海藻酸钠固定化香菇纤维素酶的比较研究

从香菇中提取纤维素酶,研究了以海藻酸钠为载体固定化纤维素酶的方法,并对不同的固定方法进行了比较。结果表明,3种固定化酶较游离酶有更好的耐热性与pH值稳定性,其中交联包埋法固定化酶在重复利用性、与底物的亲和程度、酶的固定率等方面均优于直接包埋法和包埋交联法,在重复使用6次后,仍保持72.2%的酶活力。

微胶囊法固定平菇半纤维素酶

以微胶囊法固定平菇半纤维素酶,探讨固定化条件与固定化酶的酶学性质。结果表明:当海藻酸钠浓度为3%,戊二醛浓度为1%时,固定化酶有较高的活力回收率;固定化酶的最适温度比游离酶提高了10℃,最适pH值较游离酶向酸性范围移动0.4个单位;游离酶和固定化酶的米氏常数分别为0.906 g/L和0.937 g/L;固定化酶的耐热性较好,在60～80℃下仍能保持较高的酶活力,具有良好的贮存稳定性。常见的大部分金属离子对固定化酶的活力影响较小。

海藻酸钠明胶联合固定化香菇纤维素酶的技术研究

以海藻酸钠、明胶为载体,戊二醛为交联剂,对香菇纤维素酶进行固定化。研究了海藻酸钠浓度、明胶浓度、氯化钙浓度、给酶量、戊二醛浓度及交联时间对固定化酶的影响,并对固定化酶的最适反应温度、最适pH、温度稳定性等酶学性质进行了测定。结果表明:海藻酸钠和明胶的最佳浓度分别为3.5%和3.0%,戊二醛浓度为1.0%。与游离酶相比,固定化酶最适反应pH向酸性方向移动了0.4,最适反应温度提高了5℃,并且固定化酶具有良好的贮存稳定性。

两种改性壳聚糖载体对香菇纤维素酶固定化的研究

制备聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)载体与戊二醛改性壳聚糖载体,并以这两种载体对香菇纤维素酶进行固定化。探讨了载体制备过程中的主要影响因素与最适固定化酶条件,并对两种载体固定化纤维素酶的性能进行对比研究。结果表明,聚乙二醇改性壳聚糖与戊二醛改性壳聚糖固定纤维素酶的Km值分别为1.205、0.626g/L,游离酶的Km值为0.759g/L,两种载体固定纤维素酶的最适温度均比原酶有所提高,且前者的最适温度范围明显变宽;与游离酶相比,固定化酶有良好的操作和贮存稳定性。

苯基哌嗪衍生物的合成及抗肿瘤活性

合成了一系列结构全新的苯基哌嗪类衍生物,采用溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法进行了初步体外抗肿瘤细胞增殖活性研究.结果表明,当哌嗪环4位连有苯磺酰胺结构时,其1位引入苯并呋喃结构的目标化合物4t的活性最好.化合物4t对多种瘤株具有明显抑制作用,特别是对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制强度与阳性对照药棉酚相近.

白蛋白冠的构建及其在药物制剂研究中的应用

蛋白冠(protein corona)是纳米颗粒与血浆蛋白之间发生非特异性相互作用后在表面吸附的蛋白层。近年来研究表明,在纳米颗粒表面修饰特定血浆蛋白质构建蛋白冠具有延长纳米颗粒血液半衰期、促进纳米颗粒靶向递送等作用,引起载药系统研究的广泛关注。其中,以血液中含量最为丰富的蛋白质白蛋白构建白蛋白冠(albumin corona)研究最为广泛。基于此,本文系统性总结了构建白蛋白冠的方法及其在药物制剂研究中的应用,以期为药物制备过程中构建白蛋白冠提供参考。

结构修饰的基于聚乙烯亚胺的载体在基因递送方面的研究进展

聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)是阳离子聚合物非病毒基因转染载体的代表之一,具有转染效率高,易于从溶酶体中逃逸,易于化学修饰等优点。但PEI毒性大,靶向性低,不易在体内生物降解的缺点限制了其应用。因此,许多研究者致力于PEI的结构修饰,在一定程度上改善了PEI的缺点。该文综述了生物相容性材料修饰的基于PEI的载体、靶向因子修饰的基于PEI的载体及基于PEI的环境响应型可解聚载体在基因递送方面的研究进展,以期为合理设计基因递送体系提供新的思路和方法。

颗粒酶B基因纳米粒与盐酸多柔比星共载温敏凝胶的制备及初步理化性质评价

设计以温敏凝胶作为颗粒酶B质粒(pGZMB)和盐酸多柔比星(DOX·HCl)的共载载体以期实现基因和化疗药物联合治疗。选择支链型聚乙烯亚胺(bPEI)作为pGZMB的载体,自组装形成bPEI/pGZMB纳米粒,通过琼脂糖凝胶电泳和粒径电位结果研究形成bPEI/pGZMB纳米粒的最优质量比并对最优处方的外观形态、粒径分布、Zeta电位、转染能力进行考察。以胶凝温度为指标考察温敏凝胶基质普朗尼克F127与普朗尼克F68的用量及共载入bPEI/pGZMB纳米粒和DOX·HCl后对胶凝温度的影响,结合胶凝时间和通针性结果优化共载bPEI/pGZMB纳米粒和DOX·HCl的F127/F68温敏凝胶(DOX·HCl&bPEI/pGZMB-G)处方,并对其流变学、体外释放特性、凝胶材料的细胞毒性等进行评价。结果表明最优质量比90∶32制备的bPEI/pGZMB纳米粒形态圆整,大小较为均一,平均粒径为(60.19±0.68)nm,平均电位为(8.86±1.08)m V,且具有较高的转染效率。最优处方制备的DOX·HCl&bPEI/pGZMB-G在室温下为溶液状态,当温度在37℃时可转变为凝胶状态,流变学性质考察结果也说明DOX·HCl&bPEI/pGZMB-G具有良好的温度敏感特性并表现为假塑性流体特征;体外释放结果显示与溶液组相比温敏凝胶组具有一定的缓释特性;体外抗增殖实验证明了温敏凝胶材料细胞毒性较低,安全性良好。以上结果表明以F127/F68为基质的温敏凝胶可作为DOX·HCl和pGZMB肿瘤治疗局部给药良好的共递送载体。