (4 1例 )颞骨切片、2 1例蜗核 (双侧 )、2 0例颞叶脑组织、2 0例心肌和 2 2例肝脏组织中mtDNA4 977缺失的发生率 ,根据患者生前的临床资料分为老年组与非老年组、老年聋组与老年听力正常组进行比较分析。结果 被检所有标本均成功扩增到正常mtDNA编码tRNA和ND1片段的NADH基因。在老年人多种组织中检测到了mtDNA4 977缺失 ,老年组不同器官组织中mtDNA4 977缺失发生率均明显高于非老年组 ,两组之间的差异具有显著性意义 (χ2 检验 ,P <0 0 5 )。老年聋患者颞骨切片和蜗核组织中mtDNA4 977缺失的发生率明显高于老年听力正常组 ,其差异具有显著性意义 (χ2 检验 ,P <0 .0 5 ) ;而与听觉无关的心肌和肝脏组织中mtDNA4 977缺失发生率在两组之间差异无显著性。结论 mtDNA4 977缺失的发生与老化有关 ;内耳和蜗核组织中mtDNA4 977缺失与老年聋的发生有关。

周围性面瘫

面神经是人体内居于骨管中最长的神经,其穿行骨管约3.1～3.3cm,是最易遭受损伤的神经。从大脑皮质的中央前回到面神经末梢之间任何部位的外伤、炎症、肿瘤、病毒及颞骨手术和变性等病变均能引起面部表情肌的部分或完全麻痹,但大多数面瘫是由颞骨内病变所引起的周围性面瘫。

噪声暴露引起耳蜗损伤机制的研究

噪声是常见的职业性伤害和听力致残因素,预防噪声性耳聋的发生及降低其听觉损害的程度一直是我们研究的重要课题。近年的研究发现噪声暴露可引起耳蜗内活性氧、活性氮自由基及金属蛋白酶增加,毛细胞内DNA损伤,Caspase-3激活,AIF及EndoG的转移等一系列变化,最终导致毛细胞死亡,以凋亡为主。噪声损伤机制的研究为预防和治疗噪声性耳聋开辟了新的思路。

蜗后性听力减退29例病因分析

目的 探讨蜗后性低频听力减退的发病原因。方法 复习 1988～ 2 0 0 2年 2 9例原因明确的蜗后性低频听力减退患者的临床特点和听力学检查结果。结果 头部外伤、听神经瘤、周围神经病、遗传性聋、多发性硬化和脑干疾病均可表现为蜗后性低频听力减退 ,其共同的特点是 :低频听力减退 ,诱发性耳声发射正常或至少在部分频率正常 ,不受对侧噪声抑制 ,引不出镫骨肌反射 ,听性脑干反应 (auditorybrainstemresponse ,ABR)异常。结论 以耳声发射正常和ABR异常为主要特征的听功能障碍是一组症状群 ,可为不同病因引起的听神经和 (或 )听性脑干病变的表现 ,建议对这一组听力学表现称之为蜗后性低频听力减退。

大鼠不同组织器官线粒体DNA缺失定量分析及其与老化的关系

目的 :探讨线粒体DNA缺失的组织器官间差异及其与老化和老年性耳聋的关系。方法 :依月龄将大鼠分为青年、中年和老年组 ;测试ABR阈值后从其不同器官组织和外周血中提取DNA ;PCR检测线粒体DNA4 83 4缺失 ,定量分析 ;克隆、测序。结果 :①随年龄增加 ,大鼠的ABR平均阈值明显升高 ;②所有老年大鼠的耳蜗、蜗核、大脑、心肌 (1例除外 )、肝脏和肌肉组织中均存在mtDNA4 83 4缺失 ,外周血仅少数缺失 ;③中青年组线粒体DNA4 83 4缺失的发生率和缺失占总mtDNA的百分比均低于老年组 (P <0 0 1) ;④mtDNA4 83 4缺失存在明显的器官组织间差异 ,肝脏组织中缺失占总mtDNA的百分比最高。结论 :大鼠多种器官组织中mtDNA4 83 4缺失随增龄而增加 ,而且存在器官组织间差异 ,检测外周血白细胞的mtDNA缺失并不能反映体内各器官组织中mtDNA缺失的发生情况 ,与听觉有关的耳蜗、蜗核组织中mtDNA缺失与老年聋的发生有关。

外伤性周围性面瘫的诊断及手术治疗

颜面及头部外伤引起的周围性面瘫在耳科的临床实践中并不少见，特别是随着社会经济的发展，交通事故引起的外伤性面瘫近年有所增加，其中头部外伤引起的颞骨骨折是导致周围性面瘫的主要原因。

颞骨岩部胆脂瘤切除术及面神经保护和修复

目的分析总结颞骨岩部胆脂瘤的外科治疗、术中面神经功能的保护及修复方法及疗效。方法回顾性分析解放军总医院2000年1月至2012年12月79例手术治疗的颞骨岩部胆脂瘤病例,按House-Brackmann法对面神经功能进行分级,根据术中探查所见,依据面神经损伤的部位和范围分别采用面神经减压、吻合、耳大神经移植、面神经-舌下神经吻合术等方法进行修复;随诊1年以上,资料齐全的48例患者,根据手术前后面神经功能的分级进行比较,分析治疗效果。结果 79例岩部胆脂瘤患者经过手术切除病灶,术中发现面神经受累部位以迷路段最为多见。面神经损伤修复方法:面神经减压48例(60.76%);面神经端端吻合5例(6.33%);面神经改道吻合3例(3.80%);耳大神经移植修复面神经3例(3.80%);面神经舌下神经吻合10例(12.66%)。剩余10例术中面神经未处理。随访1年以上,资料完整的48例患者预后:面神经减压:29例,术前面神经功能Ⅰ级13例,Ⅱ级1例,Ⅲ级7例,Ⅳ级2例,Ⅴ级4例,Ⅵ级2例;术后Ⅰ级22例,Ⅱ级2例,Ⅲ级1例,Ⅳ级3例,Ⅴ级1例。端端吻合:4例;术前Ⅰ级1例,Ⅴ级3例;术后Ⅱ级1例,Ⅲ级3例。改道吻合:3例;术前Ⅴ级1例,Ⅵ级2例;术后:Ⅲ级2例,Ⅳ级1例。耳大神经移植:2例;术前均为Ⅴ级;术后:Ⅳ级1例,Ⅴ级1例。面神经舌下神经吻合术:7例;术前Ⅴ级4例,Ⅵ级3例;术后:Ⅲ级1例,Ⅳ级4例,Ⅴ级2例。3例术中未处理面神经病例,面神经功能无变化。结论颞骨岩部胆脂瘤术中需仔细保护面神经,发现面神经损伤后应及时修复,依据损伤程度和范围的不同,采取不同的修复方式可以使患者获得较好的预后效果。

温度变化对豚鼠离体前庭毛细胞内钙离子浓度的影响

目的为探讨温度改变诱发前庭眼震的机理。方法酶孵育后机械分离成功豚鼠前庭毛细胞（ＶＨＣ）３４个，Ｆｌｕｏ－３荧光染色后，改变其外环境的温度，用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）记录静息状态下及温度改变时ＶＨＣ内钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化。结果将分离的ＶＨＣ分为两型，ＬＳＣＭ下钙离子分布图像与相差显微镜下所见细胞外形相似，其钙离子分布在核区略高。１８／２２的Ⅰ型与７／１２的Ⅱ型ＶＨＣ其细胞内［Ｃａ２＋］ｉ随温度的升高而增加，随温度的降低而减少，呈规律性变化，但Ｉ型ＶＨＣ的变化幅度较大；对照试验观察到变温仅对少数（２／９）耳蜗外毛细胞（ＯＨＣ）内［Ｃａ２＋］ｉ有影响。本研究结果显示变温对ＶＨＣ有直接刺激作用，表现为ＶＨＣ内［Ｃａ２＋］ｉ变化。结论对冷热诱发眼震的解释，除Ｂａｒａｎｙ的热对流学说外，尚存在冷热对ＶＨＣ的直接作用。

热休克蛋白70抗体检测对自身免疫性聋诊断的意义

目的 分析自身免疫性聋的听力学特点 ,探讨用免疫印迹法 (Westernblot)检测热休克蛋白 70抗体在自身免疫性耳聋诊断中的意义。方法 自身免疫性聋 14例 2 8耳 ,其它感音神经性聋 8例 16耳 ,正常对照 6例 12耳 ,采用免疫印迹法检测各组受试者血清中的热休克蛋白 70抗体 ,并分别作临床听力学检查。结果 自身免疫性耳聋者纯音听力图多数为平坦型 ,TEOAE和 或DPOAE未引出 ,听性脑干反应多数正常 ,轻、中度耳聋者可引出镫骨肌声发射 ,该组 8例 ( 5 7.1% )热休克蛋白 70抗体阳性。其它感音神经性聋者纯音听力图多数为高频减退型和平坦型 ,TEOAE和DPOAE未引出 ,重度耳聋者ABR未引出 ,轻、中度耳聋者可引出镫骨肌声发射 ,1例 ( 12 .5 % )热休克蛋白 70抗体阳性。正常对照组 1例 ( 16 .7% )热休克蛋白 70抗体阳性。结论 免疫印迹法检测热休克蛋白 70抗体对自身免疫性耳聋诊断有参考价值 ,对该病的确诊还应结合临床听力学特点。

胆碱能受体激动剂对豚鼠离体前庭毛细胞内钙离子浓度的影响

目的：通过观察胆碱能受体激动剂对离体前庭毛细胞内钙离子浓度的影响，探讨前庭毛细胞膜所存在的胆碱能受体及其分型、受体的脱敏现象。方法：用胶原酶消化后机械分离法，分离豚鼠壶腹嵴前庭毛细胞（VHC)， 钙敏荧光探针 Fluo-3 荧光染色，用激光扫描共聚焦显微镜记录VHC细胞内游离钙离子浓度（[Ca2+]i）的动态变化。结果：①胆碱能M和N型受体激动剂乙酰胆碱(ACh)、氨甲酰胆碱(CCh)均可引起离体VHC内[Ca2+]i的升高；N型受体激动剂溴化乙酰胆碱(Ach-Br)仅在高浓度（10 mmol/L）时引起部分（4/5）离体VHC内[Ca2+]i升高，在低浓度(1mmol/L)时影响不明显；②ACh、CCh 引起 VHC内[Ca2+]i升高在同一细胞不能重复出现，存在脱敏现象；而不同类型的受体激动剂先后作用时无脱敏现象；③阿托品对ACh、CCh引起的VHC内[Ca2+]i的升高有抑制作用；加入 0.1 mmol/L 阿托品可使 1 mmol/L ACh 或 CCh 引起的 VHC 内[Ca2+]i升高的峰值明显减小(t检验均有极显著差异，P<0.01)。结论：豚鼠前庭毛细胞膜上存在 M 型和 N 型两种受体，M 型受体激动剂引起 VHC 内[Ca2+]i的升高较 N 型明显。阿托品对 M 型受体激动剂引起的[Ca2+]i 升高有抑制作用；前庭毛细胞膜上的胆碱能受体对同一类型的激动剂有脱敏现象。

豚鼠壶腹嵴毛细胞内钙离子活动及ATP的影响

目的 探讨离体前庭毛细胞（ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒ ｈａｉｒｃｅｌｌｓ，ＶＨＣ）去极化时细胞内钙离子活动特征及内耳活性物质ＡＴＰ对离体ＶＨＣ内钙离子浓度的影响及其机制。方法 采用酶孵育后机械分离法分离豚鼠壶腹嵴ＶＨＣ，６ μｍｏｌ／Ｌ钙荧光探针Ｆｌｕｏ３ 染色，利用激光扫描共聚焦显微镜（ｌａｓｅｒ ｓｃａｎｎｉｎｇｃｏｎｆｏｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ＬＳＣＭ） 记录静息状态下、加入高Ｋ＋ 液及不同浓度ＡＴＰ时代表ＶＨＣ内［Ｃａ２＋ ］ｉ 的荧光强度相对值的变化。结果 细胞外有Ｃａ２＋ 存在时，７５ ｍｍｏｌ／ＬＫ＋ 可引起所观察５ 个ＶＨＣ内［Ｃａ２＋］ｉ均升高，细胞体和皮板区的［Ｃａ２＋］ｉ 变化一致；在细胞外无Ｃａ２＋ 的情况下，所观察的５ 个ＶＨＣ 中，高Ｋ＋ 并不能引起细胞内［Ｃａ２ ＋］ｉ 升高。在细胞外存在Ｃａ２ ＋ 时，不同浓度（１ ．０ ｍｍｏｌ／Ｌ，０．１ ｍｍｏｌ／Ｌ）ＡＴＰ可引起绝大多数（１８／１９）ＶＨＣ 内［Ｃａ２＋ ］ｉ 迅速升高，达高峰后下降，恢复至静息时的水平；细胞外无Ｃａ２ ＋ 时，ＡＴＰ仅引起极少数（１／１０）ＶＨＣ内［Ｃａ２＋］ｉ 升高；而对照组加入与ＡＴＰ等体积的Ｈａｎｋ 液，不引起ＶＨＣ

周围性面瘫的外科治疗

面神经穿行于颞骨之中，是人体内居于骨管中最长的神经，行程复杂，易遭受损伤。当外伤、炎症、肿瘤及医源性损伤等有害因素引起面神经肿胀时，

噪声损伤引起耳蜗外毛细胞凋亡时细胞核内单链DNA的产生及EndoG的转移

目的观察噪声损伤后耳蜗外毛细胞内单链DNA和EndoG的变化,探讨耳蜗外毛细胞的死亡机制。方法豚鼠随机分为噪声暴露组、MNNG耳蜗灌流组和对照组(每组各12只);小鼠随机分为噪声暴露组和对照组(每组12只)。分离解剖耳蜗后,用碘化丙啶(PI)染色细胞核、Pholloidin染色F-actin,免疫荧光抗体分别染色单链DNA(ssDNA)、核酸内切酶G(Endonuclease G EndoG)和凋亡诱导因子(Apoptosis inducing factors,AIF),制备耳蜗铺片,激光共聚焦显微镜下观察凋亡和坏死毛细胞内的荧光信号变化。结果(1)暴露于120dBSPL的白噪声环境中每天4小时,连续2天后引起豚鼠和小鼠耳蜗外毛细胞凋亡时,其细胞核内产生ssDNA,而在正常细胞内没有三ssDNA;(2)在正常情况下,EndoG分布于耳蜗毛细胞的细胞核外,在暴露于上述噪声后发生凋亡和坏死的豚鼠耳蜗外毛细胞中,EndoG从细胞核外转移到细胞核内,细胞核中的EndoG显著增加;(3)豚鼠耳蜗外淋巴灌流烷化剂MNNG后发生耳蜗外毛细胞凋亡和坏死,在凋亡和坏死的耳蜗外毛细胞中,AIF自线粒体转移到细胞核,其变化与噪声损伤引起耳蜗外毛细胞凋亡和坏死时一致。结论噪声刺激或烷化剂MNNG灌流后,造成耳蜗外毛细胞DNA损伤,产生ssDNA,引起AIF和EndoG自线粒体释放,激活Caspase-3,AIF和EndoG进一步向细胞核转移,最终使细胞核内的DNA降解,导致耳蜗毛细胞的死亡。

老年性聋的临床听力诊断

近年来随着人口的老龄化，65岁以上老年人口的增长速度超过人口总数的增长速度，据专家预测，到2030年20％的人口将超过65岁。2006年的一项调查显示，在65岁以上的老年人中，30％～50％罹患老年性聋。据报道，在美国61～70岁的老年人中，1／3有听力障碍，而85岁以上的老年人80％有听力疾患。老年性聋不仅直接导致老年人不同程度的交流障碍，而且使老年人孤立于社会之外，可能进一步造成焦虑、抑郁、认知障碍，影响老年人的正常生活，已经成为严重的社会问题。

内耳淋巴液压力及其对内耳功能的影响

本文就内、外淋巴压力的测量方法，正常和实验性内淋巴积水耳内、外淋巴压力的变化及其对内耳功能的影响进行综述。认为正常耳内、外淋巴压力相等，且有一致性变化；实验性膜迷路积水早期，内、外淋巴压力变化一致，但已有内耳功能损害；内淋巴囊阻塞米后5周以上，即积水晚期，多数出现内淋巴压力增高，内、外淋巴压力有“分离”现象，即内、外淋巴出现压力梯度。内、外淋巴压力梯度的存在可能引起内耳微机械和微循环改变而导致内耳功能的损害，但不是唯一因素。

听觉器官线粒体DNA缺失在老年聋发病中的意义

目的 探讨听觉器官中线粒体DNA缺失在老年聋发病中的意义。方法:饲养不同年龄组的大鼠,测试ABR阈值,PCR检测其耳蜗、蜗核、大脑、颞肌和外周血中是否存在mtDNA^(4834)缺失,对存在的缺失进行定量分析;PCR产物进行克隆、测序。结果:老年组大鼠的ABR平均阈值为92.22±10.60dBSPL(n=20),中年组为42.75±5.73dBSPL(n=24),青年组为30.50±1.54dBSPL(n:24),老年组大鼠的ABR阈值明显高于中年组和青年组,其差别具有非常显著性的意义(方差分析,P<0.01);(2)所有老年大鼠的听觉器官和颞肌中均存在mtD-NA^(4834)缺失,其缺失发生率高于中年组,青年组mtDNA^(4834)缺失发生率最低;(3)定量分析显示不同年龄大鼠听觉器官中mtDNA^(4834)缺失占总mtDNA的百分比不同,老年组mtDNA^(4834)缺失占总mtDNA的百分比高于中年组。结论:老年大鼠的ABR阈值明显升高,其包括耳蜗、蜗核在内的多种组织中普遍存在的mtDNA^(4834)缺失,提示mtDNA缺失在老化和老年聋的发生中具有重要意义。

耳科学的发展与展望

耳科学在人类与耳部疾病的斗争中兴起于１９世纪，在本世纪随科学技术的发展而获得迅速发展，特别是抗菌素和手术显微镜的出现，使耳显微外科技术不断提高，不仅能彻底地祛除耳部感染，而且可以有效地提高听力。耳科学家在聋病的治疗过程中，已能够有效地治疗传导性耳聋，但仍面临着治疗神经性耳聋的挑战，在现代科学技术革命的推动下，随着分子生物学、细胞生物学等新技术的发展，在２１世纪。