miR-9500靶向SMAD2调控肺腺癌细胞的迁移和侵袭

目的探讨miR-9500通过靶向SMAD2调控肺腺癌细胞迁移侵袭的相关分子机制。方法通过生物信息学分析筛选出miR-9500的核心靶基因,并对其进行GO功能和KEGG信号通路富集及生存分析。预测miR-9500与其关键靶基因SMAD2之间的靶向结合位点,双荧光素酶报告实验验证miR-9500与SMAD2之间是否存在直接靶向关系,qRT-PCR和Western blot检测miR-9500对SMAD2 mRNA和蛋白表达水平的影响。划痕、Transwell实验及基质胶侵袭实验分析miR-9500对肺腺癌细胞迁移侵袭能力的影响。结果miR-9500核心靶基因主要富集于癌症通路、TGF-β信号通路和黏着斑信号通路等。排名前10的核心靶基因中,只有VAMP2、SMAD2及RXRA的表达水平与肺腺癌患者的总生存期显著相关。miR-9500可靶向结合SMAD2来下调SMAD2的表达水平。且过表达miR-9500可显著抑制肺腺癌细胞的迁移和侵袭能力,并显著降低迁移侵袭标志蛋白MMP2、MMP9的表达水平。结论miR-9500可通过靶向SMAD2抑制肺腺癌细胞的迁移侵袭,其可能作为抑癌因子在肺腺癌的发生发展中发挥重要调控作用。

E3泛素连接酶HECW2在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:采用生物信息学方法分析E3泛素连接酶(HECW2)在胃腺癌组织中的表达及其临床意义,为寻找胃腺癌诊断和预后生物标志物提供新的线索。方法:用R语言分析HECW2在泛癌中的表达及其与泛癌预后的关系。借助UCSC Xena、HPA、Kaplan-Meier Plotter等数据库分析HECW2在胃腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。采用WB法检测中国人胃腺癌组织及其癌旁组织中HECW2蛋白水平以验证数据库中的分析结果。借助TIMER和Cibersort数据库分析HECW2与胃腺癌免疫浸润的关系。通过LinkedOmics数据库对胃腺癌中HECW2进行GO功能分析和KEGG信号通路富集分析及相关性基因分析。结果:生物信息学分析结果表明,33种不同类型肿瘤中,包括胃腺癌在内的12种肿瘤中HECW2呈显著高表达(均P<0.05),WB法结果显示,中国人胃腺癌组织中HECW2也呈显著高表达(P<0.05)。HECW2表达水平越高,胃腺癌患者OS越短,包括CD4~+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞在内的免疫细胞浸润丰度越高(均P<0.01)。此外,HECW2相关信号通路主要富集于细胞外基质受体相互作用、黏着斑、细胞黏附和氧化磷酸化等生理病理过程(均P<0.01)。结论:HECW2在胃腺癌组织中呈显著高表达且其与胃腺癌预后不良和免疫细胞浸润密切相关,有成为胃腺癌预后标志物和治疗靶点的潜力。

miRNA在肺腺癌中的作用及机制研究进展

肺腺癌是临床上常见的恶性肿瘤之一,其早期症状不明显且易发生转移,往往发现时已是中晚期。miRNA参与调控肺腺癌细胞的增殖、凋亡、周期、侵袭、迁移等多个生物学过程,与肺腺癌的发生、发展密切相关。鉴于miRNA稳定性高、易于检测且具有一定的组织特异性,有望成为理想的肺腺癌生物标志物,并在肺腺癌的诊断、治疗及预后中发挥重要作用。

羟基红花黄色素A通过Akt/mTOR-自噬通路抑制结直肠癌细胞增殖迁移和化疗耐药

近年来结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的临床治疗已取得很大进展,但化疗耐药仍是降低结直肠癌患者生存率的主要原因之一,因此改善化疗耐药是目前亟待解决的问题。该研究旨在探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)在结直肠癌细胞增殖、迁移及5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)化疗耐药中的调控作用及相关分子机制。以结直肠癌细胞HCT116和HT-29为研究对象,首先通过MTT实验和克隆形成实验检测分析HSYA对结直肠癌细胞增殖的影响;其次,通过细胞周期实验检测分析HSYA对结直肠癌细胞细胞周期的影响;再者,通过划痕实验、Transwell实验检测分析HSYA对结直肠癌细胞迁移的影响。在此基础上探究分析HSYA对结直肠癌细胞5-FU化疗耐药性的影响及相关分子机制。结果显示,HSYA可显著抑制结直肠癌细胞增殖和迁移,并使CRC细胞周期阻滞于G0/G1期;同时,HSYA可显著改善结直肠癌细胞的5-FU化疗耐药性。吖啶橙染色实验与Western blot结果均表明,HSYA与5-FU联合处理组结直肠癌细胞的自噬活性显著高于5-FU单药处理组。且相比于5-FU单药处理组,HSYA与5-FU联合处理组结直肠癌细胞中Akt和mTOR的磷酸化水平显著降低,即联合处理组结直肠癌细胞中Akt/mTOR信号通路下调。综上,HSYA可能通过Akt/mTOR信号通路来上调CRC细胞自噬活性,进而抑制结直肠癌细胞增殖迁移并改善其5-FU化疗耐药性。

白藜芦醇联合伊立替康治疗结直肠癌的分子作用机制研究

该研究旨在探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)联合伊立替康(irinotecan,IRI)治疗结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的作用机制。笔者借助数据库分别获取RES、IRI及CRC的靶点,作韦恩图得到RES联合IRI治疗CRC的作用靶点,并对其进行蛋白功能聚类、GO和KEGG富集分析。构建蛋白互作(PPI)网络图,并进行核心靶基因筛选与靶点-信号通路网络图构建;借助IGEMDOCK对核心靶基因分子对接。分析关键靶基因表达水平与CRC预后、免疫浸润的关系,并利用体外细胞实验探究分析RES联合IRI治疗CRC的相关分子机制。结果显示共获得63个RES联合IRI治疗CRC的潜在靶点,且蛋白功能聚类分析发现约23%为跨膜信号受体、22%为蛋白质修饰酶、14%靶点为代谢物相互转化酶。这些靶基因GO生物过程(BP)主要富集于蛋白质自身磷酸化,GO细胞组分(CC)主要富集于受体复合物和细胞膜等,GO分子功能(MF)主要富集于跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性;KEGG信号通路主要富集于中心碳代谢。RES联合IRI治疗CRC的关键靶点为PIK3CA、EGFR、IGF1R,这三者均与CRC免疫浸润显著正相关,分子对接结果显示PIK3CA与RES、IRI的结合最稳定。相比于对照组,RES单药处理组、IRI单药处理组及RES+IRI联合处理组CRC细胞的增殖能力和EGFR蛋白表达水平均显著降低;且RES+IRI联合处理组CRC细胞的细胞增殖能力和EGFR蛋白表达水平均显著低于IRI单药处理组。综上,PIK3CA、EGFR、IGF1R是RES联合IRI治疗CRC的关键作用靶点,RES可通过下调EGFR信号通路转导抑制结直肠癌细胞增殖并改善其IRI化疗耐药性。