美国白蛾丝素蛋白基因的鉴定、时空表达及取食不同寄主植物后的表达响应

美国白蛾Hyphantria cunea Drury被列为我国林业检疫性害虫,其l~4龄幼虫具有吐丝结网幕的习性。为探究丝素蛋白基因的表达特性,本研究利用PCR技术克隆了美国白蛾的HcP25(Genbank登录号:OL625670)、HcFib-H(Genbank登录号:OL625672)、HcFib-L(Genbank登录号:OL625671)3条丝素蛋白基因,并进行生物信息学分析;利用RT-qPCR技术检测美国白蛾3条丝素蛋白基因的表达特性。结果表明:3条丝素蛋白基因序列比对均与车前灯蛾Arctia plantaginis丝素蛋白一致性最高,系统进化分析显示丝素蛋白HcP25、HcFib-H、HcFib-L在鳞翅目不同科之间在出现较大的分化。RT-qPCR试验结果显示HcP25、HcFib-H、HcFib-L 3基因相对表达量与网幕产生高峰期(1龄、2龄)相一致。3种丝素蛋白均在丝腺中特异性高水平表达,在头部及脂肪体中有少量表达。美国白蛾幼虫取食不同寄主植物后,3种丝素蛋白基因呈现不同的表达规律;取食杨树Populus L.处理组中HcP25与HcFib-H基因相对表达量极显著高于取食其它寄主处理,而取食山樱花Cerasus serrulata var.lannesiana和日本晚樱Cerasus serrulata处理组中HcFib-L基因表达量最高。研究结果为进一步探究丝素蛋白介导的美国白蛾对不同寄主的适应机制及其扩散机制奠定基础,也为开发美国白蛾防治新方法提供了潜在的基因靶标。

圆锥绣球‘北极熊’组培快繁体系的建立

为了探索木本花卉圆锥绣球的组培快繁体系的建立,本研究以‘北极熊’品种的幼嫩的茎尖和带腋芽的茎段为外植体,探索了适宜的外植体的采集时间、预处理及消毒方法、适宜的启动培养、增殖培养、生根培养基及培养方法。结果表明:适宜的茎段外植体采集时间为4月份;预处理及消毒方法为:将枝条先用75%百菌清1000倍液浸泡约10 min后冲洗,再用洗衣粉溶液浸泡约5 min,然后流水冲洗1~1.5 h,然后在超净工作台内,用75%酒精浸泡消毒60 s,无菌水冲洗3~5遍后,再用0.1%~0.2%HgCl2消毒(4+4)min,然后用无菌水反复冲洗3~5次,其成活率达76.7%。启动培养的最佳配方为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.06 mg/L,诱导率可达84.2%。较适宜的增殖配方为:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,附加蔗糖30 g/L,增殖系数达6.0。适宜的生根培养基为:1/2MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,附加蔗糖20 g/L,生根率达83.3%,平均根长2.7 cm。本研究结果对圆锥绣球‘北极熊’的组培快繁提供了技术支持。