一株高产谷氨酰胺酶菌株的鉴定和酶活特性的研究

对筛选得到一株高产谷氨酰胺酶菌株进行了初步鉴定并对酶活特性做了研究。通过生理生化实验并结合菌体形态特性,结果发现该菌株可以确定该菌属于柠檬酸细菌属(Citrobacter)。通过单因素试验,考察了温度、pH、NaCl和产物谷氨酸对该菌株产生的谷氨酰胺酶的影响。结果发现菌株产生的谷氨酰胺酶的最佳反应pH为6.2,酶最适反应温度为50℃。酶最稳定的pH为6.2,温度低于40℃,酶具有较高的稳定性。高浓度的NaCl对谷氨酰胺酶活性基本无影响,谷氨酸对酶也没有明显的抑制作用。

高产中性纤维素酶菌株的诱变选育和筛选方法

设计了一种根据水解透明圈与菌落直径之比(D／d)以初步判断菌株产酶活力大小的方法,发现菌株的液体发酵酶活的对数(lgE)和菌落透明圈直径与菌落直径之比(D／d)基本上呈线性关系.采用紫外线和γ射线对中性纤维素酶产生菌木霉ZC(39 U／mL)进行了反复诱变和大量筛选,得到了一株高产中性纤维素高产突变菌株BE40-39(99 U／mL),并对出发株ZC和突变株BE40-39的性状进行了比较.

中性纤维素酶高产菌株的诱变选育及产酶条件

通过紫外线和γ射线交替诱变,筛选得到一株高产纤维素酶的突变菌株BE40 39.与出发株相比,其产酶能力提高1.3倍,发酵性状与出发菌株也有明显的差异.突变菌株发酵试验发现,Avicel是突变菌株产酶最合适的纤维素质碳源.通过对发酵培养条件的试验,得出最佳培养条件是:Avicel质量浓度为0.1g/dL,胰蛋白胨质量浓度为0.3g/dL,最适发酵温度为30℃,最佳培养基初始pH4.2,发酵5d达到产酶高峰.

红花籽粕中5-羟色胺衍生物的提取工艺

[目的]探究红花籽粕中5-羟色胺衍生物的回流提取工艺。[方法]经过单因素试验,确定乙醇为最适合提取溶剂,在单因素试验的基础上,通过正交试验确定提取过程中3个主要因素的最佳值。[结果]结果表明:原料粒度在20目以上可以有较好的提取效果;提取过程中3个主要因素的最佳值:提取温度为80℃,提取时间为3 h,液料比为3∶1。在此条件下,5-羟色胺衍生物的提取得率达到了2.592mmol/g。[结论]液料比对试验结果影响最大,其次为提取温度和提取时间。

生物拆分法制备D-天冬氨酸

[目的]利用L-天冬氨酸-β-脱羧酶生物转化拆分DL-天冬氨酸得到D-天冬氨酸的工艺过程。[方法]研究了碳源、有机氮源、转化过程pH值和转化温度对发酵液L-天冬氨酸-β-脱羧酶酶活力的影响,探讨了L-天冬氨酸-β-脱羧酶的热稳定性及L-丙氨酸对L-天冬氨酸-β-脱羧酶热稳定性的影响,并测定了拆分产物的主要指标。[结果]糖类对该酶的生物合成有明显的阻遏作用,而富马酸和苹果酸是很好的碳源物质。有机氮源中蛋白胨浓度对发酵液酶活力的影响较大,当牛肉膏浓度为0.2%,玉米浆为1.0%,蛋白胨为1.0%时发酵液酶活力可以达到最高。转化过程最适pH值为6～7。转化过程最适温度50℃。温度超过60℃酶失活比较严重。浓度6.0%以上的丙氨酸能显著提高转化过程中酶的热稳定性。[结论]利用D-天冬氨酸和L-丙氨酸的等电点的差异来分离提取D-天冬氨酸的制备工艺,其工艺简单,原料价格适宜,提取方便,工艺路线要比其他方法更便捷,更容易产业化。

产脲酶细菌的固定化及转化条件研究

[目的]研究1株高产脲酶的芽孢杆菌菌体的固定化及其固定化细胞的转化条件。[方法]研究不同浓度海藻酸钠溶液、菌体包埋量、戊二醛溶液对固定化细胞脲酶酶活的影响,以及不同pH值、不同温度、几种离子浓度对脲酶活力的影响。[结果]结果表明,固定化细胞转化最适pH值为7.5,最适温度为40℃,最适海藻酸钠溶液浓度为30 g/L,最佳包埋量为40 g/L,最适戊二醛浓度为2%;细胞经过固定化后,细胞脲酶稳定性显著提高,经过戊二醛交联后,稳定性再次提高。固定化细胞的脲酶对Cu2+、Hg2+的抑制作用有一定的抗性。[结论]固定化细胞比游离细胞更适合工业化操作。

新型微生物饲料添加剂的开发及应用效果研究

根据微生态理论,筛选出3株乳酸菌、2株芽孢菌、2株酵母菌、1株光合菌、1株酪酸菌,经过液体种子培养,再以麸皮为主要原料厌氧固体发酵生产出新型微生物饲料添加剂。通过养殖试验,发现2%添加量组比对照组提高日增重8%,提高饲料利用率10%,降低粪便NH3含量61%。

一株饲用酪酸菌特性及培养条件的研究

对本实验室分离保藏的一株饲用酪酸菌的一些特性进行了研究,发现该菌株具有较强的耐热性、耐酸性,对胆盐具有较强的耐性,对大肠杆菌有较强的抑制作用。对其碳源、氮源、无机盐等培养基组成进行了研究优化,并确定了最适培养温度等培养条件。

烟碱降解微生物的筛选、鉴定及其烟碱降解效果评价

采用烟碱降解微生物平板筛选鉴别方法,从白肋烟和烤烟中筛选出11株烟碱降解微生物,经初步鉴定,3株为细菌,8株为放线菌;采用荷移光谱法测定了11株菌对纯烟碱和白肋烟叶片中烟碱的降解能力,其中放线菌K2对烟碱的降解能力最强,对白肋烟叶片中的烟碱降解率(48h)为74.77%,对纯烟碱可以完全降解。经过生理生化试验鉴定和16SrDNA序列比对,确定放线菌K2为除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)。

酿酒工程专业“化工原理实验”教学情况问卷调查及教学改进

“化工原理实验”是酿酒工程专业的一门重要的专业基础课程。通过该课程的学习,学生受到系统、严格的工程实践训练,提高了动手能力、分析和解决复杂问题的能力。为了提高酿酒工程专业“化工原理实验”的教学效果,开展了对本课程教学情况的问卷调查,并基于本次调查研究,提出了相应的教学改进措施。

Cre/loxP系统应用于毕赤酵母基因敲除的研究进展

毕赤酵母是重组蛋白最常用的表达系统之一,蛋白高水平表达策略一直是领域内最重要的研究课题之一。在后基因组时代,高效而便捷的基因改造是一种有效提高毕赤酵母蛋白表达能力的手段,其中由Cre/loxP系统介导的基因改造技术受到了科研人员的广泛关注。综述了Cre/loxP系统的基本原理、应用于毕赤酵母基因敲除的技术路线及其关键的技术问题。

N-糖基化修饰对异源蛋白在毕赤酵母中表达的作用研究进展

毕赤酵母是目前工业上生产重组蛋白最常用的宿主之一,而蛋白高水平表达技术一直是该领域的研究热点。目前,成熟的分子生物学技术手段使改造N-糖基化修饰位点成为一种操作性较强的提高目标蛋白表达水平的策略。综述了毕赤酵母中蛋白N-糖链的结构、其介导的CNX循环和对蛋白折叠的作用以及通过N-糖基化修饰位点改造促进蛋白表达的应用研究。

毕赤酵母对甲醇胁迫的响应及其对蛋白表达的影响

醇氧化酶AOX1的启动子(P_(AOX1))被广泛应用于毕赤酵母表达外源蛋白,甲醇诱导可以使其表现出高效的转录活性,但甲醇诱导又可使毕赤酵母细胞产生过多的活性氧物质(ROS),诱发氧化胁迫响应和其他不利的生化生理响应,从而抑制蛋白的高效表达。综述了毕赤酵母对甲醇胁迫的响应及缓解甲醇胁迫的技术,并提出了UPR与甲醇胁迫响应交互作用机制的研究路线。

酿酒工程专业《化工原理》课程教学现状调查与教学改进

《化工原理》是酿酒工程专业一门重要的专业基础课程,为了解笔者所在高校酿酒工程专业学生学习本课程的情况,采用问卷调查法就教材和教授内容的难易程度、必需的基本知识储备、课内外学习情况及实践教学环节对理论课程学习的作用等方面开展调查研究。根据调查研究结果,笔者提出优化教材、调整授课知识点难度、利用线上线下相结合的教学方式、强化课前预习和课后复习以及强化实践教学环节等方面的改进措施,以期提升本课程的教学效果。

基于提高蛋白在内质网中折叠效率的策略促进外源蛋白在毕赤酵母中表达水平的研究进展

新生肽在内质网中的折叠效率对于其在毕赤酵母中的高效表达是至关重要的。在内质网质量控制机制作用下,只有正确折叠的蛋白才能通过内质网通道进入随后的分泌途径,而折叠错误和折叠缓慢的多肽则被剔除出内质网,通过ERAD途径被降解。过表达外源蛋白可能造成内质网内聚集大量的未折叠蛋白,超越内质网的加工能力,从而限制其高水平表达。本文综述了通过共表达分子伴侣或UPR转录因子Hac1p促进外源蛋白表达的研究进展,以期为毕赤酵母蛋白高效表达技术的发展提供借鉴。

张家界土家族利用八月瓜的民族植物学研究

利用民族植物学研究方法对张家界的土家族人利用八月瓜(三叶木通、白木通和木通)的传统经验进行了调查和总结,并对当前历史阶段下八月瓜的开发利用和野生种质资源的保护提出了相关建议。

地皮菜营养成分分析与评价

地皮菜，学名普通念珠藻（Nostoc cominunc Vauch．），别名地耳、地踏菇、地衣、地木耳、地软等，为蓝藻科念珠藻属的片状藻类…。历来民间有食用地皮菜的习惯，但对其开发研究的不多。通过对其营养成分的系统分析，为进一步开发利用提供依据。

酿酒工程专业“发酵工艺与设备”教学改革探索与实践

“发酵工艺与设备”是酿酒工程专业必修课程。为更好地适应人才培养需求,提升教学效果,对课程教学内容与教学方法进行改革与探索。在教学内容上进行甄选教材和优化课程体系的探索,同时将新型“四化”“课程思政”“创新创业”教育融入课程授课环节;采用趣味性教学、问题导向性教学、案例型教学、虚拟仿真教学、多媒介教学等教学方法,取得良好教学效果。