生物标志物在炎症性肠病中的研究进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)主要包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn′s disease,CD),其诊断和预后具有挑战性,因为大多数临床症状并非IBD所特有。到目前为止,尚无监测IBD的金标准测试。内窥镜检查和成像是提供有关疾病状态、位置和严重程度信息的基本诊断工具。然而,内窥镜的侵入性和高昂的成本使其不适合频繁监测IBD患者的疾病活动,目前可用的基于血液和粪便的生物标志物提供了可重复使用的定量工具,可以补充临床评估,帮助临床医师诊断和治疗IBD。基因组、蛋白质组和微生物组技术的进步促进了IBD新生物标志物的开发。文献调查表明,对IBD检测的生物标志物缺乏总结。本文综述了目前可用的生物标志物,介绍了IBD生物标志物发现的最新进展。

阿司匹林对胰腺癌细胞周期的影响及其机制

目的:观察阿司匹林及其催化产物前列腺素E2(PGE2)对胰腺肿瘤细胞周期及细胞周期相关蛋白p21^(Wafl/cipl)、p27^(Kipl/pic2)表达的影响,探讨阿司匹林抗胰腺癌的作用机制。方法:以阿司匹林和PGE2处理胰腺癌细胞后,分别采用MTT检测细胞活力、ELISA检测细胞内PGE2浓度、流式细胞仪检测细胞周期变化、Western blotting检测细胞周期相关蛋白p21^(Wafl/cipl)和p27^(Kipl/pic2)的表达水平。结果:阿司匹林可抑制胰腺癌细胞生长并呈剂量依赖性减少细胞内PGE2的生成;阿司匹林可诱导细胞周期相关蛋白p21^(Wafl/cipl)和p27^(Kipl/pic2)表达升高并引起细胞阻滞在G0/G1期。但外源性PGE2并不能拮抗阿司匹林对细胞活力、细胞周期及细胞周期相关蛋白的影响。结论:阿司匹林抑制胰腺癌细胞的生长可能并非完全通过环氧合酶途径;诱导p21^(Wafl/cipl)和p27^(Kipl/pic2)表达的升高、进而诱导细胞周期的阻滞可能是其作用机制之一。

DC-CIK治疗慢性乙型肝炎患者疗效观察

目的研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)活化后的树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对慢性乙型肝炎的治疗效果。方法抽取慢性乙型肝炎患者自体外周血,培养自体DC-CIK,经HBsAg活化后回输患者体内。检测治疗前和治疗24周后患者外周血HBV DNA、ALT和HBsAg水平。结果DC-CIK细胞治疗可抑制乙型肝炎患者外周血HBV DNA复制[(6.84±1.06)log_(10)拷贝/mL对(5.29±1.77)log_(10)拷贝/mL,P=0.000],病毒学应答率为63.6%。同时可减少HBsAg表达、降低ALT水平.但差异无统计学意义[(176.8±112.7)ng/mL对(153.0±120.6)ng/mL.P=0.085];(199.1±108.2)IU/mL对(166.2±131.8)IU/mL.P=0.1 21]。结论DC-CIK治疗是一种有效的抗乙型肝炎病毒方法。

慢性HBV感染者树突状细胞体外经HBsAg活化后的免疫效应

目的研究慢性HBV感染者、健康人的外周血树突状细胞(DC)经HBsAg活化后免疫功能的差异。方法从慢性HBV感染组及健康组外周血中培养扩增(以HBsAg刺激)DC和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)。用流式细胞仪检测DC、CIK的表型,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测DC、CIK上清液中的白细胞介素-12(IL-12)的浓度,用CCK-8比色法测定DC共培养的CIK对HepG2.2.15细胞的杀伤活性。结果经HBsAg致敏的健康组DC表面标志CD1a、CD80、HLA-DR及CD83阳性率明显高于慢性HBV感染组,差异具有统计学意义(P<0.01);慢性HBV感染组中经HBsAg致敏的DC表面标志阳性率与未经HBsAg致敏者相比差异无统计学意义(P>0.05)。健康组DC经HBsAg致敏后诱导的CIK对HepG2.2.15细胞的杀伤率显著高于慢性HBV感染组(P<0.01)。结论慢性HBV感染组与健康组DC经HBsAg活化后,对HepG2.2.15细胞的免疫效应差异有统计学意义,健康组高于慢性HBV感染组。

慢性乙型肝炎患者外周血Treg细胞对DC细胞的抑制作用

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血中Treg细胞的比例,并探讨其对DC细胞的免疫抑制作用。方法抽取慢性乙型肝炎(CHB)患者和正常对照组的外周血,流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例以及DC细胞表面CD80和人白细胞(位点)DR抗原(HLA-DR)的表达;在DC培养的不同时间内加入不同比例CHB患者的Treg细胞,检测DC对淋巴细胞增殖功能的影响;检测DC培养的不同时间内加入不同比例CHB患者的Treg细胞后培养上清中细胞因子白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤转化因子-β(TGF-β)的表达。结果正常人外周血中Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞的比例为(4.12±1.36)%,CHB患者外周血中Treg细胞的比例为(10.54±3.27)%,CHB患者外周血中的Treg细胞比例明显高于正常组,差异有统计学意义;CHB患者表面分子CD80的表达为(60.12±5.23)%,HLA-DR的表达为(61.21±4.28)%;而正常组的CD80的表达为(84.13±4.33)%,HLA-DR的表达为(86.57±3.82)%,CHB患者DC细胞表面分子CD80和HLA-DR的表达均显著低于正常组,差异有统计学意义;经Treg细胞处理后,DC细胞刺激淋巴细胞的增殖能力下降,淋巴细胞增殖的抑制率较正常组均显著升高;Treg细胞与DC细胞比例为1∶1、1∶10以及1∶100时,IL-10和TGF-β的表达均显著高于正常组,并且随着Treg细胞的比例增高,细胞因子的水平也相应增高,差异有统计学意义。结论 CHB患者外周血中Treg细胞比例增高,可能是通过诱导IL-10和TGF-β的表达抑制DC细胞的免疫功能。

小肠干细胞的生物学特性及调控

小肠粘膜上皮细胞终身在不断地自我更新,这一过程依赖小肠隐窝中的干细胞的持续增殖、分化取代外层的终末分化细胞来完成。小肠干细胞在其周围生长因子、细胞因子以及细胞外基质的调节下,通过不对称或对称分裂来实现其自身数目的稳定或增加,并通过分化为功能细胞或凋亡来保持组织结构和功能的稳定。文章就小肠干细胞生物学特性及其调控作一综述。

脐血单个核细胞输注治疗失代偿期肝硬化的临床观察

目的:探讨人脐血单个核细胞输注治疗失代偿期肝硬化的临床效果。方法:29例失代偿期肝硬化患者,给予输注脐血单个核细胞。分别在治疗后第4、8周复查肝功能、凝血功能,记录临床症状及不良反应情况。结果:治疗组输注治疗后第8周,患者临床症状、体征改善,肝功能化验指标总胆红素水平较术前下降[(70.8±38.3)μmol/L vs(101.3±42.4)μmol/L],差异有统计学意义(P=0.035),白蛋白水平较术前升高(29.9±4.5)g/L vs(28.6±5.2)g/L,差异有统计学意义(P=0.006);谷丙转氨酶、胆汁酸较术前有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。凝血酶原时间下降(15.28±2.91)s vs(16.67±3.87)s,差异有统计学意义(P=0.025),凝血功能改善。对照组治疗前后各指标均无明显改变(P>0.05)。结论:脐血单个核细胞移植治疗可使失代偿期肝硬化患者肝功能改善,可作为肝硬化患者的临床治疗方案。

DC-CIK联合IFN-γ与IFN-γ、IFN-α1b治疗慢性乙型肝炎疗效比较

目的研究DC-CIK联合IFN-γ对慢性乙型肝炎的疗效。方法 86例慢性乙型肝炎患者分别接受DC-CIK联合IFN-γ与IFN-γ、IFN-α1b治疗48周。检测治疗前和治疗后24周患者外周血HBV DNA、ALT和肝纤维化4项水平。并以FibroScan肝纤维化无创检测仪检测治疗前和治疗后24周的肝硬度值。结果治疗后3组受试者HBV DNA载量差异有统计学意义(F=3.789,P=0.027),DC-CIK联合IFN-γ组和IFN-α1b治疗组的HBV DNA水平要低于IFN-γ治疗组(P=0.044和P=0.010)。DC-CIK联合IFN-γ组以及IFN-γ治疗组治疗后肝硬度值较治疗前明显下降(t=4.403,P=0.000;t=2.611,P=0.015)。结论 DC-CIK联合IFN-γ治疗可提高IFN-γ的抗纤维化作用。

钙卫蛋白、钙激活蛋白在结直肠腺瘤中的表达及意义

目的探讨钙卫蛋白、钙激活蛋白在结直肠腺瘤组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法对结直肠腺瘤组织标本中钙卫蛋白、钙激活蛋白的表达进行检测。结果钙卫蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关(P>0.05)。钙激活蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关(P>0.05)。但不同病理异型性之间的差异具有统计学意义(χ2=7.882,P=0.019)。钙卫蛋白和钙激活蛋白表达无关联(r=-0.104)。结论钙卫蛋白的高表达及钙激活蛋白的低表达可成为早期预测腺瘤癌变的的分子生物学指标。

人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化的疗效观察

目的:观察人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化患者的临床疗效。方法:失代偿期肝硬化患者42例,根据Child-Pugh分级均为B或C级,其中行人脐带间充质干细胞治疗22例(观察组),未行干细胞治疗20例(对照组)。2组常规治疗相同。分别观察治疗前及治疗后4、8周2组患者血液生化、凝血、临床症状及体征等指标的变化。结果:与治疗前相比,2组治疗后谷丙转氨酶、总胆红素、血氨水平下降,白蛋白合成增加;凝血酶原时间缩短,凝血酶原活动度增加(P均<0.05);2组临床症状和体征均有改善,观察组优于对照组。结论:人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化能改善患者临床症状和检测指标,具有较好的临床疗效和安全性。

质子泵抑制剂引发小肠细菌过度生长的风险及症状评估

质子泵抑制剂（PPI）因其强大的抑酸作用及低毒性的特点,被广泛应用于酸相关性疾病的临床治疗及预防非类固醇类抗炎药相关的胃肠出血风险防范,产生了良好效果。但随着临床应用的日益广泛以及对其药物特性和安全性的进一步认识,其可能的潜在风险也受到了关注。

慢性HBV感染者、健康人树突状细胞经HBsAg活化后的免疫效应差异

目的:研究慢性HBV感染者、健康人外周血树突状细胞(dendriticcells,DC)经HBsAg活化后的免疫功能的差异.方法:从慢性HBV感染者、健康人外周血中培养扩增DC和CIK,在DC成熟前加入纯的HBsAg刺激,并再与同一来源的CIK共同培养.用流式细胞仪检测DC、CIK表型,用ELISA法检测DC、CIK共培养上清液中的IL-12浓度,用CCK-8比色法测定DC诱导CIK对HepG2.2.15细胞的杀伤活性.结果:未经HBsAg致敏的健康人DC表面标志CDla、CD80及CD83明显高于慢性HBV感染者(P<0.05);经HBsAg致敏的健康人DC表面标志均高于慢性HBV感染者,差异具有统计学意义(P<0.01);慢性HBV感染者经HBsAg致敏的DC表面标志与未经HBsAg致敏无显著性差异.CIK细胞CD3、CD8、CD3、CD56的双阳性表达率,健康人HBsAg致敏者明显高于慢性HBV感染者及未经HBsAg致敏的健康人(P<0.01,P<0.05);慢性HBV感染组HBsAg致敏与未经HBsAg致敏者比较无显著性差异(P>0.05).HBsAg致敏DC诱导CIK对HepG2.2.15细胞的杀伤率,健康人显著高于慢性HBV感染者(P<0.01).健康人HBsAg致敏DC、CIK共培养上清液中的IL-12浓度显著高于慢性HBV感染者(P<0.001);慢性HBV感染者HBsAg致敏与未经HBsAg致敏IL-12含量差异不显著(P>0.05).结论:慢性HBV感染者、健康人DC经HBsAg活化后对HepG2.2.15细胞的免疫效应存在显著差异:健康人高于慢性HBV感染者.

祛毒退黄汤结肠滴注给药对慢性乙型肝炎肠源性内毒素血症、外周血Th_(17)/Treg细胞因子和肝功能的影响

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者肠源性内毒素血症(TEM)对外周血Treg细胞、Th_(17)细胞及对肝功能的影响。方法:收集35例健康对照者(HC)和70例CHB患者且血浆内毒素阳性患者的外周血;应用流式细胞术测定外周血Treg细胞(CD_4^+Fox P_3^+)及Th_(17)细胞(CD_4^+IL-17)的水平;并结合血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)进行分析。结果:与健康对照者比较,CHB患者的Treg细胞百分比、Th17细胞百分比显著升高(P<0.05);CHB内素素阳性组患者(对照组)Treg细胞百分比、Th_(17)细胞百分比水平均明显高于研究组(P<0.05)。并且治疗后研究组肝功能指标血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)的改善较对照组更为明显(P<0.05)。两组患者不良反应发生率差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:自拟祛毒退黄汤结肠滴注给药对慢性乙型肝炎肠源性内毒素血症症状和肝功能均有较为明显的改善作用,副作用小,值得临床应用。

NS398对胰腺癌细胞周期及其蛋白依赖性激酶抑制物p21^(Wafl/cipl)、p27^(Kipl/pic2)的影响

目的:观察选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对胰腺癌细胞周期及细胞周期相关蛋白p21Wafl/cipl、p27Kipl/pic2转录和表达的影响,探讨NS398的抗胰腺癌机制。方法:以NS398和前列腺素E2(PGE2)处理SW1990人胰腺癌细胞,分别采用MTT法检测细胞活力,酶联免疫分析法(ELISA)检测细胞内PGE2含量,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化,并以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western印迹检测COX-2及细胞周期相关蛋白p21Wafl/cipl、p27Kipl/pic2的mRNA和蛋白水平。结果:NS398抑制胰腺癌细胞生长,并呈剂量依赖性减少细胞内PGE2的生成;NS398诱导细胞周期相关蛋白p21Wafl/cipl和p27Kipl/pic2转录和表达的升高并诱导部分细胞阻滞在G0/G1期(较对照组升高11%);10 nmol/L的外源性PGE2可增加胰腺癌细胞的活力,但并不能拮抗NS398对细胞活力的抑制作用或细胞周期分布的改变,以及COX-2、p21Wafl/cipl、p27Kipl/pic2的转录和表达。结论:NS398可能通过增强p21Wafl/cipl和p27Kipl/pic2的表达而诱导细胞周期的阻滞,从而抑制胰腺癌细胞的生长活力。但NS398并非通过抑制COX-2的唯一机制,还可能存在其它非COX-2途径。

解郁软坚活血方联合西药治疗乙型肝炎肝硬化临床研究

目的:探讨解郁软坚活血方联合西药恩替卡韦及甘草酸二铵治疗乙型肝炎肝硬化的临床疗效。方法:选取乙型肝炎肝硬化患者100例为研究对象,采用随机数字表分组法将患者分为对照组和观察组,各50例。所有患者均给予保肝、利尿、抗炎及抗乙型肝炎病毒等治疗。对照组给予恩替卡韦片(0.5mg/d、1次/d),甘草酸二铵胶囊(150mg/次,3次/d)治疗。观察组在对照组基础上给予解郁软坚活血方治疗。比较两组治疗前后肝纤维四项(HA、LN、Ⅳ-C及PCⅢ)变化、肝功、生活质量及临床疗效情况。结果:治疗4、8、12个月后,两组患者的中医证候积分均明显下降,且观察组比对照组下降更明显(P<0.05)。治疗后两组患者肝功指标均明显改善,且观察组比对照组改善更明显(P<0.05)。两组患者治疗前HA、LN、Ⅳ-C及PCⅢ水平比较差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后HA、LN、Ⅳ-C及PCⅢ水平均较治疗前有明显降低(P<0.05);观察组治疗后HA、LN、Ⅳ-C及PCⅢ水平均明显低于对照组(P<0.05)。两组均未出现明显不良反应,观察组总有效率92.00%(46/50)明显高于对照组74.00%(37/50),差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后QLQ-C30评分显著升高(P<0.05);观察组治疗后QLQ-C30评分明显高于对照组(P<0.05)。结论:中药解郁软坚活血方联合西药恩替卡韦及甘草酸二铵可有效降低乙型肝炎肝硬化患者HA、LN、Ⅳ-C及PCⅢ等四项肝纤维指标水平,延缓肝硬化进展,临床治疗效果显著。

健康人1562名臂踝脉搏波速度及其影响因素初探

目的探讨健康人臂踝脉搏波速度(baPWV)及其影响因素的相关性。方法应用动脉硬化检测仪VP-1000(BP203RPE,Ⅱ型,PWV/ABI型)测量1562名健康人臂踝脉搏波速度,并检测空腹血糖、血脂等血清生化指标。结果多元逐步回归分析显示,年龄(β=0.367,P<0.01)、收缩压(β=0.576,P<0.01)、空腹血糖(β=0.08,P<0.01)、男性(β=0.072,P<0.01)、体质量指数(BMI)(β=-0.098,P<0.01)是影响baPWV的独立危险因素(累积R^2=0.671)。结论 baPWV与年龄、男性性别、收缩压、空腹血糖存在正相关,与BMI成负相关。

脐血干细胞移植治疗重症肝炎效果观察

目的探讨人脐血干细胞治疗重症肝炎的效果。方法将40例重症肝炎患者随机分为对照组20例及观察组20例,2组均采用复方甘草酸苷、还原性谷胱甘肽等常规治疗,观察组同时加用移植脐血干细胞悬液治疗,首次经肝动脉穿刺输入,之后通过周围静脉输注脐血干细胞悬液。监测2组肝功能、白蛋白 (ALB)、凝血酶原活动度 (PTA)、甲胎蛋白 (AFP)等相关指标,观察2组临床症状变化情况,并进行不良反应检测。结果治疗后4周时,观察组PTA (%)、AFP (μg/L)较对照组升高 (53.56±5.15 vs 48.26±5.53,92.16±9.09 vs 43.57±11.33,P<0.01);治疗后第8周,观察组丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、总胆红素 (TBIL)、AFP低于对照组,PTA高于对照组 (62.61±4.35 vs 54.95±3.01,P<0.05或P<0.01),2组ALB、血氨差异无统计学意义 (P>0.05)。2组治疗均未发生严重并发症及不良反应,病死率差异无统计学意义 (20%vs 35%,χ2=0.818,P>0.05)。结论脐血干细胞治疗重症肝炎有较好的疗效,且安全、无明显不良反应,可作为重症肝炎患者新的治疗方法。

肠易激综合征临床特征与治疗效果

目的:探讨肠易激综合征临床特征与治疗效果分析。方法:随机选取2015-09~2016-09收治的肠易激综合征患者120例,分为研究组与对照组各60例,对照组患者予以培菲康治疗,研究组予以培菲康联合痛泻宁颗粒治疗,均治疗8周后,对比观察两组患者治疗前后临床症状情况,及治疗后疗效。结果:治疗后排便异常、腹痛、腹胀等不适均得到改善,研究组症状程度评分与症状频率评分分别是(0.51±0.01)分、(0.94±0.05)分,均低于对照组患者的(2.94±0.54)分、(2.84±0.35)分,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者总有效率为96.67%(58例),明显高于对照组患者88.33%(53例),差异有统计学意义(χ2=3.022 P<0.05)。结论:培菲康联合痛泻宁颗粒治疗肠易激综合征是一种安全有效的治疗方式,可改善肠道微环境,减轻患者排便异常、腹痛、腹胀等不适,提升患者免疫力,最终取得较为满意的临床效果,可在临床工作中推广应用。

不同间隔时间EVL术治疗肝硬化再出血的临床分析

目的分析不同间隔时间内镜下食管静脉曲张套扎术(EVL)术治疗预防肝硬化患者再出血的效果。方法选取2018年1月至2019年2月我院收治的70例肝硬化出血患者,所有患者采用EVL术治疗,根据首次手术和第二次手术间隔时间差异分为甲乙丙三组,甲组为两次手术间隔时间不超过1月,共计24例;乙组两次手术间隔时间为1~2月,共计20例;丙组两次手术时间间隔2~3月,共计26例。选取同时段30例使用保守治疗的肝硬化出血患者作为对照组。观察四组患者治疗后不同时间的再出血发生率差异,同时统计治疗12月后四组患者并发症发生情况以及死亡情况。结果甲组、乙组、丙组、对照组治疗后3月再出血率分别为12.5%、20.0%、23.1%、36.7%,治疗后6月再出血率分别为25.0%、40.0%、23.4%、53.3%,治疗后12月再出血率分别为41.7%、60.0%、61.5%、73.3%。组间比较结果:Waldχ^2=5.736,P=0.125>0.05,组间差异不具有统计学意义。与对照组比较甲组、乙组、丙组概率分别为0.021、0.141、0.266,OR值分别为e^-1.231=0.292、e^-0.790=0.454、e^-0.533=0.587。重复测量时间比较结果:Waldχ^2=41.734,P=0.000<0.05,时间差异有统计学意义,不同时点再出血发生率存在差异。与术后12月比较3月、6月概率分别为0.000、0.000,OR值分别为e^-1.491=0.225、e^-0.722=0.486,表明不同时间再出血发生率存在差异,时间越长再出血发生率越高。甲组、乙组、丙组、对照组并发症发生率分别为8.3%、15.0%、15.4%、30.0%,四组在并发症发生率方面的差异有统计学意义(P<0.05)。甲组、乙组、丙组、对照组病死率分别为0.0%、5.0%、7.7%、16.7%,四组在病死率方面的差异有统计学意义(P<0.05)。结论EVL术预防肝硬化患者再出血的效果明显高于药物治疗,且两次手术间隔时间不超过1月的总体疗效最好,能够有效降低患者再出血率和并发症发生率,从而提高患者的存活率。