人T细胞白血病1型病毒Tax蛋白、高迁移率组蛋白1及自噬

人T细胞白血病1型病毒(HTLV-1)是引起成人T细胞白血病的病原体,癌蛋白Tax在HTLV-1病毒复制及疾病转归过程中发挥重要的促进作用;自噬是细胞质内一种溶酶体降解途径,可以发挥细胞防御作用,参与病原体的清除。高迁移率组蛋白作为细胞应激的产物,在多种疾病中出现高表达,在细胞自噬、DNA损伤修复、炎症因子释放等生理或病理过程中发挥重要作用,与病原体感染关系密切。本文就Tax、高迁移率组蛋白1及细胞自噬三者之间的相互关系做一综述。

多发性硬化患者血清和脑脊液IL-33的表达及其临床意义

目的 探讨白细胞介素33(IL-33)在多发性硬化(MS)患者血清和脑脊液中的变化及其临床意义。方法 选取MS患者122例(MS组)、非炎性神经系统疾病患者122例(对照组)。检测所有患者的血清IL-33水平,检测MS组和对照组各30例患者脑脊液IL-33水平。收集MS患者临床资料,包括扩展残疾状态量表(EDSS)评分、性别、年龄、MS分型及病程。采用Pearson相关分析评估各项指标之间的相关性。结果 MS组血清和脑脊液IL-33水平显著高于对照组(P<0.01)。女性MS患者血清IL-33水平显著高于男性(P<0.05),脑脊液IL-33水平男性、女性之间差异无统计学意义(P>0.05)。不同发病年龄、EDSS评分、病程和类型的MS患者之间血清IL-33水平差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,MS患者血清IL-33水平与EDSS评分、年龄、病程均呈正相关(r值分别为0.724、0.285、0.537,P<0.05)。结论 MS患者血清和脑脊液IL-33水平有所升高,且与MS的严重程度有关。

miR-335在骨肉瘤患者血清中的表达及临床意义

目的探讨微小RNA-335(miR-335)在骨肉瘤患者血清中的表达及临床意义。方法选取42例骨肉瘤患者作为骨肉瘤组,42例健康志愿者作为对照组,采用实时荧光定量PCR检测两组血清miR-335水平并进行比较,分析血清miR-335水平与骨肉瘤患者临床特征的关系,采用受试者工作特征曲线评估血清miR-335对骨肉瘤的诊断价值。结果对照组血清miR-335水平为0.97±0.27,明显高于骨肉瘤组的血清miR-335水平(0.43±0.14),差异有统计学意义(t=11.53,P<0.05)。不同分化程度和有无远处转移的骨肉瘤患者血清miR-335水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-335诊断骨肉瘤的灵敏度为73.2%,特异度为87.8%,曲线下面积为0.824,截断值为0.55。结论骨肉瘤患者血清miR-335表达下调,其可能参与了骨肉瘤的发生、发展,并可作为骨肉瘤诊断标志物。

CYP2C19基因多态性与冠心病患者氯吡格雷疗效的相关性研究

目的对CYP2C19基因多态性与冠心病患者氯吡格雷疗效的相关性进行分析探讨,为今后的临床工作,提供有价值的参考信息。方法选取2015年1月至2016年1月该院收治的,拟接受经皮冠状动脉介入术(PCI)进行治疗的冠心病患者128例作为研究对象,对其均开展氯吡格雷治疗,负荷剂量为300mg,维持剂量为75mg,将受试者分成氯吡格雷抵抗组与反应组,对比两组患者药物代谢CYP2C19基因型,观察CYP2C19基因型对氯吡格雷反应性的影响。结果该组受试者中,氯吡格雷抵抗者27例,检出CYP2C19慢代谢基因型携带者共计16例,慢代谢基因型患者VASP-PRI与快代谢基因型、中间代谢基因型患者比较,差异有统计学意义(P<0.05);氯吡格雷抵抗组与氯吡格雷反应组临床不良终点事件发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯吡格雷抵抗的危险因素中,包括CYP2C19慢代谢基因型,氯吡格雷抵抗会使临床不良终点事件发生风险增加,临床应对其给予足够的重视。

三种血液检测指标联合检测在慢性支气管炎急性发作中的诊断价值分析

目的探讨联合检测红细胞沉降率(ESR),C-反应蛋白(CRP),血浆纤维蛋白原(FIB)在慢性支气管炎急性发作诊断中的临床价值。方法选择郑州市第七人民医院呼吸内科2015年1月—2016年5月收治的180例慢性支气管炎患者,其中100例急性发作期,80例缓解期。同期选择80例健康体检者作为对照组。分别对其进行红细胞沉降率(ESR),C-反应蛋白(CRP),血浆纤维蛋白原(FIB)检测,并对检验结果对比分析。结果慢性支气管炎急性发作患者与缓解期和健康体检者ESR、CRP、FIB指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测ESR、CRP、FIB在慢性支气管炎急性发作患者中有较高的临床诊断价值。

血细胞复检联合血细胞分析仪对于提高检验质量的探讨

目的:探讨血细胞复检联合血细胞分析仪对于提高检验质量的临床价值。方法:选取2015-07~2016-06我院行血常规检查的患者759例,以血细胞分析仪检测外周血标本同时做血涂片细胞形态学复检,对检测结果进行统计学分析。结果:759份标本中需复检118例,复检率15.55%(118/759);真阳性率8.70%(66/759),假阳性率6.85%(52/759),真阴性率82.74%(628/759),假阴性率2.11%(16/759);血细胞分析仪对幼稚粒细胞、杆状粒细胞、原始细胞的假阳性率更为明显(P<0.05)。结论:血细胞复检联合血细胞分析仪应用于血常规检验能有效提高检验质量,防止漏检和误检,值得临床推广应用。

HTLV-1 Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制的研究

目的：探讨成人T淋巴细胞白血病病毒1型（ HTLV-1病毒） Tax蛋白阳性T细胞TaxP中早期生长反应基因-1（EGR-1）表达调控的机制。方法构建不同长度的EGR-1调控序列报告基因，将其转染TaxP细胞，加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082或同等体积的二甲基亚砜（DMSO），24 h后收集细胞检测荧光素酶活性；TaxP细胞上清中加入BAY 11-7082或同等体积的DMSO，24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达；将Tax及其突变体M22和M47分别转染293 T细胞，24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达。结果成功构建了不同长度及突变体的EGR-1调控序列荧光素酶报告基因；荧光素酶报告基因检测显示：相对于E1、E2而言， E3、DelE、MutE的荧光素酶活性明显降低，加入BAY 11-7082后，E1、E2的荧光素酶活性明显降低（P＜0．01），而E3、DelE、MutE无明显变化；同样地，免疫印迹检测显示加入BAY 10-7082后，EGR-1蛋白表达明显降低；相对于野生型和M47，转染M22突变体后，293 T细胞EGR-1蛋白表达明显降低。结论 NF-κB是Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控的关键核因子。

胞外高迁移率组蛋白1对HTLV-1感染的T细胞中病毒复制的影响

目的探讨胞外的高迁移率组蛋白1（high mobility group box 1，HMGB1）对人T淋巴细胞白血病病毒1型（human T-cell leukemi int1，HTLV-1）感染的T细胞中病毒复制的影响。方法ELISA检测HTLV．1病毒阴性T细胞系Jurkat、MOLT4细胞及HTLV-1病毒阳性的T细胞系MT2、MT4细胞培养上清中的HMGBl水平；将HTLV-1的长末端重复序列荧光素酶报告基因pHTLV-1-LTR-luc转染病毒阳性细胞MT2，随后加入终浓度为0．25、0．50、0．75μs／ml的HMGBl多克隆抗体（PcAb）及其同型对照抗体，30、100、300ns／ml的重组人HMGB1蛋白（rhHMGB1）及其对照PBS，48h后检测荧光素酶活性；在病毒阳性细胞MT2中加入终浓度为0．25斗晷／ml的HMGBlPcAb及同型对照抗体，300ng／ml的rhHMGB1及对照PBS，real．timePCR检测病毒编码基因tax、poll、pol2、p19、gag、env。结果HTLv．1病毒阴性T细胞系和HTLV．1病毒阳性细胞系培养上清中的HMGBI水平无明显差异；0．25μg／ml的HMGBlPcAb可明显抑制HTLV-1-LTR的转录活性，而300ng／ml的rhHMGB1可明显促进HTLV．1．LTR的转录活性；real．timePCR检测显示0．25恤g／ml的HMGBlPcAb可明显抑制病毒编码基因poll,po／2、gag、e删的表达，300ns／ml的rhHMGB1可明显促进pol1、pol2、gag、env的表达。结论胞外的HMGB1可促进HTLV-1病毒感染T细胞的病毒复制。

CYP2C19、CYP3A5基因多态性与心肌梗死的相关性研究

目的探讨CYP2C19、CYP3A5基因的多态性与心肌梗死发病风险的相关性。方法随机选取心肌梗死患者及健康对照各500例,采用荧光PCR法和Sanger测序分别检测其CYP2C19、CYP3A5基因的多态性,用Logistic回归分析其与心肌梗死的相关性,用Quanto软件评估统计学效能。结果CYP2C19基因rs4986893位点的AG、GG基因型和A等位基因的频率以及CYP3A5基因rs776746位点的AA、AG、GG基因型和G等位基因频率在两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05),CYP2C19基因rs4244285、rs12248560位点的基因型和等位基因以及rs4986893位点的AA基因型的频率在两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。在校正年龄、性别、体质指数后,Logistic回归分析显示CYP2C19基因rs4986893的AG基因型和A等位基因以及CYP3A5基因rs776746的GG基因型和G等位基因可能是心肌梗死发病的风险因素,而rs4986893的GG基因型以及rs776746的AA、AG基因型可能是心肌梗死的保护因素。依据样本量、样本结构和等位基因频率以及Quanto分析,本研究的结果具有理想的统计学效能(99%)。结论CYP2C19、CYP3A5基因的多态性可能增加心肌梗死的发病风险。

rhHMGB1对HTLV-1＋MT2细胞中HMGB1相关受体表达的影响

目的探讨重组人高迁移率族蛋白1（recombinant human HMGB1，rhHMGB1）对人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）感染的T细胞中与HMGB1相关膜受体表达的影响。方法病毒阳性细胞MT2中加入终浓度为1μg／ml的人源化重组人rhHMGB1蛋白或等体积的PBS，培养24h后，以流式细胞术、免疫印迹、免疫荧光检测膜受体晚期糖基化终产物受体（receptor for advanced glycosylation end products，RAGE）、T细胞相关免疫球蛋白黏蛋白3（T cell immunoglobulin mucin3，TIM-3）、Toll样受体4（Toll like receptor4，TLR4）的表达及分布。结果流式细胞术检测结果显示1μg／ml rhHMGB1刺激MT2细胞后，与对照相比RAGE表达下降，TLR4的表达明显升高（P〈0．05）；免疫印迹检测结果显示1μg／ml rhHMGB1刺激MT2细胞后，细胞总蛋白和胞质中，膜受体RAGE和TLR4表达均明显升高（P〈0．05），而TIM-3的表达没有明显变化；免疫荧光检测结果显示rhHMGB1刺激MT2细胞后TLR4和RAGE的荧光强度均有增加，而TIM-3的荧光强度没有明显变化，且TLR4、TIM-3集中于细胞膜，而RAGE则集中于细胞质，细胞膜表达较少。结论胞外的HMGB1可促进HTLV-1感染T细胞RAGE和TLR4的表达。