西洋参环氧角鲨烯环化酶基因的克隆、分布与分析

目的克隆西洋参皂苷合成下游途径关键酶-环氧角鲨烯环化酶(oxidosqualene cyclases,OSC,EC 4.2.1.B2),分析基因功能及其在不同组织中的表达。方法采用大规模ESTs测序和cDNA末端扩增(RACE)技术,对西洋参中参与达玛烷皂苷合成的环氧角鲨烯环化酶基因(OSC)进行克隆和研究。结果获得了西洋参环氧角鲨烯环化酶(OSC)基因全长cDNA,命名为PqDS(GenBank注册号:GU997679),其核苷酸序列长度为2 310 bp,含有1个开放阅读框编码769个氨基酸的蛋白。保守结构域搜索显示PqDS含有环氧角鲨烯环化酶(OSC)共有的活性位点和保守基序。信号肽分析(Singal P3.0)表明西洋参PqDS属于非分泌型蛋白。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)研究了PqDS基因在各个器官中的表达,结果显示在花中高表达,根、叶和茎中表达量相对较低。结论首次克隆了西洋参环氧角鲨烯环化酶(PqDS)基因全长序列,为研究该酶在植物体内的表达、功能与作用机制奠定了基础。

淮南矿业发展金融产业服务实体经济探析

国有企业是国民经济发展的主力军,金融产业应给国有企业发展以服务和支持,全面深化金融体制改革,建立促进宏观经济稳定、支持实体经济发展的现代金融体系,对推动金融改革发展提出了新的要求,为国企金融产业科学发展指明了方向;对大型国企淮南矿业金融产业如何从服务实体经济中实现自身壮大发展,更好地推动实体经济发展、实现良性互动发展进行探讨。

项目驱动教学在药用植物学教学中的研究与应用

针对传统药学人才培养模式下学生实践能力薄弱的状况,开展了药用植物学教学中项目驱动教学的实践。结合教学实践,阐述了项目驱动教学模式的理论基础、内容框架、主要特点和应用方法,指出了不足和解决办法。

罗汉果GAPDH基因的克隆及其在基因表达分析中的应用

目的克隆罗汉果甘油酸-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH,EC 1.2.1.12)基因,分析其在基因表达定量研究中其作为内部参照基因的可行性。方法采用同源克隆和cDNA末端快速克隆技术,以罗汉果cDNA为模板扩增GAPDH基因的保守区片段。结果获得了罗汉果GAPDH保守区序列cDNA,命名为SgGAPDH(GenBank注册号:KC410810),序列长度为627 bp,编码209个氨基酸的多肽。系统发育分析表明,SgGAPDH属于植物甘油酸-3-磷酸脱氢酶家族。半定量PCR分析表明罗汉果GAPDH基因在不同组织中表达很稳定。以其作为内部参照基因,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)研究了异戊烯基焦磷酸异构酶(Isopentenyl-diphosphate delta isomerase)的组织表达规律。结果显示SgGAPDH具有良好的扩增效果和重现性。结论首次克隆了罗汉果GAPDH基因,明确了该序列在基因表达分析中的内参照作用,为罗汉果甜苷生物合成基因的研究提供了条件。